Estudio comparativo de dos métodos para la cuantificación del antígeno carcinoembrionario / Comparative study of two methods for carcinoembryonic antigen quantification / Estudo comparativo de dois métodos para a quantificação do antígeno carcinoembrionário

El antígeno carcinoembrionario (CEA) es una glicoproteína ampliamente utilizada como complemento del diagnóstico, monitoreo de tratamiento y evolución del cáncer colorrectal. El objetivo del presente trabajo fue realizar un análisis comparativo entre dos métodos para la determinación de CEA: electroquimioluminiscencia y quimioluminiscencia, en muestras de suero de 57 pacientes con diagnóstico de cáncer, principalmente colorrectal. Cuando se analizaron los datos totales se obtuvo una elevada correlación (r=0,9135, p<0,00001). Al realizar un corte de los resultados tomando como límite el valor de 4 ng/mL se observó que las mayores discrepancias entre métodos estuvieron en los valores considerados dentro del rango normal (r=0,5716, p<0,0014, n=29). Por el contrario, en concentraciones mayores al límite de corte, la correlación fue elevada (r=0,9453, p<0,00001, n=28). Estos resultados sugieren que, a diferencia de lo descripto por los fabricantes, los valores de CEA obtenidos por ambos métodos son comparables. La menor correlación observada en concentraciones inferiores a 4 ng/mL no sería tan relevante debido a que estos niveles se consideran dentro del rango de normalidad y, por lo tanto, su importancia desde el punto de vista clínico es relativa. Sin embargo, debido a que pueden detectarse con baja frecuencia diferencias individuales (atribuidas probablemente a diferencias en los epitopes detectados por cada método), para los casos con fuerte presunción clínica y un valor de CEA incongruente, se sugiere repetir la determinación por medio de otra metodología.

The carcinoembryonic antigen (CEA) is a glycoprotein widely employed in colorectal cancer, mainly as evolutive marker and as measure of therapy's ef-ficacy. The goal of this work was to perform a comparative study between two analytical methods to measure serum CEA levels: electrochemiluminescence (ECL) and chemilumines-cence (CL) in serum samples of 57 patients with diagnosis of cancer, mainly colorectal. On the whole, an elevated correlation between ECL and CL (r=0.9135; p<0.00001) was obtained. When data was analyzed with a cut-off value of 4 ng/mL, the main discrepancy between methods occurred in the range of normal values (r=0.5716; p<0.0014; n=29). On the contrary, in concentrations higher than the cut-off, the cor-relation was very high (r=0.9453; p<0.00001; n=28). These results suggest that, in spite of the reports of manufacturers, the CEA values obtained by both methods are comparable. The lower correlation observed in values below 4 ng/mL would not be significant because those values are in the normal range and, for that reason, their clinical importance is minor. However, due to the individual differences that could be detected in some patients (probably resulting from the differences in epitopes detected by each method), in cases with strong clinical evidence without concordance with the CEA result, it could be necessary to repeat the determination using another methodology.

O antígeno carcinoembrionário (CEA) é uma glicoproteína amplamente usada como complemento do diagnóstico, monitoração de tratamento e evolução do câncer colorretal. O objetivo deste trabalho foi realizar uma análise comparativa entre dois métodos para a detecção do CEA: eletroquimioluminescência e quimio-luminescência em amostras de soro de 57 pacientes com diagnóstico de câncer, principalmente colorretal. Quando analisados os dados totais, houve uma correlação elevada (r=0,9135, p<0,00001). Quando realizado um corte dos resultados tomando como valor limite 4 ng/mL, observou-se que as maiores diferenças entre ambos os métodos estiveram nos valores considerados dentro da faixa dos valores normais (r=0,5716, p<0,0014, n=29). No entanto, nas concentrações superiores respeito do limite de corte, a correlação foi elevada (r=0,9453, p<0,00001, n=28). Estes resultados sugerem que, comparado com o descrito pelos fabricantes, os valores de CEA obtidos por ambos os métodos são comparáveis. A menor correlação observada nas concentrações inferiores a 4 ng/mL não seria tão relevante devido a que estes níveis consideram-se dentro da faixa de normalidade e, portanto, sua importância, do ponto de vista clínico, é relativa. Contudo, devido a que podem ser detectados com baixa frequência diferenças individuais (atribuídas provavelmente a diferenças nos epitopos detectados por cada método), para os casos com forte suspeita clínica e um valor de CEA incongruente, sugere-se repetir a determinação através de outra metodologia.

Vaccination with live epimastigotes of Trypanosoma rangeli protects mice against Trypanosoma cruzi lethal infection

Trypanosoma cruzi and Trypanosoma rangeli share geographical areas, vectors and hosts. Although both parasites are antigenically similar, T. rangeli is not pathogenic for humans. In consequence, T. rangeli have been experimentally employed as immunogen to protect against T. cruzi infection. The aim of this work was to analyze the evolution of T. cruzi infection in mice previously vaccinated with live epimastigotes of T. rangeli obtained from cultures, and to measure TNF-alfa, IL12 and IL-18 productions. The evolution of the T. cruzi (Tulahuen strain) infection was evaluated by parasitemia levels, survival of Balb/c mice, tissue lesions and/or the presence of parasites. Cytokine levels were measured by an immuno-enzyme assay technique. The mice that were not vaccinated, died in the acute stage of infection with high parasitemias, nests of amastigotes and inflamatory foci in heart and skeletal muscle tissues, associated with high TNF-alfa levels. On the order hand, mice that were previously infected with T. rangeli, survived the acute stage of T. cruzi infection with low TNF-alfa level and high IL-18 level. In conclusion, this work describes a new model of immunization with T. rangeli associated with resistance to T. cruzi infection with modulation of proinflammatory TNF-alfa and increased IL-18 serum level.

Enfermedad de Chagas crónica: efectos del tratamiento en los niveles de anticuerpos hacia antígenos crudos y semipurificados del trypanosoma cruzi / Chagas chronic disease: effects of treatment in antibodies levels to crude and partially purified trypanosoma cruzi antigens

The specific therapy in chagas' disease is useful in acute and neonatal infection and in children under three years old. The results of antiparasitic treatment during chronic infection are still controversial. It will be interesting to analyze the serological behavior in patients treated during chronic infection, to advance in the search of evolutive markers and markers of therapeutic efficacy. In the present work we have measured the antibody response by conventional serology and the response to partially purified T. cruzi antigens in chagasic patients who received nifurtimox or benznidazol 2 to 20 years before. The results showed that, by indirect immunofluorescence in 20 percent of treated patients the antibody levels were below the established cut off (1:32). By indirect hemagglutination 55 percent of treated patients showed this serological behavior. In this group a high number of discordant results was observed. By immunoenzimatic assay it was possible to detect a significative decrease of serologic reactivity to a partially purified acidic antigen (F IV) and to exoantigen of T. cruzi. It will be interesting to perform longitudinal surveys employing these antigens, to go further in the knowledge of possible immunological evolutive markers in Chagasïdisease

Enfermedad de Chagas: reactividad serologica hacia antigenos crudos y semipurificados del T. Cruzi en distintos grupos clinicos de pacientes / Chagas disease: serologic response to crude and semipurified T. cruzi antigens in different clinical groups of patients

La respuesta inmune de los infectados chagásicos difere cualitativa y cuantivamente segün el estadio de la enfermedad. La medición con fines clínicos de estas diferencias depende de la posibilidad de contar con preparaciones antigénicas adecuadas. Con el objeto de avanzar en este sentido, se estudió el comportamiento de distintos antígenos (Ag) del T. cruzi en pacientes chagásicos agudos y crónicos perttencientes a los grupos O (GO) y 1 (G1). Se midió el nivel de anticuerpos (Ac) totales por sorología convencional (hemaglutinación e inmunofluorescencia (IF)), y por enzimoinmunoanálisis, los títulos de Ac contra el extracto crudo de formas epimastigotes del parásito (F 105) y contra una fracción semipurificada por cromatoenfocado analítico (F IV). En los pacientes agudos se observó mediante la reccion de ELISA con F 105, un 60 por ciento de resultados positivos, mientras que la serología convencional reveló un alto porcentaje de sueros con ambas reacciones negativas (61 por ciento) y 35 por ciento de discordantes. Luego del tratamiento antiparasitario en los pacientes agudos, hubo una disminución en los títulos de Ac hacia cualquiera de los Ag estudiados. En los pacientes crónicos los resultados mostraron una tendencia de los individuos de G1 a presentar mayores títulos de Ac tanto por IF frente al parásito total, como por enzimoinmunoálisis (ELISA) frente a la facción F IV, con respecto a los del GO. Esta tendencia fue más evidente cuando se combinaron los resultados de ambas técnicas. En efecto, el 22 por ciento de los sueros del G1 presentaron títulos por IF = 1: 128, e índices por ELISA = 3,5, mientras que sólo el 2 por ciento de los sueros del GO presentó esta característica. Niveles más bajos no permitieron discriminar poblaciones. La conjugación de los métodos tradicionales con la utilización de técnicas que empleen antígenos purificados o sintéticos puede resultar en una mejora en la calidad y en la utilidad del inmunodiagnóstico.