ABSTRACT
As espécies do grupo Mycobacterium abscessus (MAG) podem causar infecções em diferentes órgãos e tecidos, sendo M. abscessus a terceira micobactéria não tuberculosa mais isolada, e são responsáveis por 80% das infecções pulmonares causadas pelas micobactérias de crescimento rápido (MCR). Suas infecções são de difícil resolução devido a sua resistência intríseca e adquirida à maioria das classes de antibióticos usualmente utilizados, tornando este grupo de grande preocupação para a saúde pública. O teste de suscetibilidade aos antimicrobianos (TSA) é recomendado para auxiliar na escolha terapêutica e a única metodologia validada é a concentração inibitória mínima, recomendada pelo Clinical & Laboratory Standards Institute. Este projeto teve como objetivo avaliar o TSA pelo sistema automatizado BACTEC MGIT 960/TB eXiST para isolados do MAG. Além disso, foi avaliada a presença de plasmídeos. A cepa M. abscessus ATCC 19977 foi utilizada para desenvolver o protocolo e, subsequentemente, o TSA foi realizado para 31 isolados de MAG frente a quatro antibióticos tanto pelo sistema BACTEC MGIT 960/TB eXiST quanto pelo método padrão REMA. A comparação entre os dois métodos mostrou que não houve erros críticos. No geral, o sistema BACTEC MGIT 960/TB eXiST forneceu corretamente as informações clinicamente relevantes, com a única exceção sendo uma discrepância menor. Todos os isolados testados foram sensíveis (4 µg/mL) a amicacina, com a exceção de um isolado resistente. Para imipenem, todos os isolados foram resistentes (32 µg/mL), enquanto para cefoxitina apenas dois isolados foram sensíveis (16 µg/mL). Em relação a claritromicina, 14 isolados foram sensíveis (2 µg/mL) enquanto os restantes foram resistentes (8 µg/mL). A ánalise genômica evidenciou que apenas dois isolados apresentaram plasmídeos. O isolado 381 apresentou dois contigs, sendo um deles idêntico ao fago Adler, enquanto o isolado 1189 apresentou um único contig com diversos mecanismos de defesa celular, incluindo uma metalo beta-lactamase. Este estudo descreve um 7 protocolo de TSA para MCR pelo sistema MGIT 960/TB eXiST e que a aplicação do método a um conjunto de isolados clínicos demonstrou que o sistema é confiável e altamente reprodutível.
Subject(s)
Mycobacterium abscessus , Anti-Infective Agents , MycobacteriumABSTRACT
Mycobacterium abscessus é a espécie entre as micobactérias de crescimento rápido (MCR) mais comum como agente etiológico de doença pulmonar, apresentando elevada resistência aos antibióticos utilizados no tratamento. É uma das espécies mais frequentes isoladas, sendo responsável por 80% das infecções pulmonares causadas por MCR. Alguns estudos relataram resistência adquirida e induzida a claritromicina, um dos principais fármacos utilizados no tratamento. O objetivo deste trabalho foi caracterizar os isolados do grupo M. abscessus quanto ao perfil de resistência a claritromicina de pacientes do Estado de São Paulo, isolados no período de 2010 a 2011, pelo padrão de mutação nos genes erm(41) e rrl. Foram incluídos no estudo os isolados identificados como M. abscessus tipo 1 e tipo 2 pela técnica PRA-hsp65 na rotina diagnóstica do Instituto Adolfo Lutz. A confirmação da espécie foi realizada pelo sequenciamento do gene rpoB. O teste de suscetibilidade a claritromicina foi realizado de acordo com as recomendações do CLSI (2011) e com incubação estendida por 14 dias com leituras nos dias 5, 7 e 10. A préincubação dos isolados com 0,01 e 0,1ug/ml de claritromicina foi testada para verificar se uma incubação prévia era capaz de induzir a resistência. O perfilgenético dos isolados foi obtido por meio do sequenciamento dos genes rrl e erm(41). Foram selecionados 151 isolados, mas somente 135 foram viáveis para análise. Destes, 78 eram M. abscessus tipo 1 e 57 tipo 2. Dos isolados M. abscessus tipo 1, todos foram identificados como M. abscessus pelo sequenciamento do gene rpoB, e daqueles identificados como tipo 2, dois foram identificados como M. abscessus, 27 M. massiliense, 27 M. bolletii e um M. porcinum, este último, excluído da análise. O CIM foi padronizado para ser lidocom o corante vital resazurina, apresentando elevado valor de correlação com a leitura visual (93,3%). No CIM com leitura em 14 dias, 10 isolados de M. abscessus foram sensíveis...
Mycobacterium abscessus is the most common etiological agent of pulmonary disease among the rapidly growing mycobacteria (RGM), exhibiting high resistance to the antibiotics used in the treatment. It is one of the most frequently isolated species, accounting for 80% of lung infections caused by RGM. Some studies reported acquired and induced resistance to clarithromycin, a major drug used in the treatment. The aim of this study was to characterize M. abscessus isolates according to the clarithromycin resistance profile from patients of the State of São Paulo, isolated in the period from 2010 to 2011, by mutations patterns in the erm(41) and rrl genes. Isolates identified as M. abscessus type 1 and type 2 by PRA-hsp65 technique for the routine diagnosisat Institute Adolfo Lutz were included in the study. Species confirmation was performed by rpoB gene sequencing. The clarithromycin susceptibility test was performed according to the CLSI recommendations (2011), and with extendedincubation for 14 days with readings on days 5, 7, and 10. Pre-incubation of the isolates with 0.01 and 0.1µg/ml of clarithromycin was tested to verify if the preincubation could induce resistance. The genetic profile of the isolates was obtained by sequencing rrl and erm(41) genes. We selected 151 isolates, but only 135 were viable for analysis. Of these, 78 were M. abscessus type 1 and 57type 2. The isolates M. abscessus type 1, all were identified as M. abscessus by sequencing the rpoB gene, and among those identified as type 2, two were identified as M. abscessus, 27 M. massiliense, 27 M. bolletii and one M. porcinum, the last being excluded from the analysis. The MIC was standardized to be read with the vital dye resazurin, showing high correlation value with visual readings (93.3%). In MIC with readings after 14 days, 10 isolates of M. abscessus were susceptible (S), 64 with inducible resistance (IR) and four 10 resistant (R). Among M. bolletii isolates, five...
Subject(s)
Clarithromycin , Genetic Speciation , Nontuberculous Mycobacteria , Drug Resistance , BrazilABSTRACT
O gênero Mycobacterium contempla espécies do complexo M. tuberculosis e as denominadas micobactérias não tuberculosas (MNT). As micobactérias, quando em contato com o homem e alguns animais, podem causar doenças por meio de quebra da barreira do hospedeiro. Em virtude de sua natureza ambiental e muitas vezes oportunista, as micobactérias de crescimento rápido podem causar infecções nosocomiais, e com maior frequência pela espécie Mycobacterium abscessus. O M. abscessus causa diversos tipos de infecções teciduais e é altamente resistente à maioria dos quimioterápicos. Foi realizada uma revisão da literatura sobre os surtos de ocorrência nacional e internacional, com o objetivo de averiguar as principais causas que facilitaram a sua proliferação. Em 28 publicações, foram descritas as características das MNTe 15 trabalhos foram referentes ao relato de surtos, dos quais três nacionais associados aos procedimentos clínicos invasivos e 12 internacionais, correlacionados aos procedimentos médicos não invasivos. Todos os artigos relataram a frequente ocorrência de práticas inadequadas de limpeza, de procedimentos ede desinfecção. Estes fatos mostram a necessidade de sistema de qualidade mais eficiente e de estudosadicionais sobre a natureza do agente patogênico para tomada de medidas profiláticas mais efetivas.