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1.
J. pediatr. (Rio J.) ; 91(1): 36-43, Jan-Feb/2015. tab, graf
Article in English | LILACS | ID: lil-741581

ABSTRACT

OBJECTIVE: To describe the antimicrobial activity of ß-defensin-2 produced in the mammary gland and secreted in human breast milk. METHODS: The peptide production was performed by DNA cloning. ß-defensin-2 levels were quantified in 61 colostrum samples and 39 mature milk samples from healthy donors, by an indirect enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). Using halo inhibition assay, this study assessed activity against seven clinical isolates from diarrheal feces of children between 0 and 2 years of age. The activity of ß-defensin-2 against three opportunistic pathogens that can cause nosocomial infections was determined by microdilution test. RESULTS: The peptide levels were higher in colostrum (n = 61) than in mature milk samples (n = 39), as follows: median and range, 8.52 (2.6-16.3) µg/ml versus 0.97 (0.22-3.78), p < 0.0001; Mann-Whitney test. The recombinant peptide obtained showed high antimicrobial activity against a broad range of pathogenic bacteria. Its antibacterial activity was demonstrated in a disk containing between 1-4 µg, which produced inhibition zones ranging from 18 to 30 mm against three isolates of Salmonella spp. and four of E. coli. ß-defensin-2 showed minimum inhibitory concentrations (MICs) of 0.25 µg/mL and 0.5 µg/mL for S. marcescen and P. aeruginosa, respectively, while a higher MIC (4 µg/mL) was obtained against an isolated of multidrug-resistant strain of A. baumannii. CONCLUSIONS: To the authors' knowledge, this study is the first to report ß-defensin-2 levels in Latin American women. The production and the activity of ß-defensin-2 in breast milk prove its importance as a defense molecule for intestinal health in pediatric patients. .


OBJETIVO: Descrever a atividade antimicrobiana da defensina-beta 2 na glândula mamária e secretada no leite materno humano. MÉTODOS: A produção de peptídeos foi realizada por clonagem de DNA. Os níveis de defensina-beta 2 foram quantificados em 61 amostras de colostro e 39 de leite maduro de doadoras saudáveis pelo teste ELISA indireto. Por um ensaio de halo de inibição, avaliamos a atividade contra sete isolados clínicos diarreicos de crianças entre 0 e 2 anos. A atividade da defensina 2 contra três patógenos oportunistas que podem causar infecções nosocomiais foi determinada pelo teste de microdiluição. RESULTADOS: Os níveis de peptídeos estavam significativamente maiores nas amostras de colostro (n = 61) que de leite maduro (n = 39), como segue: 8,52 (2,6-16,3 µg/mL) mediana e faixa em comparação a 0,97 (0,22-3,78), p < 0,0001; teste de Mann-Whitney. O peptídeo recombinante foi obtido da alta atividade antimicrobiana demonstrada contra uma ampla gama de bactérias patogênicas. Sua atividade antibacteriana foi demonstrada em um disco contendo entre 1-4 µg, que produziu zonas de inibição entre 18 e 30 mm contra três isolados de Salmonella spp. e quatro de E. coli. A defensina-beta 2 demonstrou concentrações inibitórias mínimas (CIMs) de 0,25 µg/mL e 0,5 µg/mL para S. marcescen and P. aeruginosa, ao passo que uma CIM maior (4 µg/mL) foi obtida contra um isolado de cepa multirresistente de A. baumannii. CONCLUSÕES: Até onde sabemos, este estudo é o primeiro a relatar níveis de defensina em mulheres da América Latina. A produção e a atividade da defensina 2 no leite materno comprovam sua importância como uma molécula de defesa para a saúde intestinal em pacientes pediátricos. .


Subject(s)
Adult , Female , Humans , Pregnancy , Young Adult , Colostrum/chemistry , Milk, Human/chemistry , beta-Defensins/pharmacology , Enzyme-Linked Immunosorbent Assay/methods , Escherichia coli/drug effects , Lactation/immunology , Microbial Sensitivity Tests , Reverse Transcriptase Polymerase Chain Reaction/methods , Salmonella/drug effects , beta-Defensins/analysis
2.
Salus ; 8(1): 32-38, abr. 2004. tab, graf
Article in Spanish | LILACS | ID: lil-502704

ABSTRACT

Diversos estudios epidemiológicos afirman que el consumo de alcohol durante el embarazo es la causa principal de defectos congénitos evitables, siendo una de las tres causas principales de retraso mental y la única que se puede prevenir completamente. Se conoce que cuando se consume alcohol ya sea en pequeñas cantidades, se forman en la célula hepática una serie de metabolitos que son específicos, siendo éstos el producto de la esterificación de diversos ácidos grasos libres con el etanol, formándose los que se conoce como los ésteres etil de ácidos grasos (FAEE). Adicionalmente se dosificaron la AST, ALT, GGT como parte del perfil hepático ya que estas enzimas son las que generalmente se alteran durante el consumo de alcohol. Por esto, el objetivo principal de este trabajo fue determinar los FAEE en sangre cordonal de mujeres consumidoras y no consumidoras de alcohol, para poder evidenciar si estos ésteres pueden ser utilizados como biomarcadores del consumo de alcohol, para así poder diagnosticar el síndrome fetal alcohólico. Se estudiaron 62 madres las cuales asistieron a la maternidad de sur, estableciendo dos grupos, un grupo de 45 mujeres que consumieron alcohol y un grupo de 17 mujeres que no consumieron alcohol durante el embarazo; Los resultados obtenidos revelan: perfil hepático elevado y FAEE en neonatos de madres consumidoras de alcohol, encontrándose en la totalidad de la muestra el c18:1, adicionalmente un 87 por ciento con c16:0 y un 78 por ciento con c18:0, observando una relación entre el perfil enzimático con c18:1 fuerte (r= 0,67 p<0,00001). En conclusión, los FAEE se pueden considerar como biomarcadores específicos del consumo de alcohol


Subject(s)
Humans , Infant, Newborn , Alcohol Drinking/adverse effects , Chromatography , Pregnancy , Epidemiologic Studies , Fetal Blood , Obstetrics , Venezuela
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