Use of green fluorescent protein labeled non-tuberculous mycobacteria to evaluate the activity quaternary ammonium compound disinfectants and antibiotics

Abstract Although infections with NonTuberculous Mycobacteria have become less common in AIDS patients, they are important opportunistic infections after surgical procedures, likely because they are ubiquitous and not efficiently killed by many commonly used disinfectants. In Venezuela there have recently been many non-tuberculous mycobacteria soft tissue infections after minor surgical procedures, some apparently related to the use of a commercial disinfectant based on a Quaternary Ammonium Compound. We studied the activity of this and other quaternary ammonium compounds on different non-tuberculous mycobacteria by transforming the mycobacteria with a dnaA-gfp fusion and then monitoring fluorescence to gauge the capacity of different quaternary ammonium compounds to inhibit bacterial growth. The minimum inhibitory concentration varied for the different quaternary ammonium compounds, but M. chelonae and M. abscessus were consistently more resistant than M. smegmatis, and M. terrae more resistant than M. bovis BCG.

Susceptibilidad de M. tuberculosis a drogas antituberculosas, determinada por dos técnicas, en el estado Sucre, Venezuela / usceptibility of M. tuberculosis to antituberculosis drugs as determined by two methods, in Sucre state, Venezuela

El objetivo de este trabajo fue evaluar la resistencia a isoniacida (INH), rifampicina (RIF), estreptomicina (STR) y etambutol (EMB) de 59 cepas de Mycobacterium tuberculosis, aisladas en el período agosto 2005-diciembre 2006, en el estado Sucre, Venezuela, empleando el método de proporciones de Canetti y de nitrato reductasa. Se encontró 6,3% de resistencia primaria y 14,3% de adquirida. Una cepa fue considerada MDR, al presentar resistencia a RIF e INH. Se comparó la prueba de nitrato reductasa con el método de las proporciones, encontrándose 100% de concordancia entre los resultados de los dos métodos para INH, RIF y EMB, y 95,65% para STR. Además, la prueba nitrato reductasa produjo resultados en 10 a 14 días, comparado con 42 días para el método de proporciones, por lo que la primera se postula como una alternativa muy valiosa para acortar el tiempo de respuesta en la valoración de la susceptibilidad de M. tuberculosis. La secuencia del gen rpoB en la cepa resistente a RIF demostró la presencia de una mutación no descrita anteriormente en la región hipervariable de 81 pares de bases, donde se ha reportado el mayor número de mutaciones de cepas resistentes a RIF. Esta mutación produjo un cambio en el codón 456 de TCG > CAG. Al comparar nuestros resultados con los hallados en el último estudio de prevalencia de resistencia realizado en el estado, se demuestra una disminución en la circulación de cepas resistentes en la zona de estudio.

The objective of this study was to evaluate the resistance to isoniazid (INH), rifampicin (RIF), streptomycin (STR) and ethambutol (EMB), with the Canetti’s proportions method (PM) and the nitrate reductase assay (NRA) of 59 clinical strains of Mycobacterium tuberculosis, isolated in the period of august 2005 to december 2006, in Sucre state, Venezuela. Primary and acquired drug resistance was 6.3% and 14.3%, respectively. Only one strain was found to be multidrug resistant (MDR). The overall agreement between the NRA and PM was 100% for INH, RIF and EMB, and 96% for STR. The time to obtain results was 10 to 14 days for the NRA, compared to 42 days for the PM. The NRA was easy to perform and therefore represents a useful tool for rapid and accurate determination of drug-resistant M. tuberculosis. The sequence of the rpoB gene of the RIF resistant strain demonstrated a never described mutation (change in the codon 456; TCG > CAG) in the hypervariable region of 81 base pairs where most of the mutations of the RIF resistant strains have been reported. Comparison of our results with those of the last resistance prevalence study carried out in the years 1998-1999, shows a decrease in the studied area.

Estado de portador de Streptococcus pneumoniae y morbilidad por infecciones respiratorias agudas (IRA) en la población infantil Warao / Pneumococcal carriage and morbility caused by acute respiratory tract infections among Warao indigenous children

Anualmente 1.9 millones de niños menores de 5 años mueren por una infección Respiratoria Aguda (IRA) y según la OMS el Streptococcus pnumoniae es responsable de mas de 1 millón en países en desarrollo. Determinar la frecuencia de portadores de S. Pneumoniae, los serotipos de las cepas aisladas, la presencia de dichos serotipos en la vacuna conjugada 7- valente (Prevener, Wyeth) y la morbilidad por IRA en la población infantil Warao menor de 5 años en tres comunidades del Estado Delta Amacuro: san Francisco de Guayo, Nabasanuka y Santa Catalina. Estudio de campo, epidemiológico, transversal y comparativo entre mayo de 2004- enero 2005 que incluyó estudio microbiológico de 110 muestras de hisopado nasofaríngeo y evaluación clínica de 259 niños. 42,7% de los niños estaba colonizado por S. Pneumoniae. Se aislaron 47 cepas, porcentaje de portadores: Nabasanuka 55% Guayo 37,7%, Santa Catalina 29,4%. Serotipos aislados incluidos en la vacuna conjugada 7-valente (19F, 6B y 23F) con 19,15%, 12,8%, 18,6%. Al comparar las proporciones de IRA versus estado de portador de S. Pneumoniae por comunidad no hubo una relación estadísticamente significativa. La población infantil Warao presenta una alta colonización por S.pneumoniae 42,7%. Los serotipos encontrados implican teóricamente una cobertura de 70,23% de la vacuna conjugada 7-valente. Los niños Warao podrían beneficiarse con un programa de vacunación. El mayor porcentaje de IRA y de portadores correspondió a la Comunidad de Nabasanuka.