Primera incursión en la obtención de curieles libre de patógenos específicos en Cuba / First foray into the production of specific pathogen-free guinea pigs in Cuba

Resultados confiables y económicos solo son obtenidos cuando los animales de experimentación son aislados de factores ambientales y biológicos, implantándose en el biomodelo una microbiota normal, lejos de la presencia de microorganismos patógenos. El objetivo de la investigación fue obtener curieles libre de patógenos específicos por cesárea aséptica, mantenidos en aisladores y alimentados con dietas estériles. Se realizaron 26 histerectomías. Los animales fueron alimentados con una fórmula modificada (L-477) en forma de papilla hasta los 21 días y permanentemente después la C-484 sólida y granulada, esterilizadas a 121oC/20 minutos o a 1,5Mrad. Además fueron suplementados con vitamina C y B1. El forraje o heno fue consumido a partir de la primera generación. La microbiota gastrointestinal se administró por vía oral en 0,5 ml de una dilución de 10-6/g de contenido de la porción final del íleon, ciego y principio del colon de curieles, a las 24 y 48 horas del nacimiento. Se utilizó para el monitoreo microbiológico caldo Tioglicolato, caldo Triptona Soya y caldo Saboraud incubados aeróbicamente a temperatura de 55, 37 y 25oC respectivamente. Se obtuvieron 51 neonatos. La mortalidad más alta se registró entre los primeros 10 días de edad (58,8%). Se lograron 12 animales (3 machos y 9 hembras), 6 de las hembras se reprodujeron aproximadamente a los 9 meses de edad, lográndose 11 crías por parto normal. La metodología aplicada permitió obtener curieles libres de Salmonella sp, Pasteurella sp, Streptococcus del tipo A y C, Bordetella bronchiseptica, Toxoplasma gondii, Virus Sendai y parásitos internos y externos.

Confidence and economics results are only obtained when the animals are isolated of the environmental and biological factors, that could interfere the course of from investigation and when is being established in them, a normal microflora balanced far from the presence of pathogen microorganisms. They were accomplished 26 histerectomies. The animals were fed with a modified formula of L-477 in the form of porridge until 21 days of age and permanently after with the C-484 solid and granulated, sterilized at 121oC/20 minutes or 1,5Mrad. The forage or hay was consumed by the first generation since the 6 months of age. The gastrointestinal flora was administered by oral route with 0,5 ml of a dilution of 10-6/g of the contents of the ileum final portion, cecum and first part of the colon of conventionalized Dunkin Hartley guinea pigs, at 24 and 48 hours born. It was used for microbiological bacteria monitoring Thioglycolate broth, Tryptic Soy broth and Sabouraud broth incubated aerobically at temperatures of 55, 37 and 25oC respectively. There were obtained 51 newborns. The highest mortality was registered during the first 10 days of age (58,8%). There were archieved 12 animals: 9 female and 3 males. 6 of the female were reproduced approximately at 9 months of age and were archieved 11 normal delivery sucklings. There were obtained guinea pigs free of the followings specific pathogens: Salmonella sp., Pasteurella sp., Streptococcus of the group A y C. Bordetella bronchiseptica, Toxoplasma gondii, Sendai Virus, beside internal and external parasites.

Clasificación toxicológica aguda del fruto seco pulverizado de Morinda citrifolia L (NONI-C)® en ratas Cenp: SPRD / Acute toxicity classification of powdered dry fruit of Morinda citrifolia L. (NONI-C)® in Cenp:SPRD rats

INTRODUCCIÓN: Morinda citrifolia L. se ha usado en la medicina tradicional para reducir dolores crónicos, regular la presión arterial, aliviar dolores artríticos, eliminar tóxicos del organismo, estados de alergias y asma.OBJETIVOS: clasificar el polvo del fruto seco de M. citrifolia NONI-C® según el método de las clases de toxicidad aguda (CTA). MÉTODOS: se evaluó el NONI-C® mediante el ensayo de las clases de toxicidad, que permite clasificar la sustancia en un rango de toxicidad. Se utilizaron 6 hembras de la sublínea Cenp:SPRD, procedentes del Centro Nacional para la Producción de Animales de Laboratorio (CENPALAB). Se les administró una dosis única de 2 g de material vegetal seco/kg de peso corporal de NONI-C® por vía oral, previo ayuno. El período de observación fue de 14 d, en el cual se monitorearon las condiciones ambientales diariamente, la aparición de signos de toxicidad y muerte, así como el peso corporal en los días 0, 7 y 14 del ensayo. RESULTADOS: los animales alcanzaron 100 % de supervivencia. No se observaron signos de toxicidad, tras la administración de la sustancia ensayo en la dosis máxima de 2 g/kg. En la evaluación anatomopatológica no se observaron alteraciones macroscópicas en la superficie externa de los animales y en ninguna de sus cavidades, órganos y tejidos. CONCLUSIONES: de acuerdo con el método de toxicidad de clases, el producto NONI-C® resultó no clasificado, DL50 aguda es mayor que 2 g/kg.

INTRODUCTION: Morinda citrifolia L. has been used in the traditional medicine to reduce the chronic pains, to regulate the blood pressure, to relieve arthritic pains, to eliminate the toxic agents of organism, allergy states and asthma. OBJECTIVES: to classify the dry fruit powder of M. citrifolia NONI-C®according the different acute toxicity kinds. METHODS: we used 6 female rats of Cenp:SPRD subspecies from The National Center for the Production of Laboratory Animals (NCPLA). A 2 g single dose of dry vegetal material/kg of body weight of NONI-C® was administered per os before breakfast. Observation period was of 14 days to monitoring the daily environmental conditions, appearance of toxicity signs, and death, as well as the body weight at 0, 7 and 14 days from assay. RESULTS: animals had a 100 % survival. There were not toxicity signs after assayed substance administration it maximal 2 g/kg dose. In anatomical and pathological evaluation there were neither macroscopic alterations in external surface of animals nor in its cavities, organs and tissues. CONCLUSIONS: accordint to toxicity kinds method, NONI-C® was not classified, acute DL50 is higher than 2 g/kg.

Toxicidad crónica de polvo de taninos obtenidos de corteza de Pinus caribaea Morelet por vía oral en ratas / Chronic oral toxicity of tannin powders obtained from bark of Pinus caribaea Morelet in rats

INTRODUCCIÓN: se han demostrado los efectos antimutagénicos y no genotóxicos de los taninos de Pinus caribaea Morelet, así como su influencia en la mejoría de la calidad de vida de pacientes. OBJETIVOS: evaluar la toxicidad crónica del polvo de taninos obtenido de corteza de P. caribaea por vía oral. MÉTODOS: se realizó un estudio de toxicidad crónica (6 meses) por vía oral en ratas Cenp:SPRD. Se conformaron un grupo control y 3 tratados (1, 2,5 y 5 mg/kg/d/6 meses). Se realizaron observaciones clínicas diarias. El peso corporal y los consumos de agua y alimento se midieron semanalmente. Al inicio, en la semana 13 y al final del estudio se realizaron exámenes de laboratorio clínico. Al concluir los 6 meses se sacrificaron todos los animales y se efectuó necropsia completa de cada uno, así como el estudio microscópico de los órganos y tejidos de los animales de los grupos Dosis alta y control. RESULTADOS: durante el estudio murió 1 hembra del gurpo Dosis baja, el resto de los animales alcanzó el final del estudio con buen estado. Los signos clínicos descritos estuvieron distribuidos por todos los grupos y no guardaron relación con la sustancia de ensayo. La curva de peso corporal fue similar para todos los grupos. El consumo de agua se incrementó en los animales tratados con la dosis mayor, el consumo de alimento no se vio afectado. Los parámetros de laboratorio clínico presentaron diferencias, aunque se mantuvieron dentro de los rangos normales reportados para la especie. Los hallazgos de anatomía patológica no guardaron relación con la administración del polvo de taninos. CONCLUSIONES: la administración oral durante 6 meses del polvo de taninos de corteza de P. caribaea no produjo toxicidad.

INTRODUCTION: effects of antimutagenic and non-genotoxic agents of tannins from Pinus caribaea Morelet, as well as its influence in improvement of quality life of patients. OBJECTIVES: to assess chronic oral toxicity of tannin powder obtained from bark of P. caribaea. METHODS: we performed a study on chronic toxicity (6 months) per os in Cenp:SPRD rats. We made clinical observations daily. There was a control group and 3 treated (1, 2, 5 and 5 mg/kg/d/6 months). We performed clinical observations daily. Body weight and water and food consumptions were measured weekly. At the beginning, in 13 week and at the end of study, we carried out clinical laboratory examinations. At 6 months all animals were scarified and we made a complete necropsy of each, as well as a microscopical study of organs and tissues of animals in groups of higher dose and control. RESULTS: during study a female in lower dose group died, the remainder finished the study in a good sate. Clinical signs described were distributed by all groups and had not relation with assay substance. Body weight curve was similar for all groups. Water consumption increased in animals treated with the higher dose, but the food consumption was normal. Clinical laboratory parameters had differences, although they were within normal ranks reported for the species. Findings of pathologic anatomy have not relation to administration of tannin powders. CONCLUSIONS: There was not toxicity with per os administration during 6 months of tannin powders from bark of P. caribaea.

Evaluación del extracto fluido de Pluchea carolinensis (Jacq) G Don. por el método de clases de toxicidad en ratas / Evaluation of fluid extract from Pluchea carolinensis (jacq) G Don by the toxicity class method in rats

Introducción: la salvia de playa, Pluchea carolinensis (Jacq) G Don., ha sido utilizada en la medicina tradicional para eliminar fiebres, digestiones lentas, dolores de riñones, de cabeza, ronqueras. Objetivos: clasificar al extracto fluido de salvia comenzando por el nivel de dosis 2 000 mg/kg, según el método de clase de toxicidad aguda. MÉTODOS: se evaluó el extracto fluido de hojas secas de salvia de playa mediante el ensayo de las clases de toxicidad, que permite clasificar la sustancia en un rango de toxicidad. Se utilizaron 6 hembras de la sublínea Cenp:SPRD, procedentes del CENPALAB. Se les administró una dosis única de 2 000 mg/kg de peso corporal del extracto fluido de salvia de playa por vía oral, previo ayuno. El período de observación fue de 14 d, en el cual se monitorearon las condiciones ambientales diariamente, la aparición de signos de toxicidad y muerte, así como el peso corporal en los días 0, 7 y 14 del ensayo. Resultados: los animales alcanzaron 100 por ciento de supervivencia. No se observaron signos de toxicidad, tras la administración de la sustancia ensayo en la dosis máxima de 2 000 mg/kg. En la evaluación anatomopatológica no se observaron alteraciones macroscópicas en la superficie externa de los animales y en ninguna de sus cavidades, órganos y tejidos. Conclusiones: de acuerdo con el método de toxicidad de clases la sustancia no es clasificada, DL50 es mayor que 2 000 mg/kg.

Introduction: beach salvia, Pluchea carolinensis (Jacq)G Don has been used for long in traditional medicines to abate fevers, slow digestion, kidney pains, headache, and hoarseness. Objectives: to classify fluid extract from beach salvia according to the acute toxicity class method, by starting with a 2000 mg/kg dose. Methods: the fluid extract from beach salvia dry leaves was evaluated through the toxicity class test that allows classifying the substance into a range of toxicity. Six Cenp:SPRD subline female rats from CENPALAB (Center of lab animal production) were used. They were orally administered a single dose of 2000 mg of beach salvia fluid extract per kg of body weight on fasting. The observation period was 14 days to monitor daily environmental conditions, the occurrence of toxicity signs and death as well as the body weight at 0th,7th and 14th day. Results: the six rats survived. No sign of toxicity was observed after the administration of the extract at 2000 mg/kg dose. In the anatomopathological assessment, no macroscopic alterations were seen in the external surface or in the cavities, organs and tissues of the animals. Conclusions: according to this toxicity class method, the substance is not classified since LD50 is higher than 2 000 mg/kg.