Silenciamento de genes com RNA interferência: um novo instrumento para investigação da fisiologia e fisiopatologia do córtex adrenal / Gene silencing with RNA interference: a novel tool for the study of physiology and pathophysiology of adrenal cortex

A inativação de genes por knock-out ou por bloqueio da tradução de seus transcritos (silenciamento) constitui uma estratégia extremamente poderosa tanto para atribuir função aos genes como para mapear a inter-relação dos diferentes componentes das vias regulatórias intracelulares. Um dos meios para se obter o silenciamento pós-transcricional consiste na ativação de um mecanismo mediado por RNAs fita-dupla (dsRNA) conhecido como RNA interferência (RNAi). O RNAi se mostrou um instrumento extremamente versátil em pesquisa biomédica, podendo ser utilizado em experimentos de silenciamento pontual de genes ou ser adaptado para estudos em larga escala de genômica funcional, podendo, inclusive, ser utilizado como meio de terapia gênica. Neste trabalho, os autores discutem as vias intracelulares envolvidas no RNAi, bem como as principais estratégias e limitações técnicas para se obter o silenciamento em células de mamíferos. Fazem, também, uma revisão das principais aplicações do RNAi na terapêutica de doenças humanas e na investigação de fenômenos fisiológicos e fisiopatológicos do córtex adrenal.

Técnicas de análise da regulaçäo da transcriçäo gênica e suas aplicações na endocrinologia molecular / Techniques for gene transcription regulation analysis and their application in molecular endocrinology

Uma das principais ações dos estímulos hormonais é a modulaçäo da expressäo dos genes. Visto que a taxa de transcriçäo do gene é o maior determinante da sua expressäo, os mecanismos moleculares pelos quais a transcriçäo gênica é regulada têm ganhado interesse crescente e se tornado um dos tópicos principais da Endocrinologia Molecular. Neste artigo, os autores reviram criticamente os aspectos teóricos e as aplicações das técnicas mais utilizadas em estudos da transcriçäo gênica. As vantagens e os senões dos métodos usados para definiçäo e mapeamento das seqüências regulatórias 5', para teste das interações DNA-proteína, para identificaçäo dos nucleotídeos necessários à interaçäo com fatores de transcriçäo e para clonagem dos fatores regulatórios trans säo discutidos.