ABSTRACT
ABSTRACT Achyrocline satureioides (Lam.) DC. Asteraceae, ‘marcela del campo', possess several pharmacological properties. Previously we reported antiviral activity of an aqueous extract of A. satureioides against an alphavirus, Western Equine Encephalitis virus. Alphaviruses are highly virulent pathogens which cause encephalitis in humans and equines. There are no effective antiviral to treat its infections. The aim of this study was to evaluate in vitro cytotoxic and antiviral activities against Western Equine Encephalitis virus of five water extract chromatographic fractions from A. satureioides and identify the main compounds of the bioactive fraction. Also, it was to assess in vivo cytogenotoxic ability of the active fraction. Cytotoxicity studies revealed low toxicity of the most of fractions in Vero and in equine peripheral blood mononuclear cells. Antiviral studies showed that the water crude extract – Sephadex LH 20 – fraction 3 MeOH–H2O (Fraction 3) was active against Western Equine Encephalitis virus with Effective Concentration 50% = 5 µg/ml. Selectivity Indices were 126.0 on Vero and 133.6 on peripheral blood mononuclear cells, four times higher than aqueous extract selectivity index. Regarding the mechanism of action we demonstrated that F3 exerted its action in intracellular replication stages. Further, fraction 3 showed important virucidal action. Fraction 3 contains, in order of highest to lowest: chlorogenic acid, luteolin, 5,7,8-trimethoxyflavone, 3-O-methylquercetin and caffeic acid. Fraction 3 did not induce in vivo toxic nor mutagenic effect. Therefore, it is safe its application as antiviral potential. Further studies of antiviral activity in vivo will be developed using a murine model.
ABSTRACT
Bovine mastitis is a disease that causes great economic losses per year, being Streptococcus uberis the main environmental pathogen involved. The aim of the present study was to determine the minimum inhibitory concentration (MIC) and the minimum bactericidal concentration (MBC) of Minthostachys verticillata essential oil and limonene for S. uberis strains isolated from bovine mastitis. In addition, the effect of MIC on biofilm formation was analyzed. MIC values for the essential oil ranged from 14.3 to 114.5 mg/ml (1.56-12.5% v/v) and MBC between 114.5 and 229 mg/ml (12.5-25% v/v). MICs for limonene ranged from 3.3 to 52.5 mg/ml (0.39-6.25% v/v) and MBC was 210 mg/ml (25% v/v). Both compounds showed antibacterial activity and affected the biofilm formation of most of the strains tested. In conclusion, these compounds could be used as an alternative and/or complementary therapy for bovine mastitis caused by S. uberis.
La mastitis bovina es una enfermedad que causa grandes pérdidas económicas por año, Streptococcus uberis es el principal patógeno ambiental involucrado. El objetivo del presente estudio fue determinar la concentración inhibitoria mínima (CIM) y la concentración bactericida mínima (CBM) del aceite esencial de Minthostachys verticillata y del limoneno sobre cepas de S. uberis aisladas de mastitis bovina. Además, se analizó el efecto del aceite esencial y el limoneno en la CIM determinada en caso sobre la formación de biofilm de estas cepas. Los valores de CIM del aceite esencial oscilaron entre 14,3 y 114,5 mg/ml (1,56%-12,5% v/v) y los de CBM entre 114,5 y 229 mg/ml (12,5%-25% v/v). Las CIM del limoneno oscilaron entre 3,3 y 52,5 mg/ml (0,39% - 6,25% v/v) y la CBM fue de 210 mg/ml (25% v/v). Ambos compuestos mostraron actividad antibacteriana y afectaron la formación de biofilm de la mayoría de las cepas. En conclusión, estos compuestos podrían ser utilizados como terapia alternativa o complementaria para la mastitis bovina causada por S. uberis.
Subject(s)
Animals , Cattle , Streptococcus/drug effects , Microbial Sensitivity Tests/methods , Limonene/therapeutic use , Mastitis, Bovine/drug therapy , Streptococcus/isolation & purification , Mastitis, Bovine/prevention & control , Anti-Bacterial Agents/analysisABSTRACT
Antecedentes. Los derivados de Achyrocline satureioides (A.s.) y Minthostachys verticillata (M.v.) han sido utilizados tradicionalmente por sus propiedades antiinflamatorias y broncodilatadoras en el asma. Objetivos. Comparar la inhibición de basófilos in vitro por dexametasona, teofilina, cromoglicato disódico, bromuro de ipratropio + salbutamol con la de decocciones de hojas/flores de A.s. y decocción/aceite esencial de M.v., mediante el dosaje de B-hexosaminidasa, un marcador de la reacción alérgica inmediata. Evaluar los efectos inmunomoduladores de la decocción/aceite esencial de M.v. sobre la producción de IFN-y. Metodologia. Se estudiaron 38 pacientes alérgicos a hongos anemófilos. Se realizó prick y dosaje de IgE total por EIA. La liberación de B-hexosaminidasa se evaluó con el alergeno solo y el alergeno adicionado de las drogas comerciales o cada derivado vegetal, por EIA. Los niveles de IFN-y fueron cuarificados por EIA en los sobrenadantes de cultivos de linfocitos estimulados con decocción o aceite esencial de M.v. Resultados. Todos los pacientes mostraron reactividad cutánea. Los basófilos desafiados in vitro por el alergeno, liberanon B-hexosaminidasa. La liberación de la enzima fue disminuida por cada droga o derivado vegetal (p<0,05). La producción de IFN-y fue significativamente menor en los alérgicos que en los controles (p<0,02). La decocción o el aceite esencial de M.v. estimularon la síntesis de IFN-y en las muestras de pacientes alérgicos (p<0,02). Conclusiones. La prueba de liberación de B-hexosaminidasa demostró ser una técnica accesible y de fácil realización que podría reemplazar o complementar las prácticas diagnósticas habituales. Bromuro de ipratropio + salbutamol resultó la droga más eficaz in vitro. Las decocciones de flores de A.s. y de hojas de M.v. mostraron potencia reguladora sobre la desgranulación in vitro. Cecocción de hojas y aceite esencial de M.v., fueron inmunomoduladores para la procucción de IFN-y.