Antinociceptive effect on mice of the hydroalcoholic fraction and (-) epicatechin obtained from Combretum leprosum Mart & Eich

Previous studies on Combretum leprosum, a tree growing in the Northeastern states of Brazil, have shown antinociceptive effects of the ethanol extract of its leaves and bark, but studies examining its constituents are rare. The objective of this study was to evaluate the antinociceptive effect of the hydroalcoholic fraction (HF) of one of its constituents, the flavonoid (-) epicatechin (EPI), administered orally to mice (20-30 g) in models of chemical nociception, and the possible mechanisms involved. Different doses of HF (62.5 to 500 mg/kg) and EPI (12.5 to 50 mg/kg) were evaluated in models of abdominal writhing, glutamate, capsaicin, and formalin in animals pretreated with different antagonists: naloxone, ondansetron, yohimbine, ketanserin, pindolol, atropine, and caffeine in the abdominal writhing test. To determine the role of nitric oxide, the animals were pretreated with L-arginine (600 mg/kg, ip) in the glutamate test. The HF was effective (P < 0.05) in all protocols at different doses and EPI was effective in the abdominal writhing, capsaicin and glutamate tests (P < 0.05) at doses of 25 and 50 mg/kg. However, in the formalin test it was only effective in the second phase at a dose of 25 mg/kg. The antinociceptive effect of HF was inhibited when HF was associated with yohimbine (0.15 mg/kg), ketanserine (0.03 mg/kg), and L-arginine (600 mg/kg), but not with the other antagonists. HF and EPI were effective in models of chemical nociception, with the suggested participation of the adrenergic, serotonergic and nitrergic systems in the antinociceptive effect of HF.

Identificação de diterpenos clerodânicos em diferentes órgãos de Casearia sylvestris Swartz / Identification of clerodane diterpenes in different organs of Casearia sylvestris Swartz

Casearia sylvestris Swartz (Salicaceae) é uma espécie vegetal arbórea ou arbustiva, disseminada pelo território brasileiro e bastante utilizada em nossa medicina popular. Diversos diterpenos clerodânicos bioativos típicos do gênero Casearia foram isolados desta espécie (ex. casearinas e casearvestrinas). O objetivo principal deste trabalho foi avaliar a presença de diterpenos clerodânicos em diferentes órgãos de C. sylvestris, utilizando técnicas analíticas cromatográficas e espectroscópicas. Os extratos dos diferentes órgãos foram analisados por cromatografia em camada delgada, cromatografia líquida de alta eficiência com detector de arranjo de diodos e ressonância magnética nuclear de 1H. Nas análises cromatográficas foram utilizados diterpenos clerodânicos isolados de C. sylvestris como padrões, incluindo rel-19S-acetóxi- 18R- butanoilóxi- 18,19- epóxi -6S -hidróxi -2R- (2-metilbutanoilóxi) -5S, 8R, 9R, 10S -cleroda-3,13(16),14-trieno, isolado do caule pela primeira vez. Foram obtidos perfis fitoquímicos dos órgãos avaliados. Os resultados indicaram a presença de diterpenos clerodânicos em toda planta, prevalecendo em maior número nas folhas. Além disso, os resultados também indicam que em caules, flores e raízes há predomínio de diterpenos clerodânicos com padrão diênico diferente daqueles obtidos de folhas de C. sylvestris.

Casearia sylvestris Swartz (Salicaceae) is a tree or shrub distributed widely in Brazil, where it is used in popular medicine. Several bioactive clerodane diterpenes typical of Casearia have been isolated from this species (e.g. casearins and casearvestrins). The main objective of this study was to identify clerodane diterpenes in various organs of C. sylvestris, using chromatographic and spectroscopic analytical techniques. The extracts of the different plant parts were analyzed by thin layer chromatography, high performance liquid chromatography with diode array detector and 1H nuclear magnetic resonance. In the chromatographic analysis, clerodane diterpenes isolated from C. sylvestris were used as standards, including rel-19Sacetóxi- 18R- butanoilóxi-18,19- epóxi -6S -hidróxi -2R- (2-metilbutanoilóxi) -5S, 8R, 9R, 10S -cleroda-3,13(16),14- triene, isolated for the first time from the stems. Phytochemical profiles of the organs were produced, which indicated the presence of clerodane diterpenes in all parts of the plant, notably in the leaves. The results also suggest that the main clerodane diterpenes in the stems, flowers and roots had conjugated double-bond patterns that differed from those found in the leaves.

Cryptomoscatona D2 de Cryptocarya mandioccana: atividade citotóxica contra linhagem celular de carcinoma cervical humano / Cryptomoschatone D2 from Cryptocarya mandioccana: cytotoxicity against human cervical carcinoma cell lines

Among the substances isolated from Cryptocarya sp, some styrylpyrones, such as goniothalamin, demonstrate antiproliferative activity in a broad range of human cell lines. In the present study, we assessed the cytotoxicity of a styrylpyrone (cryptomoschatone D2), isolated from Cryptocarya mandiocanna, in HPV-infected (HeLa and SiHa) and uninfected (C33A) human cervical carcinoma cell lines and a human lung fibroblast line (MRC-5). The cytotoxicity was tested by the MTT assay. In this assay, cells were treated with cryptomoschatone D2 at 15, 30, 60 or 90 ?M for 6, 24 or 48 hours, as well as for 6 hours followed by a post-treatment recovery period of 24, 48 or 72 hours. High cytotoxicity (dose- and timedependent) was observed in HeLa, SiHa, C33A and MRC-5 cell lines. Although in general the styrylpyrone cytotoxicity was not significantly different among the cell lines tested, it was apparently stronger in HeLa and C33A than in MRC-5 and SiHa in the 24 or 48-hour treatments. Moreover, HeLa and SiHa were able to recover their ability to proliferate, in direct proportion to the post-treatment recovery time. On the other hand, C33A did not demonstrate a similar post-treatment recovery. We can conclude that cryptomoschatone D2 possesses high dose-dependent or time-dependent cytotoxicity.

Dentre as substâncias isoladas de Cryptocarya sp, algumas estirilpironas, como a goniotalamina, apresentam atividade antiproliferativa em diferentes linhagens celulares. No presente estudo, foram avaliadas as atividades citotóxica de uma estirilpirona (criptomoscatona D2) isolada de Cryptocarya mandiocanna, em linhagens celulares de carcinoma cervical humano infectada por HPV (HeLa e SiHa), não infectada (C33A) e fibroblasto pulmonar humano (MRC-5). A atividade citotóxica foi avaliada pelo ensaio do MTT. No ensaio do MTT, as células foram tratadas com criptomoscatona D2 em 15, 30, 60 e 90 ?M por 6, 24 e 48 horas e por 6 horas com período de recuperação de 24, 48 e 72 horas pós-tratamento. O tratamento com a estirilpirona (criptomoscatona D2) ocasionou elevada citotoxicidade dose-resposta e tempo-resposta em HeLa, SiHa, C33A e MRC-5. Embora não haja diferença estatisticamente significativa de citotoxicidade entre as linhagens, aparentemente a citotoxicidade foi maior em HeLa e C33A (tratamento de 24 e 48 horas) que em MRC-5 e SiHa. Ainda, no período de recuperação, HeLa e SiHa aparentemente restabelecem sua capacidade proliferativa, que é diretamente proporcional ao tempo de recuperação, enquanto o mesmo comportamento não é observado em C33A. Estes resultados sugerem que criptomoscatona D2 possui elevada atividade antiproliferativa dose-resposta ou o tempo resposta.

Caracterização biométrica e química da folha de Mentha pulegium x spicata (Lamiaceae) / Biometric and chemical characterization of Mentha pulegium x spicata (lamiaceae) leaves

O híbrido Mentha pulegium x spicata, também conhecido como poejo de praia, é uma planta perene, rasteira, ramosa, com caule arroxeado, folhas opostas, lanceoladas e serreadas no bordo, apresentando odor característico. O objetivo do presente trabalho foi realizar um estudo da anatomia foliar, incluindo um estudo de biometria tecidual e análise quantitativa de tricomas secretores/mm2 e de estômatos/mm2 em ambas as faces da folha, além de uma análise química do óleo essencial. Foram efetuadas lâminas permanentes para análise anatômica do limbo foliar e também lâminas da impressão foliar para a contagem do número de tricomas e estômatos. A análise química foi efetuada através da extração do óleo essencial por arraste à vapor d'água e analisado por CG-EM. Os tricomas capitados e peltados estão presentes em ambas as faces da folha, porém predominam na superfície abaxial. A análise de variância mostrou que há diferenças significativas para o número de tricomas capitados e tectores entre as superfícies adaxial e abaxial, mas não são significativas para o tricoma peltado. O óleo essencial analisado, mostra a presença do componente majoritário, trans-epóxido de piperitona, responsável por mais de 80% da composição relativa no óleo bruto