Detecção de Listeria monocytogenes pela técnica de PCR em leite contaminado artificialmente / Detection of Listeria monocytogenes by PCR in artificially contaminated milk samples

Avaliou-se a técnica de PCR como opção para reduzir o tempo de detecção de Listeria monocytogenes no leite. Para tanto, amostras de leite desnatado esterilizado e de leite cru integral - com baixa, média e alta contagem de microrganismos aeróbios mesófilos - foram inoculadas experimentalmente com diversas concentrações de L. monocytogenes. Os resultados da reação de PCR foram comparados com os da cultura da amostra empregando-se metodologia padronizada tradicional. Não se detectou L. monocytogenes pela reação de PCR quando esta foi realizada a partir do caldo de enriquecimento de Listeria (LEB) após 24 horas de incubação, nem no leite desnatado esterilizado, nem no leite cru integral. Após 48 horas de enriquecimento em LEB, a bactéria foi detectada por PCR nas amostras de leite desnatado esterilizado, com a sensibilidade de 1UFC/mL, mas não nas amostras de leite cru integral. Pela metodologia tradicional, a bactéria foi recuperada de todos os ensaios. Entretanto, nas amostras de leite cru com altas contagens de aeróbios mesófilos, a sensibilidade da metodologia tradicional foi reduzida (a partir de 7UFC/mL). Melhores resultados foram obtidos quando a reação de PCR foi feita utilizando-se DNA obtido diretamente da colônia suspeita em meio sólido (Oxford e Palcam). Foi possível substituir os testes fenotípicos de identificação de L. monocytogenes pela técnica de PCR reduzindo-se o tempo de identificação da bactéria de vários dias para algumas horas.

The polymerase chain reaction (PCR) was used to detect Listeria monocytogenes in inoculated milk samples after selective enrichment. Samples of sterile skim milk and raw whole milk (with low, intermediate, and high counts of aerobic mesophilic microorganisms) were inoculated with several concentrations of L. monocytogenes. The results of PCR assays were compared to the results of culturing the samples using a standardized traditional method for isolation of L. monocytogenes. The pathogen was detected by PCR in Listeria Enrichment Broth (LEB) after 48h-incubation (sensitivity of 1CFU/mL) but not after 24h-incubation from the samples prepared with sterile skim milk. L. monocytogenes was not detected by PCR in LEB after 24 and 48h-incubation from the samples prepared with raw whole milk. Using the traditional method, the pathogen was detected in all experiments. However, sensitivity decreased in raw whole milk with high counts of aerobic mesophilic microorganisms (up to 7CFU/mL). Best results were obtained when PCR was done to identify presumptive L. monocytogenes colonies directly from Palcam and Oxford media, after the enrichment step. This procedure allowed reducing to a few hours the period of several days usually needed to obtain the final identification of L. monocytogenes using phenotypic tests.

Variação da contagem de células somáticas em vacas leiteiras de acordo com patógenos da mastite / Somatic cell counts variation in dairy cows according to mastitis pathogens

Avaliou-se o efeito de patógenos da mastite sobre a contagem de células somáticas (CCS) em leite. Foram coletadas 3.987 amostras de leite de 2.657 animais oriundos de 24 rebanhos leiteiros localizados nos estados do Rio de Janeiro e Minas Gerais. As amostras de leite foram usadas para CCS e identificação de patógenos da mastite. Estatísticas descritivas, teste T para amostras independentes e modelo linear generalizado foram usados para análise dos dados. O modelo linear generalizado identificou os efeitos de rebanho, animal dentro de rebanho, ordem de parto, estação do ano e infecção intramamária causada por Streptococcus agalactiae e Streptococcus spp. que não S. agalactiae como significativos na variação da CCS. O efeito de animal dentro de rebanho foi maior que o efeito de rebanho. S. agalactiae foi o patógeno responsável pelo maior aumento da CCS em vacas e apresentou em média 1.520.000 células/mL. Foi observado efeito específico dos patógenos na variação da CCS.

The influence of mastitis pathogens on variation of milk somatic cell count (SCC) was evaluated. Three thousand nine hundred eighty-seven milk samples were colected from 2,657 dairy cows in 24 herds located in the states of Minas Gerais and Rio de Janeiro. The milk samples were used to SCC and identification of mastitis pathogens. Descriptive statistics, T test for independent samples, and generalized linear model were used to data analysis. The generalized linear model identified the effects of herd, animal within herd, parity, year season, intramammary infection, and infection caused by Streptococcus agalactiae and Streptococcus spp. except S. agalactiae as significant on SCC variation. The effect of animal within herd was higher than the effect of herd. S. agalactiae was the pathogen responsible for higher SCC increasing and presented the average of 1,520,000 cells/mL. The specific effect on SCC variation was observed in the study.

Detecção de Escherichia coli O157: H7 inoculada experimentalmente em amostras de leite cru por método convencional e PCR multiplex / Detection of E. coli O157: H7 experimentally inoculated in raw milk samples by conventional method and multiplex PCR

Padronizou-se um método de reação em cadeia da polimerase (PCR) multiplex para detecção de Escherichia coli O157:H7 e avaliou-se a eficiência da PCR e de um método de cultivo convencional em placas na detecção desse patógeno experimentalmente adicionado em leite estéril e em leite cru com baixa contagem bacteriana total (média de 4,01 x 10³ UFC/ml) e com alta contagem bacteriana (média de 2,10 x 10(6) UFC/ml). Foram padronizadas duas reações de PCR com o uso dos primers: "A" (RfbF; RfbR e FLICh7F/FLICh7R) e "B" (SLT-IF/SLTIR e SLT-IIF/SLT-IIR). A detecção de E. coli O157:H7 (1UFC/ml) a partir do leite estéril e do leite cru com baixa contaminação bacteriana foi possível quando se utilizou o método de contagem em placas e a PCR. A sensibilidade dos dois métodos foi menor quando se testou o leite cru com alta contaminação microbiana, sendo o método convencional mais sensível. Os resultados indicam que a presença de outros microrganismos, em alta quantidade no leite, dificulta a detecção de E. coli O157:H7 pelos métodos utilizados.

This experiment was carried out in order to evaluate the effect of the raw milk bacterial count on the efficiency of a multiplex polymerase chain reaction and a conventional plate count method for detection of Escherichia coli O157:H7. This pathogen was experimentally inoculated into sterile milk, raw milk with low bacterial count (count mean of 4.01 x 10³ cfu/ml) and, raw milk with high bacterial count (mean 2.10 x 10(6) cfu/ml). Two protocols of PCR were standardized using primers "A" (Rfbf and Rfbr and FLICh7F/FLICh7R) and "B" (SLT-IF/SLTIR and SLT-IIF/SLT-IIR). Both conventional plate count and PCR methods were able to detect the presence of E. coli O157:H7 in either sterile milk or raw milk with low bacterial count initially inoculated with 1cfu of E. coli O157:H7 per ml. The sensibility of both methods for high-contaminated raw milk samples was lower, being the conventional approach more sensitive. These results indicate that high bacterial count in raw milk can affect E. coli O157:H7 detection.

Fatores de risco para mastite subclínica em vacas leiteiras / Risk factors for subclinical mastitis in dairy cows

Os fatores de risco para mastite subclínica (CCS > 200.000 células/ml) foram estudados em 2.657 vacas, de 24 rebanhos de Minas Gerais. Cada rebanho foi visitado três vezes entre novembro de 2005 e junho de 2006. Amostras de leite (n=3.987) de vacas em lactação foram examinadas para contagem de células somáticas (CCS), e um questionário foi aplicado para obtenção de dados dos animais e do manejo do rebanho. Os valores para a média, mediana e desvio-padrão da CCS foram 608.000, 219.000 e 967.000 células/ml, respectivamente. Os fatores de risco para mastite subclínica foram: animais com a base do úbere junto ou abaixo do jarrete, rachaduras ou fissuras nas partes de borracha do equipamento de ordenha, inadequação das teteiras, deficiência de limpeza dos pulsadores, falta de treinamento dos ordenhadores, não-utilização de diagnóstico microbiológico para mastite, imersão do conjunto de teteiras em solução desinfetante entre a ordenha de animais distintos, e inserção total da cânula de antibiótico nos tetos na secagem da vaca. A alta variação da CCS (608.000± 967.000 células/ml) sugere que outros fatores, como o número de quartos mamários infectados e os patógenos envolvidos, podem ter influenciado os resultados. A metodologia utilizada não permitiu identificar todos os fatores que poderiam aumentar a CCS. Contudo, os resultados são úteis para aprimorar os programas de controle da mastite.

This study was carried out to identify risk factors for subclinical mastitis (SCC > 200,000 cells/ml). A total of 2,657 lactating cows from 24 herds in the State of Minas Gerais, Brazil, were included in the study. Each farm was visited three times in an 8-month period from November 2005 to June 2006. At each visit, all milking cows were examined for clinical mastitis by a single observer. A total of 3,987 milk samples were examined for somatic cell counts (SCC). The mean, median, and standard deviation values for SCC were, respectively, 608,000, 219,000, and 967,000 cells/ml. Risk factors for subclinical mastitis were: udder positioned at the same height or below the hock, presence of cracks or fissures in the rubber parts of the milking machine, inadequacy of teat cups, infrequent and unsuitable scheme for cleaning the pulsators, milkers unable to operate the milking equipments, no information about the mastitis pathogens present in the herd, immersion of teat cups in disinfectant solution between milkings, and total insertion of cannula in teats during antibiotic treatment. The high variation of the SCC values (608,000± 967,000 cells/ml) suggests that other factors such as number of infected mammary quarters and pathogens involved could have influenced the results. The used methodology did not allow to identify all risk factors that increase SCC. Therefore, the results can also be used to improve the currently mastitis control programs adopted by those herds.

Contagem de células somáticas e isolamento de agentes causadores de mastite em búfalas (Bubalus bubalis) / Somatic cell count and mastitis causing pathogens isolation in water buffaloes (Bubalus bubalis)

The research was accomplished in eight dairy water buffalo herds, randomically choosen in Região do Alto São Francisco, State of Minas Gerais, Brazil. Information was collected from March to November, 2003 during 270 days of observation. In order to determine the somatic cell count (SCC) in presence or absence of microbial isolation, 1,393 samples were collected from 285 lactating females and microbiological exams and SCC were done. Samples obtained from udders without evidence of clinical or subclinical inflammation showed infection for a great variety of microbial mastitis pathogens. The low SCC did not necessarily indicate the absence of intramammary infection, suggesting that SCC patterns used for bovine cannot be appropriate in order to control mastitis in buffalo herds.

Qualidade microbiológica do leite refrigerado nas fazendas / Microbiological quality of refrigerated milk on farms

Avaliaram-se a qualidade microbiológica do leite obtido mecanicamente e refrigerado durante 48 horas, em 24 rebanhos, e a associação entre a contaminação microbiana e os procedimentos de higienização dos equipamentos de ordenha e armazenamento do leite. Os procedimentos de higiene foram avaliados in loco com auxilio de questionários. Foram realizadas a contagem padrão em placas, a contagem de coliformes totais e a pesquisa de Staphylococcus aureus e Streptococcus agalactiae. No leite de 14 rebanhos, foram pesquisadas Salmonella spp. e Listeria monocytogenes. As médias geométricas da contagem padrão foram <1,0×10(6) UFC/ml em 20 rebanhos, e <7,5×10(5) UFC/ml em 19. Onze rebanhos apresentaram contagem média de <1,0×10(5) UFC/ml. Contagens médias de coliformes >10³ UFC/ml foram verificadas em sete rebanhos. S. aureus e S. agalactiae foram isolados em 22 e 12 dos 24 rebanhos, respectivamente, e não foram encontradas Salmonella spp. e L. monocytogenes. O uso de detergentes alcalino e ácido, mais o de sanitizante foi associado (P<0,05) à contagem padrão <1,0×10(5), e o emprego de apenas um ou de nenhum produto foi associado a contagens >5×10(5) UFC/ml.

The effect of bulk tank and milking machine cleaning procedures (determined from a questionnaire) on bacterial contamination of 48-hour refrigerated milk was examined in 24 herds. Milk samples were analyzed for standard plate count (SPC) and for total coliform, Staphylococcus aureus and Streptococcus agalactiae contamination. Milk samples from 14 herds were cultured for Salmonella and Listeria monocytogenes. Geometrical means of SPC were <1.0×10(6) UFC/ml in 20 herds, <7.5×10(5) UFC/ml in 19 herds and <1.0×10(5) UFC/ml in 11 herds. Geometrical means >10³ UFC/ml of total coliforms were observed in seven herds. S. aureus and S. agalactiae were found in 22 and 12 herds, respectively. Salmonella and L. monocytogenes were not found in any of the samples. The use of alkaline and acid detergents plus sanitizing was associated (P<0.05) with SPC <1.0×10(5), and the use of either alkoline or acid detergent or sanitizing or no chemical product was associated with SPC >5.0×10(5) UFC/ml.

Efeito da temperatura e do tempo de armazenamento sobre a contagem de células somáticas no leite / Effects of temperature and storage on somatic cell counts in milk

Avaliou-se o efeito da temperatura e do tempo de armazenamento sobre a contagem de células somáticas(CCS). Amostras de leite de 21 vacas, coletadas e armazenadas às temperaturas de 5, 27, 32 e 36°e e analisadas no 1°, 3°, 5°e 7° dia após coleta, foram classificadas em três grupos (células/ml): baixa (236.000 + ou - H64.000), média (624.000+ ou - 356.000) e alta CCS (1.320.000+ ou - 945.000). O delineamento experimental foi o de parcelas subdivididas. As médias da CCS foram iguais (P>0,05) para amostras mantidas à temperatura de 5°C e analisadas entre o primeiro e o sétimo dias após a coleta e para aquelas mantidas às temperaturas 5, 27, 32 e 36°e e analisadas no primeiro dia. Médias diferentes (P<0,05) da CCS foram observadas para amostras mantidas a 27, 32 e 36°e a partir do 5°, 5° e 3° dias, respectivamente. Foram observados decréscimos de 57,6%, 58,5% e 27,9% nos valores iniciais da CCS nas amostras classificadas como baixa, média e alta, respectivamente. Os resultados mostram a necessidade de se encaminhar as amostras de leite para CCS sob refrigeração e de ser feita análise até sete dias após a coleta.

Fatores de risco associados à alta contagem de células somáticas do leite do tanque em rebanhos leiteiros da Zona da Mata de Minas Gerais / Risk factors associated with high bulk milk somatic cell count in dairy herds from Zona da Mata of Minas Gerais, Brazil

Características do rebanho e práticas de manejo associadas à contagem de células somáticas do leite do tanque (CCSLT) foram estudadas em 175 rebanhos envolvidos em programas de acompanhamento entre junho de 2000 e dezembro de 2001. Os dados foram obtidos por meio de aplicação de questionários. Os rebanhos foram classificados em dois grupos de acordo com a média geométrica de seis CCSL T mensais, consecutivas, tendo como referência o valor de 500.000 células/ml. Os métodos estatísticos utilizados foram a análise exploratória dos dados e os modelos logísticos de regressão. Procedimentos relacionados ao controle e à prevenção de mastite foram adotados por pequeno número de rebanhos. O tipo de ordenha (manual, mecânica canalizada e balde-ao-pé), a idade média dos rebanhos, o local de ordenha e a realização de exames dos primeiros jatos de leite não foram associados à alta CCSLT. Os fatores associados à alta CCSLT foram a não adoção de linha de ordenha, a alimentação durante a ordenha e a ausência de anti-sepsia dos tetos após a ordenha.

Avaliaçäo de associaçöes e similaridades em epidemiologia veterinária por meio da análise de correspondência / Evaluation of associations and similarities in veterinary epidemiology by correspondence analysis

Chi-square test and correspondence analysis were used to evaluate the relationship between class of milk somatic cells count (0-300,000; 301,000-600,000; and >600,000 cells/ml) and type of milking in data from 87 herds that comprised manual and machine milking. Chi-square test showed no relationship between process of milking and class of milk somatic cells count but the correspondence analysis showed higher relationship between manual milking and class of somatic cells count >600,000 cells/ml in comparison to the other classes of somatic cells count (0-300,000 and 301,000-600,000 cells/ml). The graphic representation of the correspondence analysis (dimension 1) showed similarity of somatic cells count for manual and pipeline milking systems

Concentraçäo mínima inibitória de dez antimicrobianos para amostras de Staphylococcus aureus isoladas de infecçäo intramamária bovina / Minimum inhibitory concentrations for ten antimicrobial agents against Staphylococcus aureus from bovine intramammary infection

Determinou-se a concentraçäo mínima inibitória (CMI) de ampicilina, cefalotina, eritromicina, gentamicina, neomicina, norfloxacina, oxacilina, penicilina G, tetraciclina e tilosina para 112 amostras de Staphylococcus aureus isoladas de infecçöes intramamárias bovina, em 33 rebanhos leiteiros da Zona da Mata do Estado de Minas Gerais. Foram isoladas 24 amostras de infecçäo clínica, 66 de subclínica e 22 de infecçäo crônica. As amostras de infecçäo crônica foram isoladas repetidas vezes dos mesmos quartos mamários de nove vacas de um rebanho, no período de 13 meses. A CMI foi realizada em ágar Mueller Hinton, com concentraçöes entre 0,015 e 128µgml elevado a -1 de cada antimicrobiano. As amostras da American Type Culture Collection (ATCC) recomendadas para controle de qualidade S. aureus ATCC 29213, Escherichia coli ATCC 25922 e Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853, foram incluídas em cada teste. Cem por cento das amostras foram susceptíveis à cefalotina, eritromicina, gentamicina, norfloxacina e oxacilina, 91 por cento à tetraciclina (CMI50 (subscrito): 0,5µgml elevado a -1) e à tilosina (CMI50 (subscrito): 2,0µgml elevado a -1), 65 por cento à ampicilina (CMI50 (subscrito): 0,125µgml elevado a -1) e à penicilina G (CMI50 (subscrito): 0,06µgml elevado a -1). Todas foram susceptíveis neomicina (CMI50 (subscrito): 0,5µgml elevado a -1) exceto uma amostra que apresentou um padräo intermediário. O nível de resistência para ampicilina e penicilina foi maior nas amostras isoladas de casos clínicos e nas de infecçäo subclínica com escores positivos no CMT (P<0,02). Nas isoladas de infecçäo clínica, o nível de resistência à tilosina foi maior (P<0,02). As amostras que apresentaram CMI>=0,125µgm1 elevado a -1 para penicilina foram positivas para produçäo de ß-lactamase

Caracterizaçäo de biótipos de Staphylococcus aureus isolados de mastite bovina / Biotyping of Staphylococcus aureus strains isolated from bovine mastitis

Duzentos e dezoito amostras de Staphylococcus aureus, isoladas de infecçäo intramamária de vacas de 44 rebanhos leiteiros, foram classificadas em biótipos de acordo com os testes de produçäo de estafiloquinase (K), beta-hemolisina (beta ), coagulaçao do plasma bovino (Pl) e crescimento na presença de cristal violeta (CV). As amostras foram distribuídas em 10 biótipos e 63 delas foram classificadas nas ecovariedades bovina (35), ovina (17), aviária (10) e humana (1) e 155 näo apresentaram características específicas de hospedeiro. Estas últimas podem ser isoladas de homem, cabra, coelho, suíno, alimentos e de mastite bovina. O biótipo 1, encontrado com maior freqüência (37,2 por cento), apresentou o padräo K (-), beta (+), Pl (-) e CV (azul). Em sete rebanhos nos quais se examinaram 10 ou mais amostras, verificou-se que, apesar da ocorrência simultânea de mais de um biótipo por rebanho, houve predominância de um sobre os demais

Padräo de infecçäo intramamária em rebanhos leiteiros: exame de todos os quartos mamários das vacas em lactaçäo / Dairy herds pattern of intramammary infection: evaluation of all mammary quarters of lactating cows

Foram realizados exames microbiológicos de 6315 amostras de leite, obtidas de todos os quartos mamários de 1609 vacas em lactaçäo, originárias de 48 rebanhos localizados na Zona da Mata e Campo das Vertentes do Estado de Minas Gerais. No momento da coleta das amostras foram realizados exames clínicos dos úberes e o Califórnia Mastite Teste (CMT) do leite. Isolaram-se 3919 microrganismos, sendo 3637 de quartos mamários com infecçäo por um único agente e 283 de infecçäo mista. As porcentagens dos agentes isolados foram: Staphylococcus aureus, 19,2 por cento, Staphylococcus sp. coagulase negativos (SCN), 12,4 por cento, Streptococcus agalactiae, 6,9 por cento, Streptococcus sp. esculina positivos (ESCPOS), 4,0 por cento, Streptococcus sp. esculina negativos (ESCNEG), 2,1 por cento, Corynebacterium sp., 55,2 por cento, leveduras 0,1 por cento e Pseudomonas sp., 0,1 por cento. Em 2463 amostras (39 por cento do total) näo houve isolamento do exame microbiológico e 216 (3,4 por cento) estavam contaminadas. Corynebacterium sp. foi o microrganismo mais freqüentemente isolado, presente em todos os rebanhos, com porcentagens de quartos mamários infectados que variaram entre 1 por cento e 58,6 por cento. S. aureus foi isolado de 47 rebanhos, 37 deles com até 20 por cento de quartos infectados. S. agalactiae foi isolado em 29 rebanhos (60 por cento) e em 24 deles a média de quartos infectados foi 2,7 por cento. S. aureus, S. agalactiae, SCN, ESCNEG, ESCPOS e Corynebacterium sp. foram isolados de quartos mamários com e sem reaçäo inflamatória (escores positivo e negativo no CMT, respectivamente). O número de isolamentos dos patógenos primários da mastite foi significativamente maior de quartos com escores positivos no CMT, enquanto o número de isolamentos dos patógenos secundários (Corynebacterium sp. e SCN) foi maior em quartos mamários com escore negativo no CMT (P<0,001). Há necessidade de se considerarem quartos mamários com escore negativo no CMT quando forem selecionadas amostras para exames microbiológicos, e vacas negativas no CMT e infectadas por patógenos primários da mastite podem servir de fonte de infecçäo para outros animais no rebanho. A alta prevalência de S. aureus, S. agalactiae e Corynebacterium sp. sugere que medidas de controle para as mastites contagiosas näo estäo sendo corretamente aplicadas nos rebanhos estudados

Concentraçäo mínima inibitória de óxido de zinco para amostras de Escherichia coli isoladas de suínos com diarréia pós-desmama / Minimal inhibitory concentration of zinc oxide to Escherichia coli strains isolated from swine with post-weaning diarrhea

Avaliou-se a açäo inibitória in vitro do óxido de zinco (ZnO) para 29 amostras de Escherichia coli isoladas de diarréia pós-desmame dos suínos. Avaliaram-se também associaçöes entre sulfato de cobre (CuSO4), sulfato ferroso (FeSO4) e ZnO para verificar se os elementos cobre e ferro interferiram com a açäo do ZnO. A concentraçäo mínima inibitória (CMI) do ZnO para as amostras de E. coli variou de 120 ug/ml a 280 ug/ml. Treze amostras foram inibidas por 200 ug/ml, seis amostras foram inibidas por 220 ug/ml e uma amostra por 280 ug/ml. As CMI do CuSO4 e FeSO4 foram: 1024 ug/ml (CuSO4: uma amostra, FeSO4: cinco amostras) e 2048 g/ml (CuSO4: 19 amostras, FeSO4: 15 amostras). Quando se associaram 128 ug/ml e 256 ug/ml de CuSO4 a diferentes concentraçöes de ZnO (100 a 300 ug/ml), os valores da CMI do ZnO foram menores. Semelhantemente, os valores da CMI do FeSO4 foram menores quando se associaram CuSO4 (128 ug/ml) e ZnO (100 ug/ml) a diferentes concentraçöes de FeSO4 (256 a 2048 ug/ml). Os resultados mostraram que a tolerância das amostras de E. coli para ZnO é variável e que a associaçäo de ZnO, CuSO4 e FeSO4 nas concentraçöes testadas causou efeito inibitório aditivo sobre as amostras

Reproduçäo experimental da rinite atrófica com Pasteurella multocida em leitöes tratados com ácido acético ou inoculados com Bordetella bronchiseptica / Experimental reproduction of atrophic rhinitis with Pasteurella multocida in piglets treated with acetic acid or inoculated with Bordetella bronchiseptica

Avaliou-se a capacidade de diferentes amostras de P. multocida toxigênicas do tipo D, após tratamento da mucosa nasal com ácido acético, em colonizar a cavidade nasal e induzir rinite atrófica (RA) em leitöes, associadas ou näo com B. bronchiseptica. P. multocida foi reisolada mais frequentemente da cavidade nasal dos animais inoculados com B. bronchiseptica do que daqueles tratados com ácido acético. Duas amostras de P. multocida (4735 e 4776) induziram RA grave somente nos leitöes tratados com ácido acético ou inoculados previamente com B. bronchiseptica toxigênica em fase I. A amostra 3497 de P. multocida somente induziu RA grave nos leitöes tratados com ácido acético e quando associada a amostra 4963 de B. bronchiseptica em fase I e toxigênica, sendo reisolada em maior número e com maior frequência das cavidades nasais que as demais amostras de B. bronchiseptica. Existem diferenças entre amostras toxigênicas de P. multocida quanto à capacidade de colonizar a cavidade nasal e induzir RA grave em leitöes

Enterite hemorrágica causada por Escherichia coli em leitöes desmamados criados ao ar livre / Haemorrhagic enteritis caused by Escherichia coli in wraned piglets mared outdoors

Foram estudados dois surtos de enterite hemorrágica em leitöes desmamados, de um sistema de criaçäo de suínos ao ar livre, instalado no sul do Brasil. Colheu-se material para exames parasitológico, bacteriológico, anátomo e histopatológico e histoquímico utilizando-se a técnica de imunoperoxidase de animais clinicamente examinados. Nos surtos identificou-se Escherichia coli como agente causador da enterite. As amostras de E. coli isoladas foram soroagrupadas como 0141:K85ab, K88ab e 045:K"E65" (primeiro surto) e 0138:81, 0141:K85ab e 0115:K"V165" (segundo surto). Em cortes histológicos de várias partes do intestino delgado dos leitöes, onde se isolou 0141:K85ab, K88ab; 0141:K85ab e 0138:K81, examinados pela técnica de imunoperoxidase, observaram-se bactérias especificamente coradas e aderidas ao epitélio intestinal

Associaçäo de Pasteurella multocida toxigênica do tipo D ao trato respiratório superior dos suínos / Association of toxigenic type D Pasteurella multocida to the upper respiratory tract of swine

Objetivou-se determinar se associaçäo poderia ser o mecanismo pelo qual P. multocida integra-se com a mucosa nasal dos leitöes. Cortes criostáticos de anéis de traquéias inoculadas com amostra toxigênica de P. multocida do tipo D e de secçöes de tecido amigdalino, fixados em formalina e embebidos em parafina, de leitöes SPF de cinco a oito semanas de idade, inoculados como amostra toxigênica de P. multocida, foram submetidos às técnicas de imunoperoxidase (IP) para detectar P. multocida. Os números de Bordetella bronchiseptica e P. multocida nas secreçöes nasais e amígdalas, de 85 leitöes, foram estimados à necropsia. Os leitöes foram inoculados com amostra toxigênica de P. multocida do tipo D, após terem sido inoculados com B. bronchiseptica ou após terem suas cavidades nasais tratados por ácido acético. P. multocida foi recuperada das amígdalas de 47 (72 por cento) e das secreçöes nasais de 13 (20 por cento) animais inoculados, sendo o número de bactérias recuperado das amígdalas superior (P<0,005) ao das secreçöes nasais. Maior número de B. bronchiseptica foi isolado das secreçöes nasais. P. multocida associou-se ao muco presente no lúmen dos anéis e aderiu pobremente às células mucosas, e foi encontrada dentro das criptas das amígdalas sem invadir o parênquima glandular e sem aderir ao epitélio

Vacinaçäo com Bordetella bronchiseptica e Pasteurella multocida, associada a alteraçöes do manejo, no controle da rinite atrófica dos suínos / Use of a Bordetella bronchiseptica-Pasteurella multocida vaccine in addition to improved management, to control swine atrophic rhinitis

Empregou-se uma vacina preparada com B. bronchiseptica e P. multocida tipo D, toxigênica, para controlar a rinite atrófica em rebanho de 220 matrizes suínas. Aproximadamente 60 por cento dos animais em idade de abate exibiam sinais clínicos da doença antes da vacinaçäo. Lesöes das conchas nasais foram observadas em 70 por cento (56/80) dos animais antes do período experimental e em 77 por cento (55/71) dos näo vacinados, examinados ao final do experimento. O rebanho foi acompanhado durante 12 meses antes e 22 meses após o início da vacinaçäo. Realizaram-se alteraçöes no manejo, reduçäo do plantel de 220 para 180 matrizes e mudanças no esquema de limpeza, desinfecçäo e ocupaçäo dos prédios. As medidas adotadas eliminaram a doença clínica dos leitöes jovens e reduziram (P<0,001) as alteraçöes das conchas nasais, observadas em apenas 15 por cento (39/266) dos leitöes vacinados, a ocorrência de pneumonias e pleuropneumonias, de 22 por cento para 9 por cento dos animais necropsiados e o número de condenados no frigorífico, 11 por cento para 0,8 por cento