ABSTRACT
Se comparó el efecto antibacteriano de las lactoferrinas (Lfs) bovina y porcina sobre Escherichia coli K88+ (E. coli K88+), uno de los principales agentes etiológicos de las diarreas en lechones en el hemisferio norte. Las Lfs se purificaron por cromatografía de intercambio iónico, confirmando su pureza por electroforesis en condiciones desnaturalizantes y reductoras (SDS-PAGE) en geles al 8% y por inmuno-detección con anticuerpos anti- lactoferrina. La actividad bacteriostática se probó utilizando concentraciones de 0,5 y 1,0 mg/mL de Holo (saturada de hierro) y Apo-Lf (libre de hierro). En todos los casos la actividad bacteriostática de las Holo-Lfs fue insignificante, mientras que en ambas concentraciones, la Apo-Lf bovina mostró un mayor efecto en la inhibición del crecimiento de la E. coli K88+ que la Apo-Lf porcina. La actividad bactericida se ensayó utilizando concentraciones de 2,0; 4,0; 6,0 y 8,0 mg/mL de Lfs bovina o porcina. La Lf bovina mostró efecto bactericida a una concentración de 8 mg/mL, mientras que la Lf porcina no presentó este efecto. Los resultados indican que la fuente bovina puede ser útil en la prevención de diarreas en lechones.
The antibacterial effect of bovine lactoferrin (Lf) towards Escherichia coli K88+ (E. coli K88+) was compared with that of porcine Lf. E. coli K88+ is one of the main etiological agents of piglet diarrhea in the northern hemisphere. Lactoferrins (Lfs) were purified by ion exchange chromatography and further analyzed by electrophoresis using 8% sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel (SDS-PAGE) and immuno detection with anti-lactoferrin antibodies. Bacteriostatic effect was assayed using 0.5 and 1.0 mg/mL of Holo-Lf (iron saturated) or Apo-Lf (iron free). In all test the holo-LFs showed negligible bacteriostatic activity while for Apo-Lfs the bovine protein had the highest activity. Bactericide activity was assayed using bovine or porcine Lf concentrations of 2.0, 4.0, 6.0 y 8.0 mg/mL. Bovine Lf had bactericide activity at 8.0 mg/mL while no growth inhibition was observed with porcine Lf. These results suggest that bovine Lf may serve in the prophylaxis of piglets diarrhea.
ABSTRACT
Se evaluó la diversidad serológica y genética de cepas de Salmonella spp. aislada de campos de cultivo de melón Cantaloupe (Cucumis melo) y cilantro (Coriandrum sativum). Para identificar al patógeno se realizaron pruebas bioquímicas, serología, susceptibilidad a antibióticos y caracterización por PFGE. Se encontraron 11 muestras contaminadas de los campos de cilantro y 7 de los de melón. Se aisló Salmonella anatum y S. give, principalmente. Solo una de las cepas presentó resistencia a tobramicina. El PFGE mostró que cepas del mismo serogrupo, produjeron patrones electroforéticos similares y el análisis polifásico desplegó cinco grupos distintos con similitud menor al 35%. Es necesario intensificar las buenas prácticas agrícolas y de producción, ya que los serogrupos identificados han sido involucrados en brotes epidémicos. Por otro lado, el análisis polifásico mostró variabilidad genómica y además permite suponer que las cepas de S. give son clonales, no así para S. anatum, que estuvo presente en diferentes muestras.
The serological and genetic diversity of Salmonella spp. strains isolated from Cantaloupe melon (Cucumis melo) and coriander (Coriandrum sativum) fields were evaluated. Biochemical test, serology, antibiotic resistance and PFGE were performed to identify isolated strains. Eleven contaminated samples from coriander fields were found, and seven from melon fields. The serogroups identified were mainly Salmonella anatum and S. give. Only one strain was resistant to tobramicyn. PFGE showed five electrophoretic profiles, in agreement with the identified serotypes and in the polyphasic analysis five clusters were observed (<35% similarity). It is necessary to implement good agricultural and production practices, since identified serogroups have been involved in epidemic outbreaks. Moreover, the polyphasic analysis showed genomic variability and also suggests that strains of S. give are clonal. It is not the same for S. anatum strains, which were isolated from different samples.
Avaliou-se a diversidade sorológica e genética de cepas de Salmonella spp. isolada de campos de cultivo de melão Cantalupo (Cucumis melo) e coentro (Coriandrum sativum). Para identificar ao patógeno foram realizadas provas bioquímicas, sorologia, suscetibilidade a antibióticos e caracterização por PFGE. Encontraram-se 11 amostras contaminadas dos campos de coentro e 7 dos de melão. Isolou-se Salmonella anatum e S. give, principalmente. Somente uma das cepas apresentou resistência à tobramicina. O PFGE mostrou que cepas do mesmo sorogrupo, produziram padrões eletroforéticos similares e a análise polifásica desprendeu cinco grupos distintos com similitude menor a 35%. É necessário intensificar as boas práticas agrícolas e de produção, já que os sorogrupos identificados têm sido envolvidos em surtos epidêmicos. Por outro lado, a análise polifásica mostrou variabilidade genômica e além disso permite supor que as cepas de S. give são clonais, não sendo assim para S. anatum, que esteve presente em diferentes amostras.
ABSTRACT
A considerable amount of attention has been focused on the use of lactobacilli as probiotics. The use of microorganisms as probiotics must meet certain criteria, among these; the resistance to low pH and bile salts is of great importance. Different procedures have been designed to evaluate tolerance to gastrointestinal transit. Since resistance to low pH and bile salts is critical in the evaluation of probiotic strains, the aim of this study was to compare resistance to bile salts for 20 strains of porcine Lactobacillus reuteri that had been isolated from healthy pigs, using two different procedures based on exposure to low pH. Statistical analysis revealed no difference in resistance of the strains to bile salts whether pH was low or not. The use of low pH prior to exposure to bile salts therefore more closely represents physiological conditions that should be used for the evaluation of potential porcine probiotic lactobacilli. Further studies using digestive enzymes are required to evaluate resistance to gastrointestinal transit, since it is an important factor in the evaluation of strains with potential probiotic activity.
Existe un interés creciente en el uso de lactobacilos como probióticos. El uso de microorganismos como probióticos, requiere que éstos cubran ciertos requisitos, dentro de los cuales la resistencia a pH ácido y a sales biliares, se consideran de suma importancia. Actualmente existen distintos procedimientos que permiten evaluar la tolerancia al tránsito gastrointestinal. Debido a que la resistencia a pH ácido y a sales biliares es una condición crítica dentro de la evaluación de cepas probióticas, la finalidad del presente trabajo consistió en comparar la resistencia a sales biliares de 20 cepas de Lactobacillus reuteri aisladas de cerdos sanos, mediante dos procedimientos diferentes basados en la exposición a pH ácido. El análisis estadístico no mostró diferencias en la resistencia de las cepas a sales biliares cuando se realizó una exposición previa a pH ácido. Así, la exposición a pH ácido previo a la incubación con sales biliares, asemeja más a las condiciones fisiológicas que el microorganismo encontrará de manera natural y es una buena alternativa en la evaluación probiótica de lactobacilos de origen porcino. Se requieren estudios que incluyan enzimas digestivas, con el fin de evaluar la resistencia al tránsito gastrointestinal, dado que es uno de los factores más importantes en la evaluación de cepas con potencial actividad probiótica.