Confocal laser scanning microscopy and immunohistochemistry of cerebellar Lugaro cells

The present paper shows by means of confocal laser scanning microscopy the immunoreactivity of rat cerebellar Lugaro cells for calbindin, synapsin-I, PSD-95, GluR1, CaMKII alpha, and N-cadherin. Lugaro cells were easily characterized by their location beneath Purkinje cells. Calbindin revealed immunoreactivity in the cell body, and the axonal and dendritic processes. Synapsin-I labelled the presynaptic endings on Lugaro cells. Synapsin-I and PSD-95 immunoreactivity demonstrated the localization of presynaptic and postsynaptic endings surrounding cell soma, corresponding to afferent extrinsic and intrinsic cerebellar fibers. GluR1 immunoreactivity of the soma and cell processes indicates that Lugaro cells have functional ionotropic glutamate receptors that regulate calcium levels. CaMKII alpha immunoreactivity of L ugaro cell soma and processes suggest its participation as a molecular switch for long-term information storage, and serving as a molecular basis of long-term synaptic memory. N-cadherin immunoreactivity was correlated with somato-somatic and somato-dendritic junctions between Lugaro cells and their synaptic connections.

La microscopia electrónica de barrido del infarto placentario / Scanning electron microscopy of placental infartion

Muestras de regiones de infartación placentaria se tomaron de una paciente con preeclampsia y se procesaron con las técnicas convencionales de la Microscopía Electrónica de Barrido. Los resultados revelan aglomeración de vellosidades con disminución del espacio intervelloso, dilatación de capilares e hipertrofía de la vellosidad. Se notaron en las observaciones necrosis del trofoblasto y deposición de fibrina en la periferia de las vellosidades simultáneamente con fibrosis del estroma y necrosis de los vasos a medida que envejece el infarto. En algunos casos el borde periférico vellositario se rodea de fibrinoide, con células trofoblásticas proliferativas en él incluidas que posteriormente sufren necrosis. Los infartos más viejos contienen depósitos de fibrinoide que envuelven a vellosidades fantasmales que contienen gran cantidad de fibras colágenas. Estos resultados indican cambios isquémicos agudos y crónicos, mostrando una visión de conjunto tridimensional que expresan mejor las lesiones con una mayor profundidad de campo y superficie de análisis. Este nuevo aspecto morfológico detalla y extiende previas investigaciones revelando cambios degenerativos desde la fase hemorrágica hasta la colagenosis del estroma velloso

Cytoarchitectonic arrangement and intracortical circuits of hamster cerebellum. A study by means of confocal scanning laser microscopy

The FM4-64, a member of the family of fluorescent dyes, has been applied to the cerebellar cortex to study its cytoarchitectonic arrangement and intracortical course of mossy and climbing fibers. Slabs of hamster cerebellum, 1-2 mm thick, were incubated in 10, 30 and 100 microM solutions of FM4-64 in 0.1 M sodium phosphate buffer and observed in a slow scan confocal laser scanning microscope. Cellular tomography of cerebellar cortex allowed us to follow the course of mossy and climbing fibers in the cerebellar white and gray substance. They exhibited high fluorescence signal at the level of myelin sheath. Mossy fibers were identified only in the granular layer by their typical rosette formations and dichotomous bifurcation pattern. Climbing fiber bundles were observed crossing the granular layer and giving off collateral branches in the granular and molecular layers in a crossing-over pattern. They ascend to the Purkinje cell layer in their way to the molecular layer. Cerebellar macroneurons (Golgi and Purkinje cells) and microneurons (granule, basket and stellate cells) showed optimal intracellular staining of cell soma, axonal and proximal dendritic processes. The montage of z-series of stacked optodigital sections allowed us to explore in depth the cytoarchitectonic arrangement, nerve and glial cell morphology, and the topographic relationship of intrinsic cerebellar neurons with the afferent mossy and climbing fibers

Morfología de las calcificaciones placentarias: un estudio con el microscopio electrónico / Morphology of placental calcification: an study with electronic microscope

Regiones calcificadas de vellosidades placentarias procedentes de embarazos normales y anormales, a término, fueron analizadas para la identificación y observación tridimensional de depósitos de calcio. Zonas de microinfartos fueron seleccionadas con la microscopia estereoscópica, a las cuales se aplicó las técnicas de v.Kossa y de histología convencional. Areas similares fueron posteriormente procesadas con las técnicas de microscopia electrónica. Los hallazgos revelan la presencia de depósitos de calcio asociados íntimamente a las vellosidades que estan sufriendo degeneración. Estos depósitos se observaron en el estroma vellositario y en la superficie sincicial; empotradas en el sincicio o facilmente desprendibles de él. Dicha asociación produce una petrificación de las vellosidades, la cual confiere dureza y fragilidad a las zonas de infartación que al romperse, mediante la manipulación de las técnicas empleadas, producen fragmentos de diversas formas, Estos suelen ser irregulares, semejando trozos de anime, coral, escarcha o nieve. Varios autores han calificado los depósitos como de forma de manchas, placas o concreciones. Nuestros resultados expresan una visión de conjunto tridimensional más ddetallada, dada por la estereomicroscopia de luz y por la microscopia electrónica de barrido, asociada a la imagen convencional de secciones planas de la técnica de v.Kossa para calcio. En general, la forma en detalle de los depósitos se adapta o amolda a la superficie sobre la cual ocurre la sedimentación. En conclusión, nuestros resultados presentan una nueva y real imagen tridimensional del proceso de depósito del calcio en la placenta humana que nos indica cómo puede quedar interrumpida la transferencia de substancias a través de la barrera placentaria durante el proceso de la calcificación distrófica