ABSTRACT
Abstract This study evaluated the effect of photodynamic therapy (PDT) on infected root canals. Twenty-one human teeth were selected, and 18 were infected by E. faecalis for 60 days. The antimicrobial strategies tested were: G1. Root canal preparation (RCP) using Niquel-Titanium (NiTi) rotary instruments, 2.5% NaOCl, and final irrigation with 17% EDTA, followed by PDT with methylene blue photosensitizer and laser diode low power; G2. RCP using stainless steel files and the same irrigation and PDT protocols as G1; G3. Same RCP protocol as G1 without PDT; G4. Only irrigation with 2.5% NaOCl; G5. Same PDT protocol as G1 without RCP; G6. Negative control; G7. Positive control. Samples for microbiological tests were collected initially (S1), after RCP (S2), and after PDT (S3). Subsequently, the roots were sectioned and prepared for Scanning Electron Microscopy (SEM) analysis. Bacterial growth was analyzed according to the turbidity of the culture medium, followed by spectrophotometric optical density (nm). The effect of PDT on the dentinal structure was evaluated at magnifications 1,600X and 5,000X and described qualitatively. The Wilcoxon test was used for the comparisons from the same specimens, and the Mann-Whitney test was used to compare groups ((=5%). Bacteria were found in all experimental groups' microbiological samples (S1, S2 and S3). The optical density of culture media was lower in S2 than in S1 of G1, 2, 3, and 4 (p> 0.05). After PDT (S3) in G1 and 2, there was an additional reduction in optical density of the culture medium, respectively (p>0.05). In Group 5, the analysis of culture media at S2 revealed an increase in optical density compared to S1(p>0.05). In SEM images of G1, 2, and 5, dentin with melting and recrystallization areas were evidenced. After preparation of the root canal with the rotary system or manually associated with 2.5% NaOCl, PDT was not able to completely eliminate E. faecalis present in the root canal.
Resumo Este estudo avaliou o efeito da terapia fotodinâmica (PDT) em canais radiculares infectados com E. faecalis. Vinte e um dentes humanos extraídos foram selecionados, e 18 foram infectados por E. faecalis por 60 dias. As estratégias antimicrobianas testadas foram: G1. Preparo do canal radicular (PCR) com instrumentos rotatórios de NiTi, NaOCl 2,5% e irrigação final com EDTA 17%, seguido de PDT com fotossensibilizador azul de metileno e laser diodo de baixa potência; G2. PCR usando limas de aço inoxidável e os mesmos protocolos de irrigação e PDT do G1; G3. Protocolo de PCR similar que G1 sem PDT; G4. Somente irrigação com NaOCl 2,5%; G5. Protocolo similar ao G1, sem PCR; G6. Controle negativo; G7. Controle positivo. Amostras para exames microbiológicos foram coletadas inicialmente (S1), após PCR (S2) e após PDT (S3). Na sequência, as raízes foram seccionadas e preparadas para análise em microscopia eletrônica de varredura (MEV). O crescimento bacteriano foi analisado de acordo com a turbidez do meio de cultura seguida pela densidade óptica espectrofotométrica (nm). O efeito da PDT na estrutura dentinária foi avaliado em aumentos de 1.600X e 5.000X, e descrito qualitativamente. O teste de Wilcoxon foi utilizado para as comparações dos mesmos espécimes e o teste de Mann-Whitney para as comparações entre os grupos ((=5%). Bactérias foram encontradas em todos os grupos experimentais, e em todas as coletas microbiológicas (S1, S2 e S3). A densidade óptica dos meios de cultura foi menor em S2 do que em S1 de G1, 2, 3 e 4 (p>0,05). Após a PDT (S3) em G1 e 2, houve redução adicional na densidade óptica do meio de cultura de 90,0% e 92,0%, respectivamente (p>0,05). No Grupo 5, a análise dos meios de cultura em S2 revelou um aumento de 3,2% na densidade óptica em comparação com S1(p>0,05). Nas imagens de MEV do G1, 2 e 5 foram evidenciadas dentina com áreas de fusão e recristalização. O PDT utilizado após preparo do canal radicular com sistema rotatório ou manual, associado ao NaOCl 2,5%, não foi capaz de eliminar completamente o E. faecalis em biofilme maduro presente no canal radicular.
ABSTRACT
Avaliar o efeito antibacteriano de antissépticos bucais sobre bactérias facultativas por meio de testes de difusão em ágar e teste por exposição direta. Metodologia: Cepas de S. mutans (ATCC 25175), E. faecalis (ATCC 29212) e P. aeruginosa (ATCC 27853) foram inoculadas em 7 mL de brain heart infusion (BHI) e incubadas a 37°C por 24 horas. Para o teste de difusão em ágar, 15 placas de Petri com 20 mL de brain heart infusion agar (BHIA) foram inoculadas com 0,1 mL das suspensões microbianas, com auxílio de swabs esterilizados, de modo a se obter um crescimento confluente e uma placa de Petri não foi inoculada. Trinta e seis discos de papel com 9 mm de diâmetro foram imersos nas soluções experimentais de cloreto de cetilpiridínio 0,07%, cloreto de cetilpiridínio 0,075%, gluconato de clorexidina 0,12% e cloreto de benzalcônio 0,13% durante 1 minuto. A seguir, três discos de papel contendo uma das soluções irrigantes foram colocados sobre a superfície do BHIA. As placas foram mantidas por 1 hora em temperatura ambiente e incubadas a 37°C por 48 horas. Os diâmetros dos halos de inibição microbiana foram medidos valendo-se de duas medidas de forma perpendicular entre si, sendo obtida a média de seus comprimentos. Para o teste de exposição direta, 216 cones de papel absorventes esterilizados nº 50 foram imersos na suspensão de micro-organismos por 5 minutos, e a seguir foram colocados em placas de Petri e cobertos com 10 mL de uma das soluções testes. Em intervalos de 1, 5, 10 e 30 minutos, 3 cones de papel absorventes foram retirados do contato com as substâncias, transportados individualmente e imersos em 7 mL de Letheen Broth, e incubados a 37°C por 48 horas. O crescimento microbiano foi avaliado pela turbidade do meio de cultura. Um inóculo de 0,1 mL obtido do Letheen Broth foi transferido para 7 mL de BHI, e incubado nas mesmas condições descritas. O crescimento microbiano foi novamente avaliado pela turbidade do meio de cultura...
Purpose: To evaluate the antibacterial effect of four oral antiseptics (two solutions of cetylpyridinium chloride, chlorhexidine gluconate and benzalkonium chloride) on facultative bacteria using two methods. Methods: Strains were inoculated in 7 mL of brain heart infusion (BHI) and incubated at 37°C for 24 hours. For the agar diffusion test, 15 Petri plates with 20 mL of brain heart infusion agar (BHIA) were inoculated with 0.1 mL of microbial suspensions using sterile swabs to produce confluent growth; one Petri plate was not inoculated. Thirty-six 9-mm paper discs were immersed in the experimental solutions (0.07% cetylpyridinium chloride, 0.075% cetylpyridinium chloride, 0.12% chlorhexidine gluconate, and 0.13% benzalkonium chloride) for 1 minute. Subsequently, three paper discs containing irrigant solutions were placed on the BHIA in each plate. The plates were kept at room temperature for 1 hour and incubated at 37°C for 48 hours. Two measurements of the inhibition zones were made on the paper discs containing the solutions, and mean values were calculated. For the direct exposure test, 216 #50 sterilized paper points were immersed in the microorganism suspensions for 5 minutes, placed onto Petri plates and covered with 10 mL of irrigant solution. At one, five, 10 and 30 minutes, three paper points were removed from the contact substances, transported individually, immersed in 7 mL Letheen broth and incubated at 37°C for 48 hours. Bacterial growth was evaluated by turbidity. An inoculum of 0.1 mL Letheen broth was transferred to 7 mL BHI, and incubated as described above. Bacterial growth was evaluated according to turbidity. Results: Inhibition zones were greater than 10 mm for all substances and all microorganisms under study. The antibacterial...
Subject(s)
Humans , Mouthwashes/adverse effects , Chlorhexidine , Benzalkonium CompoundsABSTRACT
The aim of this preliminary study was to verify the antibacterial potential of cetylpyridinium chloride (CPC) in root canals infected by Enterococcus faecalis. Forty human maxillary anterior teeth were prepared and inoculated with E. faecalis for 60 days. The teeth were randomly assigned to the following groups: 1: Root canal preparation (RCP) + 0.1% CPC with positive-pressure irrigation (PPI, Conventional, NaviTip®); 2: RCP + 0.2% CPC PPI; 3: RCP + 2.5% NaOCl PPI; 4: RCP + 2.5% NaOCl with negative-pressure irrigation system (NPI, EndoVac®); 5: Positive control; and 6: Negative control. Four teeth of each experimental group were evaluated by culture and 4 by scanning electron microscopy (SEM). In all teeth, the root canals were dried and filled with 17% EDTA (pH 7.2) for 3 min for smear layer removal. Samples from the infected root canals were collected and immersed in 7 mL of Letheen Broth (LB), followed by incubation at 37°C for 48 h. Bacterial growth was analyzed by turbidity of culture medium and then observed with a UV spectrophotometer. The irrigating solutions were further evaluated for antimicrobial effect by an agar diffusion test.The statistical data were treated by means, standard deviation, Kruskal-Wallis test and analysis of variance. Significance level was set at 5%. The results showed the presence of E. faecalis after root canal sanitization. The number of bacteria decreased after the use of CPC. In the agar diffusion test, CPC induced large microbial inhibition zones, similar to 2% chlorhexidine and large than 2.5% NaOCl. In conclusion, cetylpyridinium chloride showed antibacterial potential in endodontic infection with E. faecalis.
O objetivo deste estudo preliminar foi verificar o potencial antibacteriano de cloreto de cetilpiridínio (CCP) em canais radiculares infectados por E. faecalis. Quarenta dentes anteriores de humanos foram preparados e inoculados com E. faecalis por 60 dias. Os dentes foram aleatoriamente distribuídos como se segue: 1. Preparo do canal radicular (PCR) + CCP 0,1% com sistema de pressão positiva de irrigação (PPI, convencional, Navitip®); 2. PCR + CPC 0,2% PPI; 3. PCR + NaOCl 2,5% PPI, 4. PCR + NaOCl 2,5% com sistema de pressão negativa de irrigação (PNI, EndoVac®); 5 e 6. Controles positivos e negativos. Quatro dentes de cada grupo experimental foram avaliados por cultura e quatro por microscopia eletrônica de varredura (MEV). Em todos os dentes, os canais foram secos e preenchidos com EDTA 17% (pH 7,2) durante 3 min. As amostras dos canais radiculares infectados foram coletadas e imersas em 7 mL Letheen Broth (LB), seguido de incubação a 37° C durante 48 h. O crescimento bacteriano foi analisado pela turvação do meio de cultura, e mensurados por meio de um espectrofotometro (UV). As soluções irrigantes foram ainda avaliadas em teste de difusão em ágar. A análise estatística utilizou de média, desvio padrão,teste de Kruskal-Wallis e análise de variância. O nível de significância foi de 5%. Os resultados mostraram a presença de E. faecalis posterior ao processo de desinfecção do canal radicular. O cloreto de cetilpiridínio mostrou reduzir o número de bactérias. No teste de difusão em ágar, o CPC determinou inibição microbiana, com resultados semelhantes à CHX a 2% e maiores do que o hipoclorito de sódio a 2,5%. O cloreto de cetilpiridínio demonstrou potencial antibacteriano em infecção endodôntica por E. faecalis.