ABSTRACT
O controle de formação de biofilme deve ser promovido por meio de técnicas diárias de higienização, sendo uma delas o uso de soluções de desinfecção. Dentre as soluções químicas comercialmente disponíveis, algumas podem ocasionar efeitos adversos quando utilizadas em longo prazo. Dessa forma, a busca por métodos alternativos de desinfecção, com soluções que não alterem as propriedades do material e que sejam inertes para o seu usuário torna-se essencial. Este estudo teve como objetivos: avaliar in vitro, a ação antifúngica de formulações de 5 mg/mL à base do óleo de citronela em biofilmes mistos de espécie de Candida em resina acrílica ativada termicamente (RAAT) para base protética por meio de contagem do número de unidades formadoras de colônias (UFC/mL), em dois tempos de exposição (15 e 30 minutos) e avaliar a citotoxicidade das formulações em células da linhagem epitelial HaCat, e verificar a ação destas formulações de citronela a 5 mg/mL na alteração de propriedades físicas e mecânicas de amostras de RAAT. Inicialmente, foram feitas as formulações à base de citronela em forma de emulsão e nanoemulsão. Em seguida, por meio de ensaios de microdiluição em caldo, foi obtida a concentração inibitória mínima (CIM) e concentração fungicida mínima (CFM) das cepas de Candida testadas. Foram confeccionadas amostras de RAAT para a realização dos ensaios, sendo 96 amostras para o ensaio de biofilme, divididas de acordo com os grupos: GI - controle negativo (Biofilme misto C. albicans ATCC + C. glabrata ATCC + C. albicans oral 6892 + C. albicans oral 7037); GII- Nanoemulsão de Citronela 5mg/mL; GIIIControle da Nanoemulsão (Tween 20); GIV- Emulsão de Citronela 5mg/mL; GV- Controle da Emulsão (Goma Xantana); GVI- Clorexidina 0,12% (Periogard), e 20 para o ensaio de viabilidade celular, divididas nos grupos: GI- Nanoemulsão de Citronela 5mg/mL; GII- Controle da Nanoemulsão (Tween 20); GIII- Emulsão de Citronela 5mg/mL; GIV- Controle da Emulsão (Goma Xantana); GV- Clorexidina 0,12% (Periogard). Biofilmes mistos de Candida foram formados sobre as superfícies das amostras, e foram quantificados por meio de contagem de unidades formadoras de colônias (UFCs). Para o teste de viabilidade celular utilizou-se células epiteliais da linhagem HaCaT, avaliadas através da coloração com resazurina. Para avaliação das propriedades físicas e mecânicas foram confeccionadas 50 amostras retangulares e 50 circulares de RAAT, separadas aleatoriamente em 5 grupos, de acordo com a formulação utilizada: GI controle (água destilada); GII saliva artificial; GIII nanoemulsão de citronela a 5mg/mL; GIV - emulsão de citronela a 5mg/mL e GV - Clorexidina 0,12% (Periogard). As amostras foram imersas nas respectivas formulações, simulando a desinfecção de próteses dentarias pelo período de 30 minutos diários, durante 6 meses. Após este período, foi feita a análise da alteração de rugosidade de superfície (Ra - µm), estabilidade de cor (CIEDE 2000), avaliação da microdureza Knoop e resistência a flexão (MPa) das amostras. Os dados obtidos foram submetidos às análises estatísticas (p< 0,05). As formulações fitoterápicas à base de citronela apresentaram valores de CIM e CFM que variaram entre 0,156-1 mg/mL sobre as espécies de Candida e inibiram o crescimento do biofilme misto, apresentando uma redução estatisticamente significativa na contagem de UFC/mL, de até 2,7 Log destes fungos, principalmente quando submetidas ao tempo de exposição de 30 minutos. As formulações fitoterápicas testadas não apresentaram diferenças estatísticas entre si, apresentando viabilidade da célula HaCaT maior que 70%, diferentemente da clorexidina a 0,12%. Não houve diferença nos valores médios de rugosidade de superfície em nenhum dos grupos após serem submetidos à imersão nas formulações testes, com exceção do grupo controle, que apresentou diferença estatística significativa na rugosidade de superfície após o período de imersão. Nos valores de alteraçaÌo de cor (ΔE00) foi possível observar que não houve diferença estatística significativa entre os grupos experimentais antes e após serem submetidos a imersão nas formulações testes. Nos valores de microdureza Knoop houve diferença estatística significativa apenas entre o grupo controle e o grupo emulsão de citronela. Para os dados de resistência flexural, módulo de elasticidade, força máxima e alongamento não houve diferença estatística significativa entre os grupos após imersão. Em suma, concluiu-se que as formulações fitoterápicas à base de citronela apresentaram efeito antifúngico sobre as diferentes espécies de Candida em superfície de resina acrílica para próteses dentárias, não apresentaram efeito citotóxico sobre células da linhagem epitelial, e se mostraram seguras como formulações antissépticas no que se refere às propriedades físicas e mecânicas estudadas, sendo potencialmente promissoras para serem indicadas como soluções desinfetantes para próteses dentárias(AU)
The control of biofilm formation should be promoted through daily hygiene techniques such as the use of disinfection solutions. Among the commercially available chemical solutions, some can lead to adverse effects in long-term use. Thus, the search for alternative methods of disinfection with solutions that do not interfere with properties of the material and those inert to the user becomes essential. This study aimed to: evaluate, in vitro, the antifungal effect of 5 mg/mL formulations based on citronella oil on mixed biofilms of Candida species in thermally activated acrylic resin (TAAR) for prosthetic base by counting the number of colony forming units (CFU/mL), in two exposure times (15 and 30 minutes) and to evaluate the cytotoxicity of the formulations in cells of the HaCat epithelial lineage, and to verify the action of these formulations of citronella at 5 mg/mL in the alteration of physical and mechanical properties of TAAR samples. Initially, citronella-based formulations were prepared as emulsion and nanoemulsion. Then, by means of broth microdilution assays, the minimum inhibitory concentration (MIC) and minimum fungicidal concentration (MFC) of the tested Candida strains were obtained. For the biofilm test, 96 TAAR samples were prepared and assigned to the groups, as follows: GI - negative control (Mixed biofilm C. albicans ATCC + C. glabrata ATCC + C. albicans oral 6892 + C. albicans oral 7037); GII- Citronella Nanoemulsion 5mg/mL; GIII- Nanoemulsion Control (Tween 20); GIV- Citronella Emulsion 5mg/mL; GVEmulsion Control (Xanthan Gum); GVI- Chlorhexidine 0,12% (Periogard). For the cell viability assay, 20 samples were prepared and assigned to the following groups: GI- Citronella Nanoemulsion 5mg/mL; GII- Nanoemulsion Control (Tween 20); GIII- Citronella Emulsion 5mg/mL; GIV- Emulsion Control (Xanthan Gum); GV- Chlorhexidine 0,12% (Periogard). Mixed Candida biofilms were formed on the surfaces of the samples, and were quantified by counting colony forming units (CFUs). For the cell viability test, epithelial cells of the HaCaT lineage were used, evaluated by staining with resazurin. To evaluate the physical and mechanical properties, 50 rectangular and 50 circular samples of TAAR were prepared and randomly assigned into 5 groups, according to the formulation used: GI control (distilled water); GII artificial saliva; GIII citronella nanoemulsion at 5mg/mL; GIV citronella emulsion at 5mg/mL and GV chlorhexidine 0,12% (Periogard). The samples were immersed in the respective formulations, simulating the disinfection of dental prostheses for a period of 30 minutes daily, for 6 months. After this period, the analysis of surface roughness change (Ra - µm), color stability (CIEDE 2000), evaluation of Knoop microhardness and flexural strength (MPa) of the samples was performed. The data obtained were submitted to statistical analysis (p< 0,05). The phytotherapic formulations based on citronella presented MIC and MFC values that varied between 0,156-1 mg/mL on Candida species and inhibited the growth of mixed biofilm, showing a statistically significant reduction in the CFU/mL counts, up to 2,7 Log of these fungi, mainly when subjected to an exposure time of 30 minutes. The phytotherapic formulations tested did not show statistical differences between them, showing HaCaT cell viability greater than 70%, unlike 0,12% chlorhexidine. There was no difference in the mean values of surface roughness in any of the groups after being subjected to immersion in the test formulations, except for the control group, that presented a statistically significant difference in surface roughness after the immersion period. Regarding color change (ΔE00) it was possible to observe that there was no statistically significant difference between the experimental groups before and after being subjected to immersion in the test formulations. In the Knoop microhardness values, there was a statistically significant difference only between the control group and the citronella emulsion group. For data on flexural strength, modulus of elasticity, maximum force and stretching, there was no statistically significant difference between the groups after immersion. In summary, it can be concluded that phytotherapic formulations based on citronella had an antifungal effect on different Candida species on acrylic resin surfaces for dental prostheses, besides not presenting a cytotoxic effect on cells of the epithelial lineage, and proved to be safe as antiseptic formulations in the which refers to the physical and mechanical properties studied, being potentially promising to be indicated as disinfectant solutions for dental prostheses(AU)
Subject(s)
Candida albicans , Candida glabrata , Cymbopogon , Stomatitis, DentureABSTRACT
ABSTRACT Objective: This study aimed to evaluate the dimensional stability and maintenance of details of conventional and high stability alginates up to 5-day storage. Methods: Two types of alginates were selected (n=10) for this study, conventional (Hydrogum) and high stability alginates (Hydrogum 5), which were produced with the aid of a cylindrical metal block and a ring-shaped metal mold (Specifications 18, 19, and 25, ANSI/ADA). Ten images were obtained from the molds for the dimensional stability test, which were taken immediately after their production and at each different storage periods (15 min, 24 h, 48 h, 72 h, 96 h, and 120 h) by a digital camera. The specimens were kept hermetically sealed in plastic bags (23°C) and then used to obtain 140 (n=70) dental stone models, used in the detail reproduction test, in which the angular accuracy of three grooves (20 µm, 50 µm, and 75 µm) was observed at each period. The details reproduction accuracy was classified using a predetermined score classification. Measurements of dimensional changes were made in the Corel DRAW X6 program. The data were submitted to the Student's t-test (α?#8197;= 0.05). Results: A statistically significant difference concerning the size of the matrix was observed after 24h for both alginates, and a statistically significant negative linear dimensional change (contraction) was verified after 24 h of storage (1.52% for the high stability alginate, and 1.32% for the conventional alginate). The high stability alginate kept the full details for 72 hours, while the conventional alginate, for 24 h. Both alginates reproduced the 75 µm groove at all storage periods. Conclusion: Impressions made with both alginates presented satisfactory clinical results when the alginates were immediately poured.
RESUMO Objetivo: O presente estudo teve como objetivo avaliar a estabilidade dimensional e manutenção de detalhes de alginatos convencionais e de alta estabilidade por até 5 dias de armazenamento. Métodos: Para esse estudo, foram selecionados dois tipos de alginatos: convencional (Hydrogum) (n = 10) e de alta estabilidade (Hydrogum 5) (n = 10), sendo produzidos com o auxílio de um bloco metálico cilíndrico e um molde metálico em forma de anel (especificações 18, 19 e 25, ANSI/ADA). Para o teste de estabilidade dimensional, dez imagens foram obtidas imediatamente e para cada tempo de armazenamento (15 min, 24, 48, 72, 96 e 120 horas), realizadas por câmera digital. As amostras foram mantidas hermeticamente fechadas em sacos plásticos (23°C). Para o teste de reprodução de detalhes, as amostras foram utilizadas para obter 140 (n = 70 por grupo) modelos de gesso, sendo observada a precisão angular de três sulcos (20 µm, 50 µm e 75 µm) para cada período. A precisão da reprodução de detalhes foi classificada usando uma classificação de pontuação predeterminada. As medições das mudanças dimensionais foram feitas no programa Corel DRAW X6. Os dados foram submetidos ao teste t de Student (α = 0,05). Resultados: Foi observada diferença estatística em relação à matriz após 24h para ambos os alginatos. Uma mudança dimensional linear negativa estatisticamente significativa (contração) foi verificada após 24 h de armazenamento (1,52% para alginato de alta estabilidade; 1,32% para alginato convencional). O alginato de alta estabilidade manteve os detalhes completos por até 72 horas, enquanto o alginato convencional, por 24 horas. Os alginatos reproduziram o sulco de 75 µm para todos os períodos. Conclusão: As impressões feitas com ambos os alginatos devem ser imediatamente vazadas para se ter resultados clínicos satisfatórios.