Efeito da inibição da óxido nítrico sintase induzível na capacitação in vitro de espermatozoides bovinos / Effect of inhibition of inducible nitric oxide synthase on in vitro capacitation of bovine spermatozoa

Avaliaram-se o papel do óxido nítrico (NO) por meio da inibição da enzima óxido nítrico sintase induzível (iNOS), após a adição da aminoguanidina (AG), na motilidade, no vigor e na integridade da membrana plasmática nos tempos de 15, 60, 120, 180, 240 e 300min e a atividade mitocondrial e a capacitação de espermatozoides bovinos após 300min de cultivo. Adicionaram-se diferentes concentrações (0,001, 0,01 e 0,1M) de AG durante a capacitação induzida pela heparina e 500μM de nitroprussiato de sódio (SNP, doador de NO) à concentração deletéria. A adição de 0,1M de AG diminuiu a motilidade e o vigor espermático e a integridade da membrana (P<0,05). A adição de SNP ao meio de cultivo com 0,1M de AG somente reverteu a integridade da membrana após 300min. A inibição da síntese de NO pela adição de AG não alterou a atividade mitocondrial. A percentagem de oócitos penetrados com espermatozoides tratados com 0,01 e 0,1M de AG diminuiu 20,3 e 100 por cento, respectivamente, em relação aos não tratados (controle) (P<0,05), contudo houve aumento de 15 por cento na percentagem de oócitos desnudados penetrados com espermatozoides capacitados em presença de 0,1M de AG. Conclui-se que a inibição da síntese de NO pela AG diminuiu a qualidade espermática durante a capacitação de espermatozoides bovinos in vitro, exceto a atividade mitocondrial. Somente a integridade da membrana foi revertida após adição de NO, sugerindo diferentes vias de ação do NO na qualidade espermática ao longo da capacitação in vitro de espermatozoides bovinos.

The role of nitric oxide (NO) was evaluated by inhibition of inducible nitric oxide synthase (iNOS), with aminoguanidine (AG) on motility, vigor, and plasmatic membrane integrity of bovine spermatozoa culture after 15, 60, 120, 180, 240, and 300min and on mitochondrial activity and capacitation after 300min, respectively. Different concentrations, 0.001, 0.01, and 0.1M of AG were added during the heparin induced capacitation and sodium nitroprusside (SNP, NO donor-500μM) to the deleterious concentration. The addition of 0.1M of AG diminished progressive motility, spermatic vigor, and membrane integrity (P<0.05). SNP addition to the 0.1M of AG did revert only plasmatic membrane integrity after 300min. Mitochondrial activity was not influenced by addition of AG. Percentage of penetrated oocytes after addition of 0.01 and 0.1M of AG diminished, 20.3 and 100 percent, respectively, in relation to the control oocytes (P<0.05). However, an increase of 15 percent was observed when denuded oocytes were used with 0.1M AG treated sperm (P<0.05). It was concluded that the inhibition of NO synthesis with aminoguanidine diminished sperm quality during in vitro capacitation of bovine spermatozoa, except the mitochondrial activity. Only membrane integrity was reverted with the addition of NO to culture medium, suggesting different pathways of NO action on bovine sperm quality during in vitro capacitation.

Aspectos histopatológicos da adenomiose em úteros bovinos nas diferentes fases do ciclo estral / Histophatological aspects of adenomyosis in bovine uteri in different phases of the estrous cycle

Relacionaram-se as características da adenomiose com as fases do ciclo estral em 61 peças de úteros de bovinos colhidas em matadouros. A adenomiose foi classificada em superficial e profunda. A fase do ciclo estral foi estimada pela morfologia, pela coloração e pela vascularização do corpo lúteo e presença ou não de folículos ovarianos maiores que 8mm. Os animais que estavam em anestro (n=11) apresentaram a menor ocorrência de adenomiose (8,2 por cento), e os que estavam na fase lútea média (n=21), a maior (31,0 por cento). Nas fases lútea inicial (n=13) e folicular (n=16) as ocorrências foram semelhantes, 18,0 e 22,9 por cento, respectivamente. A maior porcentagem de adenomiose profunda ocorreu nas fases lútea inicial e média, 45,0 e 47,4 por cento, respectivamente, e durante o anestro e a fase folicular foram de 20,0 e 14,3 por cento, respectivamente. Os resultados sugerem que a fase do ciclo estral influencia na ocorrência de adenomiose e no grau de infiltração miometrial das glândulas endometriais

The relationship of the adenomyosis characteristics and the phases of the estrus cycle in 61 cows bovine's uteruses collected in slaughterhouses was studied. The adenomyoses were classified as superficial and deep. The morphology, staining and vascularization of the corpus luteum and the presence or not of larger ovarian follicles than 8mm helped to estimate tthe estrus cycle. The cows in anestrus (n=11) showed the least occurrence of adenomyosis (8.2 percent) and the animals in the medium luteal phase (n=21) the largest one(31,0 percent). In the initial luteal phase (n=13) and the follicular phase (n=16) the occurrences of adenomyosis were similar and equals to 18.0 and 22.9 percent, respectively. The largests percentage of deep adenomyosis were found in the initial and in the medium luteal phases, 45.0 and 47.4 percent, respectively, and during the anestrus and the follicular phase they were 20.0 and 14.3 percent, respectively. The data suggest that the cycle phase influences in adenomyosis occurrence and in the degree of miometrial infiltration of the endometrial glands

Effect of exercise on occurrence of diurnal rhythms of plasma ions and metabolites in Thoroughbred racehorses

Records of plasma calcium (Ca++), phosphorus (Pi), potassium (K+), sodium (Na+), chloride (Cl-), magnesium (Mg++), iron (Fe++), glucose, cholesterol, triglycerides and total protein levels were measured to determine the effects of exercise on occurrence of diurnal rhythms in Throughbred racehorses (n=7) under physical training. Physical activities consisted of gallop on the track and walking. Blood samples were collected from jugular vein every 4h over a 48h period. Plasma Ca++, K+, Mg++ and Na+ levels were obtained by flame photometry; and, Pi, Cl-, Fe++, glucose, cholesterol, triglycerides and total protein levels were measured by colorimetric tests using visible UV spectrophotometry. The data were analyzed using a 24h period to each exercise performed. Diurnal rhythm of Pi was observed when walking was the physical activity performed, and its acrophase occurred at the light period. Plasma triclycerides showed significant diurnal rhythms, with their acrophases occurring at the dark period, even when walking or gallop were performed. High intensity exercise (gallop) decreased triglycerides amplitude. No significant diurnal rhythms of other variables were found. Gallop, as physical activity, masked phosphorus diurnal rhythm. However, physical training did not influence triglycerides diurnal rhythm occurrence. High intensity exercise (gallop) just declined triglycerides amplitude

Mensuraram-se as concentrações plasmáticas de cálcio (Ca++), fósforo (Pi), potássio (K+), sódio (Na+), cloreto (Cl-), magnésio (Mg++), ferro (Fe++), glicose, colesterol, triglicerídeos e proteínas totais para determinar os efeitos do exercício sobre a ocorrência dos ritmos diários em cavalos de corrida da raça Puro Sangue Inglês (n=7), em treinamento. A atividade física consistiu de galope na raia e passo. Amostras de sangue foram coletadas da veia jugular a cada 4h durante um período de 48h. As concentrações plasmáticas de Ca++, K+, Mg++ e Na+ foram obtidas por espectrofotometria de absorção atômica com chama, e as concentrações de Pi, Cl-, Fe++, glicose, colesterol, triglicerídeos e proteína total foram mensuradas por testes colorimétricos utilizando-se a espectrometria de luz UV visível. Os dados foram analisados utilizando-se um período de 24h para cada tipo de exercício desenvolvido. Ritmo diário de Pi foi observado quando o passo foi a atividade física desenvolvida, apresentando sua acrofase no período diurno. A concentração plasmática de triglicerídeos mostrou significante ritmo diário com a acrofase ocorrendo no período noturno, independente se foi desenvolvido o galope ou passo. O exercício de alta intensidade (galope) diminuiu a amplitude dos triglicerídeos. Nenhum ritmo diurno foi achado nas outras variáveis. Estes resultados mostram que o galope como atividade física, mascara o ritmo diário do fósforo. Entretanto, o treinamento físico não apresentou nenhum efeito na ocorrência do ritmo diário de triglicerídeos, somente na sua amplitude

Testosterona e gonadotrofina coriônica humana estimulam a esteroidogênese em células da granulosa de folículo pré-ovulatório de égua? / Do testosterone and human chorionic gonadotropin stimulate steroidogenesis in granulosa cells of preovulatory follicle in mare?

Avaliou-se o papel da gonadotrofina coriônica humana (hCG) e da testosterona na produção de progesterona (P4) e 17ß-estradiol (E2) pelas células da granulosa cultivadas in vitro de folículo antral de égua. Os tratamentos usados foram: 1- controle (nenhum hormônio adicionado), 2- 1UI hCG (0,3µg/ml) e 3- 10UI hCG (3,0µg/ml). O tratamento com hCG foi realizado na presença ou não de testosterona (144ng/ml). O meio foi coletado e substituído com 0,25, 3, 6, 12, 24 e 144h de cultivo. As concentrações de P4 e E2 foram mensuradas por radioimunoensaio. Não se observou diferença entre os tratamentos 1 e 3 quanto à produção de P4 e E2; o tratamento 1 resultou em aumento da concentração de progesterona após 24h de cultura (P<0,01), mas somente em presença de testosterona. A concentração de estradiol aumentou em presença de testosterona, alcançando concentração máxima com 6h de cultura (P<0,01), e diminuiu gradativamente, até atingir a concentração observada com 0,25h de cultura. A adição de hCG não influenciou a síntese do estradiol. A testosterona desempenhou importante efeito estimulador na síntese/secreção doe E2 pelas células da granulosa e modulou a ação do hormônio luteinizante na diferenciação e luteinização das células da granulosa de folículo antral presumidamente pré-ovulatório de égua in vitro.