Suscetibilidade genética para fluorose dentária: um estudo metabólico e proteômico com diferentes linhagens de camundongos / Genetic susceptibility for dental fluorosis: a metabolic and proteomic study with different strains of mice

A fluorose dentária é uma patologia que ocorre durante a formação dos dentes na presença de doses excessivas de fluoreto (F-). Os mecanismos pelos quais o Fprovoca a fluorose ainda são poucos conhecidos. A influência de fatores genéticos tem sido considerada na suscetibilidade/resistência do indivíduo em desenvolver a fluorose. Duas linhagens de camundongos (A/J e 129P3/J) com diferença na resistência ou suscetibilidade à fluorose dentária foram utilizadas para determinar se a suscetibilidade à fluorose pode ser explicada pela diferença no metabolismo e se há diferença no perfil protéico dos rins e urina destes animais. Para isso, um estudo metabólico foi conduzido com 18 camundongos A/J (suscetível) e 18 129P3 / J (resistente) após o desmame. Cada amostra foi dividida em 3 grupos, com diferentes concentrações de F- na água de beber (0, 10 e 50 ppm F). Uma vez que um estudo piloto revelou que os camundongos A/J ingeriam um maior volume de água quando comparado com o 129P3/J, a concentração de F- na água dada aos camundongos A/J foi ajustada semanalmente a fim de fornecer doses semelhantes de F- para ambas linhagens. Os animais foram mantidos em gaiolas metabólicas (n = 2/gaiola) por 7 semanas, com livre acesso à água e dieta de baixa ingestão de F- (0,95 ppm). A ingestão e excreção de F- foram calculadas, bem como os níveis de F- no plasma, no fêmur e no rim. O grau de fluorose dentária foi avaliado usando análise de fluorescência quantitativa (QLF) e exame clínico. Os perfis proteômicos renal e urinário foram examinados utilizando 2D-PAGE e coloração com azul de Coomassie.. Os dados do estudo metabólico foram testados para diferenças significativas pela ANOVA a 2 critérios (p <0,05). As imagens dos géis e as diferenças estatísticas (ANOVA, p<0,05) foram analisadas pelo programa Image Master Platinum 7.0. Os camundongos da linhagem A/J submetidos à alta concentração de fluoreto apresentaram um grau de fluorose significativamente maior quando comparado com a...

Dental fluorosis occurs during tooth formation when excessive doses of fluoride (F) are ingested. The mechanisms that underlie the pathogenesis of dental fluorosis are not known so far. The influence of genetic factors has been considered in individual susceptibility/resistance to develop fluorosis. Two inbred mice strains (A/J and 129P3/J) have been reported to have different susceptibilities to dental fluorosis. They were used in the present study to determine if the susceptibility to dental fluorosis can be explained by alterations in F metabolism and to evaluate if there is difference in the profile of protein expression in kidney and urine of these animals. For this, a metabolic study was conducted with 18 A/J (susceptible) and 18 129P3/J (resistant) weanling mice. Each strain was divided into 3 groups, with differed according to the F concentration given in the drinking water (0, 10 and 50 ppm F). Since a pilot study showed that the A/J mice drank a higher volume of water when compared with the 129P3/J, the F concentration in the water given to the A/J mice was weekly adjusted in order to provide similar F intakes for both strains. The mice were housed in metabolic cages (n=2/cage) for 7 weeks, with free access to water and low-F diet (0.95 ppm). F intake and excretion were calculated, as well as plasma, femur and kidney F levels. The degree of dental fluorosis was assessed using QLF and clinical examination. Renal and urinary proteome profiles were examined using 2D-PAGE and coomassie brilliant blue staining. Data were tested for significant differences by 2-way repeated-measures ANOVA (p<0.05). The gels images and statistical differences (ANOVA, p <0.05) were analyzed by the Image Master Platinum 7.0 software. Significantly higher QLF scores were observed for the A/J mice submitted to 50 ppm F. The total F intake did not significantly differ between the strains. The total F excretion was significantly higher for the A/J mice, due to the higher urinary...

Plasma as an indicator of bone fluoride levels in rats chronically exposed to fluoride

OBJECTIVE: This study evaluated the use of plasma, bone surface (periosteal) and whole bone as biomarkers of chronic fluoride (F) exposure. METHODS: Forty male Wistar rats were assigned to 4 groups (n=10/gr) that differed according to the F concentration they received in the drinking water. Groups 1, 2, 3 and 4 received water containing 0 (control), 5, 15, and 50 mg F/L, respectively. The rats were killed at 120 days of age. Plasma and femur were collected and analyzed for fluoride with the ion specific electrode by the direct method or after hexamethyldisiloxane-facilitated diffusion. Data were tested for statistically significant differences by ANOVA and linear regression (p<0.05). RESULTS: Mean (± SE) plasma F concentrations ranged from 0.030 ± 0.002 to 0.187 ± 0.013 (mg/mL). The concentrations in surface and whole bone ranged from 610 ± 32 to 4,693 222; and 647 ± 22 to 3,439 ± 134 æg/g, respectively. The surface/whole F concentration ratios were 0.941, 1.414, 1.173 and 1.377, for groups 1, 2, 3 and 4 respectively. For plasma and whole bone, the difference among all groups was statistically significant, except for group 2 compared to group 1. For bone surface, all groups differed from each other except for group 2 compared to group 3. A significant positive correlation was found between bone surface and whole bone F (r²=0.94), as well as between plasma and bone surface (r²=0.71) and plasma and whole bone (r²=0.74). CONCLUSIONS: Data suggest that both bone surface and whole bone are suitable biomarkers of chronic F exposure in rats and plasma may be used as indicator of bone fluoride levels.

OBJETIVOS: Este estudo avaliou o uso do plasma, superfície óssea e osso total como biomarcadores da exposição crônica ao flúor em ratos. MÉTODOS: Quarenta ratos Wistar machos foram divididos em 4 grupos (n=10/gr) que diferiram de acordo com a concentração de flúor presente na água de beber. Os grupos 1, 2, 3 e 4 receberam água contendo 0, 5, 15 e 50 mg F/L, respectivamente. Os ratos foram mortos ao completarem 120 dias. O plasma e os fêmures foram coletados e a concentração de flúor foi analisada com um eletrodo específico pelo método direto para a superfície do fêmur e após difusão facilitada por HMDS para o osso total e o plasma. Os dados foram analisados por ANOVA e regressão linear (p<0,05). RESULTADOS: A média (± EP) da concentração de flúor no plasma variou de 0,030±0,006 a 0,187±0,040 (mg/mL). A concentração de flúor na superfície e no osso total variou de 610±103 a 4693±703 e 647±69 a 3439±423 (mg/g), respectivamente. A proporção entre a concentração de flúor na superfície óssea e osso total foi de 0,941, 1,414, 1,173 e 1,377, para os grupos 1, 2, 3 e 4 respectivamente. Para o plasma e osso total, a diferença entre todos os grupos foi estatisticamente significante, exceto para o grupo 2 quando comparado com o grupo 1. Para a superfície óssea só não houve diferença entre o grupo 2 quando comparado com o grupo 3. Houve correlação positiva significante entre a concentração de flúor presente na superfície óssea e no osso total (r²=0,94), tão bem como entre o plasma e a superfície óssea (r²=0,71) e o plasma e o osso total (r²=0,74). CONCLUSÕES: Os dados sugerem que tanto a superfície óssea quanto o osso total são bons indicadores da exposição crônica ao flúor em ratos e o plasma pode ser utilizado como um indicador dos níveis de flúor.

Plasma as an indicator of bone fluoride levels in rats chronically exposed to fluoride%Plasma como um indicador dos níveis de flúor no osso em ratos expostos cronicamente ao flúor

OBJETIVOS: Este estudo avaliou o uso do plasma, superfície óssea e osso total como biomarcadores da exposição crônica ao flúor em ratos. MÉTODOS: Quarenta ratos Wistar machos foram divididos em 4 grupos (n=10/gr) que diferiram de acordo com a concentração de flúor presente na água de beber. Os grupos 1, 2, 3 e 4 receberam água contendo 0, 5, 15 e 50 mg F/L, respectivamente. Os ratos foram mortos ao completarem 120 dias. O plasma e os fêmures foram coletados e a concentração de flúor foi analisada com um eletrodo específico pelo método direto para a superfície do fêmur e após difusão facilitada por HMDS para o osso total e o plasma. Os dados foram analisados por ANOVA e regressão linear (p<0,05). RESULTADOS: A média (± EP) da concentração de flúor no plasma variou de 0,030±0,006 a 0,187±0,040 (mg/mL). A concentração de flúor na superfície e no osso total variou de 610±103 a 4693±703 e 647±69 a 3439±423 (mg/g), respectivamente. A proporção entre a concentração de flúor na superfície óssea e osso total foi de 0,941, 1,414, 1,173 e 1,377, para os grupos 1, 2, 3 e 4 respectivamente. Para o plasma e osso total, a diferença entre todos os grupos foi estatisticamente significante, exceto para o grupo 2 quando comparado com o grupo 1. Para a superfície óssea só não houve diferença entre o grupo 2 quando comparado com o grupo 3. Houve correlação positiva significante entre a concentração de flúor presente na superfície óssea e no osso total (r²=0,94), tão bem como entre o plasma e a superfície óssea (r²=0,71) e o plasma e o osso total (r²=0,74). CONCLUSÕES: Os dados sugerem que tanto a superfície óssea quanto o osso total são bons indicadores da exposição crônica ao flúor em ratos e o plasma pode ser utilizado como um indicador dos níveis de flúor

Nail and bone surface as indicators of acute exposure to fluoride in rats

Este estudo avaliou o uso de unhas e superfícies ósseas como indicadores da exposição aguda ao flúor em ratos. Seis grupos (n=10/grp), com idade de 70 dias, receberam, por gastro-gavagem, doses únicas de fluoreto de sódio contendo 10, 35, 45, 60, 75 e 90 mg flúor/kg peso corpóreo. O grupo controle recebeu água deionizada. Duas horas após a administração de flúor, os ratos foram mortos e seu plasma, unhas (metades próximas à porção de crescimento) e fêmur foram coletados. As concentrações de flúor na unha e plasma foram analisadas com o eletrodo após difusão facilitada por HMDS. O flúor da superfície do fêmur foi removida de uma área circular (4,52 mm2) por imersão em HCl 0,5 M por 15 segundos, tamponado com TISAB (contendo NaOH) e analisado com o eletrodo. Os dados foram analisados por ANOVA e teste de Tukey (p<0,05) e por regressão linear (p<0,001). As concentrações médias de flúor variaram de 55,4 a 91,5 mg/g para as unhas; de 0,019 a 6,937 mg/mL para o plasma e de 617 a 2.394 mg/g para a superfície do fêmur. A concentração de flúor nas unhas do grupo experimental não foi diferente do controle. Quanto ao flúor no plasma, todos os grupos experimentais diferiram do controle, exceto o grupo que recebeu a menor dose. Em respeito ao flúor na superfície do fêmur, apenas o grupo que recebeu a maior dose diferiu do controle. Uma forte correlação foi encontrada entre o flúor plasmático e a dose administrada (r=0,736) e uma correlação média foi encontrada entre a superfície do fêmur e a dose administrada (r=0,510). Os dados sugerem que após duas horas de administração aguda de flúor, unhas e superfície do fêmur não são bons indicadores da exposição ao flúor.

Comparaçäo de duas técnicas para remineralizaçäo do esmalte / Comparison of two techniques for enamel remineralization

Foram selecionados seis pacientes do Hospital de Reabilitaçäo de Anomalias Craniofaciais da Universidade de Säo Paulo, com idade entre 16 e 20 anos, apresentando um total de 41 manchas brancas nos dois lados da arcada superior. No lado esquerdo da arcada, foi feita remineralizaçäo utilizando-se a técnica com o produto comercial Reminer. No lado direito, foi utilizada uma técnica modificada, com o uso de dentifrícios fluoretados pelo paciente durante a noite, diariamente, em um período de oito semanas. Observou-se remineralizaçäo em 62 por cento das manchas com o uso da técnica com Reminer e remineralizaçäo parcial em 10 por cento das lesöes com a utilizaçäo de dentifrícios fluoretados. A utilizaçäo do produto comercial Reminer apresentou-se mais eficaz que o uso de dentifrícios fluoretados