ABSTRACT
A bovine viral diarrhea virus (BVDV) amplification method combined with an enzyme immunoassay was developed to detect BVDV antigens in seropositive cattle. Reconstitution assays conducted by adding decreasing amounts of BVDV (Singer strain) to Madin-Darby bovine kidney (MDBK) cells showed that the sensitivity threshold of the combined assay was 10-7 TCID50. BVDV amplification was carried out in polycation (DEAE-Dextran and polybrene)- treated MDBK cells. Treated cells were able to replicate both ether-treated virus and neutralizing antibody-coated virus. Ammonium chloride decreased virus replication in polycation-treated cells, suggesting viral penetration by endocytosis. BVDV detection was tested in leukocytes from 104 seropositive cattle from 2 unvaccinated commercial closed dairy herds with high seroprevalence. Lysates and co-cultures of peripheral blood leukocytes (PBL) were tested, directly or after up to 6 blind passages in normal or polycation-treated cells. BVDV was detected in 10/104 cattle after only one co-culture of PBL in treated cells. No virus was detected in whole blood or plasma samples. BVDV positive and negative cattle were retested three times, achieving consistent results. The finding of immune carriers supports the possibility that these animals may constitute an epidemiological risk.
Se desarrolló un método de detección de antígenos del virus de la diarrea viral bovina (BVDV) combinando amplificación viral con enzimoinmunoensayo. El método combinado presentó una sensibilidad de 10-7 TCID50 en ensayos con diluciones decrecientes de BVDV cepa Singer sobre la línea celular MDBK. La amplificación del título viral se efectuó sobre células MDBK tratadas con policationes Estas células replicaron tanto el BVDV tratado con éter como el unido a anticuerpos. La replicación viral en las células tratadas disminuyó ante la presencia de cloruro de amonio, lo que sugiere la penetración viral por endocitosis. El BVDV se determinó en leucocitos de 104 bovinos seropositivos de dos rodeos en producción, cerrados y con alta seroprevalencia. Los leucocitos de sangre periférica (LSP) fueron lisados y analizados directamente o luego de hasta 6 pasajes ciegos sobre células normales o tratadas con policationes. El BVDV se detectó en 10 de los 104 animales después de solamente un cultivo de LSP en células tratadas. No se pudo detectar presencia viral en las muestras de sangre o plasma. Los estudios se repitieron tres veces en animales BVDV positivos y negativos, con resultados consistentes. El hallazgo de bovinos seropositivos portadores del virus indica la posibilidad de que estos animales puedan significar un riesgo epidemiológico.
Subject(s)
Animals , Cattle , Female , Bovine Virus Diarrhea-Mucosal Disease/virology , Diarrhea Viruses, Bovine Viral/isolation & purification , Enzyme-Linked Immunosorbent Assay , Virus Cultivation/methods , Blood/virology , Bovine Virus Diarrhea-Mucosal Disease/diagnosis , Cell Line/drug effects , Cell Line/virology , DEAE-Dextran/pharmacology , Hexadimethrine Bromide/pharmacology , Kidney , Plasma/virology , Reproducibility of Results , Reverse Transcriptase Polymerase Chain Reaction , Sensitivity and SpecificityABSTRACT
Se estudio la relacion que existe entre la subpoblacion de linfocitos T humanos que forman rosetas activas con eritrocitos de carnero (Ea) y la subpoblacion que expresa receptores para IgM (T micro). Ademas, se investigo el efecto de extractos timicos (TE) sobre diferentes poblaciones de linfocitos T humanos de sangre periferica. Se demostro que las celulas Ea poseen un percentaje mayor de linfocitos T micro que las que no forman rosetas activas. Una incubacion breve con TE produjo: 1) un aumento en la proporcion de celulas Ea, y 2) un aumento en el numero de celulas T micro. El porcentaje de linfocitos T que expresan receptores para Fc de IgG no fue alterada. El efecto de TE sobre la expresion de los receptores para Fc de la IgM solo se evidencio sobre la subpoblacion Ea
Subject(s)
T-Lymphocytes , Thymus Hormones , Receptors, ImmunologicABSTRACT
Se revisan resultados de investigaciones sobre Trypanosoma cruzi y respuesta inmune en la enfermedad de Chagas, realizadas entre junio de 1979 y diciembre de 1983, con el apoyo de la Secretaria de Estado de Ciencia y Tecnología de Argentina. Se ha investigado en: Ciclo biológico del T. cruzi; respuesta inmune humoral en la enfermedad de Chagas; respuesta inmune mediada por células; fagocitosis y citoxicidad; antígenos de T. cruzi; antígenos circulantes y formación de inmunocomplejos; inmunopatología; desarrollo de modelos experimentales de inmunocomplejos; inmunopatología; desarrollo de modelos experimentales de enfermedad; e, inmunoprotección experimental