The destruction complex of beta-catenin in colorectal carcinoma and colonic adenoma / O complexo destruidor de betacatenina no carcinoma colorretal e no adenoma cólico

ABSTRACT Objective To evaluate the destruction complex of beta-catenin by the expression of the proteins beta-catetenin, adenomatous polyposis coli, GSK3β, axin and ubiquitin in colorectal carcinoma and colonic adenoma. Methods Tissue samples from 64 patients with colorectal carcinoma and 53 patients with colonic adenoma were analyzed. Tissue microarray blocks and slides were prepared and subjected to immunohistochemistry with polyclonal antibodies in carcinoma, adjacent non-neoplastic mucosa, and adenoma tissues. The immunoreactivity was evaluated by the percentage of positive stained cells and by the intensity assessed through of the stained grade of proteins in the cytoplasm and nucleus of cells. In the statistical analysis, the Spearman correlation coefficient, Student’s t, χ2, Mann-Whitney, and McNemar tests, and univariate logistic regression analysis were used. Results In colorectal carcinoma, the expressions of beta-catenin and adenomatous polyposis coli proteins were significantly higher than in colonic adenomas (p<0.001 and p<0.0001, respectively). The immunoreactivity of GSK3β, axin 1 and ubiquitin proteins was significantly higher (p=0.03, p=0.039 and p=0.03, respectively) in colorectal carcinoma than in the colonic adenoma and adjacent non-neoplastic mucosa. The immunohistochemistry staining of these proteins did not show significant differences with the clinical and pathological characteristics of colorectal cancer and colonic adenoma. Conclusions These results suggest that, in adenomas, the lower expression of the beta-catenin, axin 1 and GSK3β proteins indicated that the destruction complex of beta-catenin was maintained, while in colorectal carcinoma, the increased expression of beta-catenin, GSK3β, axin 1, and ubiquitin proteins indicated that the destruction complex of beta-catenin was disrupted.

RESUMO Objetivo Avaliar o complexo de destruição da betacatenina no carcinoma colorretal e no adenoma do colo pela expressão das proteínas betacatenina, adenomatous polyposis coli, GSK3β, axina e ubiquitina. Métodos Amostras de tecidos de 64 doentes com carcinoma colorretal e de 53 pacientes com adenoma do colo foram analisadas. Blocos de tecidos foram submetidos ao estudo imuno-histoquímico com anticorpos policlonais nos tecidos do carcinoma, mucosa não neoplásica adjacente e adenoma. A imunorreatividade foi avaliada pela porcentagem de positividade de células coradas e pela intensidade do grau de coloração das proteínas no citoplasma e no núcleo das células. Na análise estatística, foram utilizados o coeficiente de correlação de Spearman, os testes t de Student, χ2, Mann-Whitney e de McNemar, e a análise de regressão logística univariada. Resultados No carcinoma colorretal, as expressões da betacatenina e da adenomatous polyposis coli foram significativamente maiores do que em adenomas do colo (p<0,001 e p<0,0001, respectivamente). A imunorreatividade das proteínas GSK3β, axina 1 e ubiquitina foi significativamente maior (p=0,03, p=0,039 e p=0,03, respectivamente) no carcinoma colorretal do que no adenoma e na mucosa não neoplásica adjacente. A coloração imuno-histoquímica dessas proteínas não apresentou diferenças significantes em relação às características clinicopatológicas do câncer colorretal e do adenoma. Conclusões Em adenomas, as menores expressões de betacatenina, axina 1 e GSK3β indicaram que o complexo de destruição da betacatenina estava conservado, enquanto que, no carcinoma colorretal, o aumento das expressões da betacatenina, GSK3β, 1 axina, e ubiquitina indicaram que o complexo de destruição de betacatenina estava alterado.

APC protein immunoexpression in colorectal adenoma and adenocarcinoma / Imunoexpressão da proteína APC nos tecidos de adenoma e de adenocarcinoma colorretais

BACKGROUND: activation of the Wnt pathway by mutated APC gene is considered the initial event in colorectal carcinogenesis. The identification of these mutations can improve the specific treatment of the adenocarcinoma. OBJECTIVE: detect and evaluate wild-type APC protein in tissue from colorectal adenoma, adenocarcinoma and adjacent mucosa. METHODS: 42 patients that underwent surgery for adenocarcinoma and 53 patients with resected adenomas were studied. Tissue samples from the adenocarcinoma were obtained from the tumor and from adjacent non-neoplastic mucosa located 10 cm from the proximal margin of the tumor. Adenoma tissue was obtained from representative areas. Blocks of tissue microarray (TMA) were submitted to immunohistochemistry with anti-APC, with readings of positivity and intensity of immunostaining and the score of immune expression of APC protein was obtained. RESULTS: the APC protein immune expression score showed a significantly lower expression of APC protein in the adenoma when compared with the adenocarcinoma (p < 0.0001) and adjacent mucosa (p < 0.0001). The APC protein immune expression score in the colorectal mucosa and adjacent to the adenocarcinoma showed no significant difference (p = 0.24). CONCLUSIONS: the finding of decreased expression of APC protein in adenoma tissue may indicate that the mutated APC gene may contribute to the changes in the adenoma-carcinoma process of carcinogenesis sequence. The strong expression of protein APC in tissues from the carcinoma and adjacent mucosa suggests that in most patients in this series, the mutation of the APC gene did not participate in the oncogenesis mechanism. (AU)

RACIONAL: a ativação da via Wnt pelo gene APC mutado é considerado evento inicial da carcinogênese colorretal. A identificação dessas mutações pode tornar o tratamento do adenocarcinoma mais específico. OBJETIVO: detectar e avaliar a proteína APC não mutada em tecidos de adenoma, adenocarcinoma e mucosa adjacente. MÉTODO: estudados 42 doentes operados de adenocarcinoma e 53 com adenomas ressecados. Tecidos de adenocarcinoma foram obtidas da neoplasia e da mucosa adjacente não neoplásica situadas a 10 cm da margem proximal do tumor. Tecidos do adenoma foram obtidas de área representativa. Blocos de tissue microarray (TMA) foram submetidos a imuno-histoquímica com anticorpo anti-APC. Avaliadas a positividade e intensidade da expressão e obtidos escores da imunoexpressão da proteína APC. RESULTADOS: o escore da imunoexpressão da proteína APC no adenoma foi significantemente menor do que no adenocarcinoma (p < 0,0001) e na mucosa adjacente (p < 0,0001). O escore da imunoexpressão da proteína APC na mucosa adjacente e no adenocarcinoma não mostraram diferença significante (p = 0,24). CONCLUSÕES: a menor expressão da proteína APC no adenoma pode indicar que o gene APC mutado participa das alterações do processo adenoma-carcinoma. A forte expressão da proteína APC no CCR e na mucosa adjacente sugerem que a mutação do gene APC não participou da oncogênese. (AU)