Effect of cell culture system on the production of human viral antigens

Foi realizado estudo comparativo na produção de diferentes antígenos virais usando sistema de microcarregador e sistema tradicional. Células Vero, BHK e MA-104 foram cultivadas em microcarregadores (2mg/ml) utilizando-se biorreatores com capacidade de 3,7 litros e, em paralelo, no sistema convencional com garrafas Roux. Após quatro dias de cultura para as células BHK e sete dias para as células Vero e MA-104, as células foram infectadas com 0,1 MOI (multiplicidade de infecção) de vírus da raiva, vírus do sarampo, poliovírus e rotavírus. Foi determinado o rendimento das células e dos vírus em microcarregadores e sistema convencional. Foi observado no sistema de microcarregador um aumento médio obtido de vinte vezes mais células/ml em relação à cultura convencional em monocamadas, usando garrafas Roux. Por outro lado, as células que cresceram em garrafas Roux apresentaram 1,6 a 6,7 mais vírus/ml em culturas do que no sistema de microcarregador. Contudo o total das amostras em termos de vírus por grupo foi estatisticamente similar para ambos os sistemas (p > 0,05). O rendimento na produção de antígeno viral pode depender não somente da concentração das células, mas também de outros fatores da cultura, como características do suporte no crescimento. Assim, o estudo deste parâmetro pode proporcionar uma linha de base para um futuro melhoramento e estratégias para se estabelecer um aumento em escala na produção de vírus, já que, dependendo do tipo de vírus, a ótima condição encontrada para uma produção de vírus em pequena escala pode não ser adequada para a produção em grande escala, requerendo novas padronização e avaliação.

Análise comparativa de métodos para identificação do Streptococcus pyogenes em secreção de orofaringe de escolares em Recife - PE, Brasil / Comparative analysis of methods for identificacion of Streptococcus pyogenes in throat secretion of school children in Recife-PE, Brazil

Os Streptococcus pyogenes b-hemolíticos do Grupo A (SBGA) são de relevante importãncia clínico epidemiológica, estando relacionados a patologias importantes. Com o objetivo de analisar a prevalência desta infecção em orofaringe de escolares assintomáticos e comparar métodos de diagnóstico do S. pyogenes, foi conduzido um estudo clínico-microbiológico. Foram cadastrados 873 escolares em 2 escolas públicas, a análise microbiológica da secreção orofaringeana foi realizada através do cultivo em meio de Agar sangue de carneiro 5%. SBGA foram identificados através dos testes de bacitracina Pyr e aglutinação em látex. Dos 873 escolares, foram examinados 753, a faixa etária variou de 5 a 18 anos de idade, sendo 54,3% do sexo masculino e 45,7% do sexo feminino. Foram identificados 6 portadores assintomáticos do SBGA, os quais foram submetidos ao tratamento com penicilina. O diagnóstico microbiológico do S. pyogenes realizado demonstrou que o teste de bacitracina apresentou um índice de concordância Kappa fraco e o Pyr teste regular quando comparados com a técnica aglutinação em látex. Nossos resultados mostram que apenas a utilização de testes presuntivos bacitracina e Pyr teste não propiciam o diagnóstico do SBGA, necessitando da utilização de testes específicos para identificação do sorogrupo dos estreptocos.

Portadores assintomáticos de infecções por Streptococcus pyogenes em duas escolas públicas na cidade do Recife, Pernambuco / Asymptomatic carriers of Streptococcus pyogenes infections in two public schools in Recife, Pernambuco

Objetivos: investigar a prevalência Streptococus pyogenes em secreção de orofaringe de escolares procedentes de duas escolas públicas da cidade Recife. Métodos: estudo epidemiológico e clínico-microbiológico descritivo no qual foram examinados 753 escolares. A cultura bacteriana da secreção orofaringeana foi realizada em ágar-sangue de carneiro 5 por cento e as cepas SBGA identificadas através dos testes de bacitracina, Pyr e aglutinação em látex. Resultados: a faixa etária dos 753 escolares analisados variou de cinco a 19 anos, sendo 54,3 por cento do sexo masculino e 5,7 por cento do sexo feminino. Seis eram portadores assintomáticos de SBGA e foram submetidos ao tratamento com penicilina. Após o tratamento, realizou-se a dosagem da antiestreptolisina o (ASLO), cujos títulos séricos foram inferiores a 200UT. Conclusões: uma prevalência de SBGA de 0,8 por cento foi estimada em portadores assintomáticos, considerada baixa, quando comparado a outros resultados em estudos semelhantes. Sugere-se a realização de outros estudos para estimar a prevalência de SBGA em crianças com faringite e sua relação com a febre reumática aguda.

Produçäo de um antígeno de sarampo por multiplicidade de infecçäo, com rendimento e reprodutibilidade / The role of m.o.i. in standardization of measles antigen preparation

Sarampo é uma doença potencialmente grave e comum, cuja vacinaçäo previne ou atenua as manifestaçöes clínicas. Métodos sorológicos utilizados na detecçäo de anticorpos para o vírus do sarampo têm sido empregados, como o teste de inibiçäo da hemaglutinaçäo e ELISA. Para produçäo de antígeno do sarampo com maior rendimento, e melhor reprodutibilidade, realizamos estudos com diferentes multiplicidades de infecçäo (M.I). Nossos resultados levam-nos a sugerir que a produçäo de antígenos de sarampo é mais eficiente com a utilizaçäo de multiplicidade de infecçäo (M.I) de 0,01 com boa reprodutibilidade, tanto na preparaçäo de ensaios de HA como de ELISA, devendo servir de parâmetro na preparaçäo de antígenos em larga escala para uso em ensaios diagnósticos

Ocorrência simultânea de Staphylococcus aureus enterotoxigênicos nas mäos, boca e fezes em portadores assintomáticos / Simultaneous occurrence of enterotoxigenic Staphylococcus aureus on the hands, mouth and feces of asymptomatic carriers

A possibilidade de ocorrência simultânea de Staphylococcus aureus no nariz, boca, mäos e fezes foi verificada em 112 indivíduos assintomáticos, residentes na cidade de Säo Paulo, SP, Brasil. De 40(35,7%) deles a bactéria em questäo foi isolada de, pelo menos, um dos nichos estudados. Entre estes portadores, 27(67,5%) foram positivos em apenas um dos quatro nichos, 8(20,0%) em dois e 5(12,5%) em três. Das 113 cepas de S. aureus identificadas, 28 (24,8%) isoladas de 9 (22,5) dos portadores revelaram-se tox+. entre essas cepas, 7(25,0%) produziram enterotoxina do tip A, 6(21,4%) do tipo B, 11(39,3%) do tipo C e 4(14,3%) dos tipos A e C simultaneamente. A fagotipagem revelou a predominância de cepas sensíveis aos fagos do Grupo I/III/NC (16,8%). Os resultados obtidos näo demonstraram a ocorrência simultânea de cepas de Staphylococcus aureus em amostras colhidas de boca, mäos e fezes do grupo estudado