Analysis of biofilm formation by Candida albicans in different types of orthodontic fixed appliances and devices / Análise da formação de biofilme por Candida albicans em diferentes tipos de aparelhos e dispositivos ortodônticos fixos

Objective: in this study, biofilm formation by Candida albicans in fixed orthodontic appliances was evaluated. Material and Methods: a total of 300 conventional metal brackets (MC), ceramic (CB), self-ligation (SLB), nickel-titanium (NiTi), and nickel-chromium (NiCr) wires, and ligatures types were organized into thirty groups (n=10). To induce biofilm formation, brackets, wires, and ligatures were joined, sterilized, placed in 24-well plates, contaminated with standardized suspensions of C. albicans (107 cells/mL), and incubated at 37 °C for 48 h with shaking. The biofilms formed were detached using an ultrasonic homogenizer, and suspensions were serially diluted and plated on Sabouraud dextrose agar to determine colony-forming units per mL. Scanning electron microscopy was performed before and after the biofilm formation. Results: lower amount of biofilm formation was observed in the MC group than in the CB and SLB groups (p<0.0001). SLB and CB showed similar biofilm formation rates (p=0.855). In general, the cross-sectional wires .018"x.025" showed higher biofilm formation when associated with the three types of brackets. When brackets, wires, and ligatures were associated, the sets with NiCr wires and SSL ligatures with MC brackets (p=0.0008) and CB (p=0.0003) showed higher biofilm formation. Conclusion: thus, brackets of MC with NiTi and NiCr wires showed lower biofilm formation, regardless of the ligature and cross-sectional or gauge of the wire and, MC and CB brackets with NiCr wires and SSL ligatures were more likely to accumulate biofilms (AU)

Objetivo: neste estudo, a formação de biofilme por Candida albicans em aparelhos ortodônticos fixos foi avaliada. Material e Métodos: um total de 300 bráquetes metálicos convencionais (MC), cerâmicos (CB), autoligados (SLB), com fios de níquel-titânio (NiTi) e níquel-cromo (NiCr) e tipos de ligaduras foram organizados em trinta grupos (n=10). Bráquetes, fios e ligaduras foram unidos, esterilizados, colocados em placas de 24 poços, contaminados com suspensões padronizadas de C. albicans (107 células/mL) e incubados a 37°C por 48 h para a formação de biofilmes. Os biofilmes formados foram rompidos por meio de um homogeneizador ultrassônico e suspensões foram diluídas e semeadas em ágar Sabouraud-dextrose para determinar as unidades formadoras de colônias por mL. A microscopia eletrônica de varredura foi realizada antes e após a formação do biofilme. Resultados: foi observada menor formação de biofilme no grupo MC em comparação aos grupos CB e SLB (p<0,0001). A formação de biofilme foi semelhante nos grupos SLB e CB (p=0,855). Em geral, os fios de seção transversal .018"x.025" apresentaram maior formação de biofilme quando associados aos três tipos de bráquetes. Os conjuntos com fios de NiCr e ligaduras SSL com bráquetes MC (p=0,0008) e CB (p=0,0003) apresentaram maior formação de biofilme. Conclusão: bráquetes MC com fios de NiTi e NiCr apresentaram menor formação de biofilme, independente da ligadura e secção transversal ou bitola do fio e, braquetes MC e CB com fios de NiCr e ligaduras SSL foram mais propensos a acumular biofilmes.(AU)

Influence of nicotine dependence, current smoking status and gender on CYP1A1, CYP1B1 and CYP2A6 expression in oral squamous cell carcinoma / Influência da dependência nicotínica, parâmetros de consumo de tabaco e gênero na expressão de CYP1A1, CYP1B1 e CYP2A6 em carcinoma de células escamosas oral

Objective: Tobacco smoke is composed of cancer-causing chemicals referred to as carcinogens. These carcinogens are metabolized by the enzymes of the cytochrome P450 (CYP) family. Our objective was to evaluate the correlation of tobacco consumption parameters with CYP1A1, CYP1B1 and CYP2A6 expression using qRT-PCR in samples of oral squamous cell carcinoma (OSCC). Material and Methods: The sample was divided into 2 groups: Cancer (36 subjects) and non-Cancer (12 subjects). The smokers' participants (36) were evaluated regarding their Nicotine dependence (ND) was assessed by the Fagerström test for cigarette dependence (FTCD). Questions regarding tobacco consumption like the number of cigarettes/day (CPD), duration of use, and pack-years were also evaluated. The Mann-Whitney and Spearman correlation tests were used at a significance level of 5%. Results: 48 participants were included, 32 men (66.7%), 36 smokers (75%) and 27 smokers with OSCC (56.3%). Samples of OSCC expressed more CYP1A1, CYP1B1, and CYP2A6. Especially, the CYP1B1 gene was significantly expressed in OSCC samples, regardless gender or tobacco use. No women expressed CYP2A6, as well as, non-smokers did not express the CYP1A1 and CYP2A6 genes. CYP1A1 gene was higher among men (P = 0.021). Conclusion: Lack of exposure to tobacco may justify the absence of CYP1A1 and CYP2A6 expression in non-smokers. The CYP1B1 gene was significantly expressed in the cancer presence despite gender or tobacco use. The assessment of ND and quantification of tobacco consumption are important instruments in monitoring smokers with benign oral lesions and, especially, in the presence of cancer.(AU)

Objetivo: A fumaça do tabaco é composta de substâncias químicas cancerígenas conhecidas como carcinógenos. Esses carcinógenos são metabolizados pelas enzimas da família do citocromo P450 (CYP). Nosso objetivo foi avaliar a correlação dos parâmetros do consumo de tabaco com a expressão de CYP1A1, CYP1B1 e CYP2A6 por qRT-PCR em amostras de carcinoma de células escamosas bucal (CCEB). Material e Métodos: A amostra foi dividida em 2 grupos: Câncer (36 indivíduos) e sem Câncer (12 indivíduos). Os participantes fumantes (36) foram avaliados quanto à dependência nicotínica (DN) pelo teste de Fagerström para dependência de cigarro (TFDC). Questões relacionadas ao consumo de tabaco como número de cigarros / dia (CPD), tempo de uso e anos-maço também foram avaliadas. Os testes de correlação de Mann-Whitney e Spearman foram utilizados com nível de significância de 5%. Resultados: foram incluídos 48 participantes, 32 homens (66,7%), 36 fumantes (75%) e 27 fumantes com CCEB (56,3%). Amostras de CCEB expressaram mais CYP1A1, CYP1B1 e CYP2A6. Especialmente, o gene CYP1B1 foi significativamente expresso em amostras de CCEB, apesar do sexo ou uso de tabaco. Nenhuma mulher expressou CYP2A6, assim como, não fumantes não expressaram os genes CYP1A1 e CYP2A6. O gene CYP1A1 foi maior entre os homens (P = 0,021). Conclusão: A falta de exposição pode justificar a ausência da expressão dos genes CYP1A1 e CYP2A6 entre não fumantes. O gene CYP1B1 foi significativamente expresso na presença de câncer, independentemente do sexo ou do uso de tabaco. A avaliação da DN e a quantificação do consumo de tabaco são importantes instrumentos no acompanhamento de fumantes com lesões bucais benignas e, principalmente, na presença de câncer (AU)

Study of Microbial Interaction Formed by "Candida krusei" and "Candida glabrata": "In Vitro" and "In Vivo" Studies

Abstract Recently, the non-albicans Candida species have become recognized as an important source of infection and oral colonization by association of different species in a large number of immunosuppressed patients. The objective of this study was to evaluate the interactions between C. krusei and C. glabrata in biofilms formed in vitro and their ability to colonize the oral cavity of mouse model. Monospecies and mixed biofilms were developed of each strain, on 96-well microtiter plates for 48 h. These biofilms were analyzed by counting colony-forming units (CFU/mL) and by determining cell viability, using the XTT hydroxide colorimetric assay. For the in vivo study, twenty-four mice received topical applications of monospecie or mixed suspensions of each strain. After 48 h, yeasts were recovered from the mice and quantified by CFU/mL count. In the biofilm assays, the results for the CFU/mL count and the XTT assay showed that the two species studied were capable of forming high levels of in vitro monospecie biofilm. In mixed biofilm, the CFU of C. krusei increased (p=0.0001) and C. glabrata decreased (p=0.0001). The metabolic activity observed in XTT assay of mixed biofilm was significantly reduced compared with a single C. glabrata biofilm (p=0.0001). Agreeing with CFU in vitro count, C. glabrata CFU/mL values recovered from oral cavity of mice were statistically higher in the group with single infection (p=0.0001) than the group with mixed infection. We concluded that C. krusei inhibits C. glabrata and takes advantage to colonize the oral cavity and to form biofilms.

Resumo Recentemente, as espécies não albicans tem se tornado uma importante fonte de infecção e de colonização oral pela associação de espécies em um grande número de pacientes imunossuprimidos. O objetivo desse estudo foi avaliar a interação entre C. krusei e C. glabrata em biofilmes formados in vitro e sua capacidade em colonizar a cavidade oral em modelo de camundongo. Biofilmes monoespécies e mistos foram formados em placas de 96 poços por 48 h. Esses biofilmes foram analisados pela contagem de UFC/mL e pela determinação da viabilidade celular, usando ensaio de XTT. Para o estudo in vivo, vinte e quatro camundongos receberam aplicações tópicas de suspensões monoespécies e mistas de cada espécie. Após 48 h, as leveduras foram recuperadas dos camundongos e quantificadas por UFC/mL. Nos ensaios de biofilme, os resultados da contagem de UFC/mL e do ensaio de XTT mostraram que as duas espécies estudadas foram capazes de formar grande quantidade de biofilme monoespécie in vitro. Nos biofilmes mistos, a UFC/mL de C. krusei aumentou (p=0,0001) e de C. glabrata diminuiu (p=0,0001). A atividade metabólica observada no ensaio de XTT nos biofilmes mistos foi significantemente reduzida comparada com o biofilme formado apenas de C. glabrata (p=0,0001). Concordado com as contagens in vitro, os valores de UFC/mL de C. glabrata recuperados da cavidade oral dos camundongos foram estatisticamente maior no grupo com infecção simples (p=0,0001) do que do grupo com infecção mista. Nós concluímos que C. krusei inibe C. glabrata e possui vantagem em colonizar a cavidade oral e formar biofilmes.