Células-tronco mesenquimais aplicadas nas fases inflamatória e proliferativa da cicatrização de feridas cutâneas / Mesenchymal stem cells applied to the inflammatory and proliferative phases of wound healing

A cicatrização de feridas é um processo que requer a interação de várias células da derme e epiderme. O objetivo deste trabalho foi avaliar qual o momento da aplicação das células das ADSCs em feridas cutâneas agudas que faria diferença na cicatrização nos primeiros sete dias da lesão. As células-tronco foram isoladas do tecido adiposo de camundongos C57Bl/6 GFP+. Para tanto, foram utilizados 49 camundongos C57Bl/6, divididos em quatro grupos: grupo I (GI/controle; n=14); grupo II (GII; n=14): ADSCs injetadas no d0; grupo III (GIII; n=14): ADSCs injetadas no terceiro dia; e Grupo IV (GIV; n=7): ADSCs injetadas no quinto dia. As avaliações clínicas ocorreram nos dias zero, três, cinco e sete, e as histopatológicas nos dias cinco e sete. Na metodologia proposta, foi observado que o uso de ADSCs aumenta a vascularização, a formação de tecido de granulação, a colagenização e incrementa o número de folículos pilosos em apenas sete dias de avaliação. Além disso, o momento da aplicação das células não repercutiu diferenças significativas nas fases inflamatória e proliferativa do processo de cicatrização das feridas cutâneas.(AU)

Wound healing is a process that requires the interaction of various cells in the dermis and epidermis. The aim of this study was to evaluate the action of ADSCs in the treatment of acute wounds in order to understand if application time of the cells results in a difference in healing the first seven days of injury. The stem cells were isolated from adipose tissue of C57BL / 6 mice GFP +. Thus, we used 49 mice C57BL / 6 divided into four groups: Group I (GI / control, n=14); Group II (GII; n=14): ADSCs injected to the d0; Group III (GIII; n=14): ADSCs injected on the 3rd day, and Group IV (GIV; n=7): ADSCs injected day 5(d5). Clinical evaluations were performed on days 0, 3, 5 and 7 and the histopathology on days 5 and 7. In the proposed methodology, the use of ADSCs increased vascularization, formation of granulation tissue, collagen deposition and increases the number of hair follicles in just seven days of evaluation. In addition, the time of application of the cells did not affect significant differences in the inflammatory and the proliferative phase of wound healing skin.(AU)

Transrectal endoscopy with three different techniques of rectal suture associate: NOTES survival study with liver biopsy in a swine model / Endoscopia transretal para biópsia hepática associada com três diferentes técnicas de sutura retal: estudo da NOTES em modelo experimental suíno

A cirurgia endoscópica por orifícios naturais (NOTES) representa um novo conceito de cirurgia, caracterizada por ausência de incisões abdominais. Os acessos mais comumente usados são o transvaginal e o transgástrico. Entretanto, as rotas transcolônica e transretal representam alternativas promissoras. O presente estudo objetiva avaliar três diferentes técnicas de sutura retal em três suínos submetidos a NOTES transretal para biópsia hepática, avaliando-se concomitantemente as repercussões clínicas e hematológicas. Sob anestesia geral, foi realizada uma incisão transversal no reto para a passagem do endoscópio até a cavidade abdominal em todos os animais para a realização da biópsia hepática. Cada animal recebeu um tipo de sutura retal: sutura em dois planos; reforço com tela de polipropileno ou reforço com membrana de pericárdio bovino. A NOTES transretal em modelo experimental suíno não apresentou implicações clínicas e hematológicas importantes, o que demonstra um acesso alternativo para biópsia hepática. Nenhum animal apresentou sinais de peritonite, aderências ou deiscência de pontos. O uso de reforço com pericárdio bovino para a sutura retal apresenta um atraso na cicatrização quando comparado com a sutura convencional ou com o uso de tela de polipropileno.(AU)

Recombinant expression and purification of the bovine acidic Seminal Fluid Protein

The acidic Seminal Fluid Protein (aSFP), a 12.9 kDa protein is a maker for bovine semen freezability possibly due to its antioxidant activity and effect on sperm mitochondrial function. However, its precise function on sperm preservation during freezing thaw is poorly understood. The use of recombinant DNA technology allows new approaches on the study of function and structure of proteins, and its production in procaryote systems offers several advantages. The present work describes the recombinant expression of the bovine aSFP and its binding properties. A cDNA library from the bovine seminal vesicle was used as template for amplification of the aSFP coding region. The amplicon was cloned into a pET23a (+) vector and transformed into E.coli BL21 pLysS strain. The recombinant expression was obtained in E coli. One step ion immobilized affinity chromatography was performed, resulting in high yield of purified protein. To determine the bioactivity of the r aSFP, the protein was incubated in different concentrations with 10 7 spermtozoa at 37°C for 5 h. Western blotting and fluorescence microscopy analyses showed the ability of the recombinant aSFP to attach to the spermatozoa. Based on our results, the described method can be used to obtain mg levels of recombinant aSFP.

Bone regeneration in mandible defect with autograft bone and cell suspension from bone marrow in rabbits / Regeneração óssea em defeitos mandibulares com auto-enxerto ósseo e suspensão celular da medula óssea em coelhos

The objective of this study was to investigate the bone regeneration of a "gold standard" (autograft) from iliac crest associated with cellular therapy in rabbits. A bone defect was created with 10x5x5mm in 28 rabbit mandibles. The control group animals (n=14) were repaired with autograft of iliac crest and the experimental group animals (n=14) received iliac crest autograft in association with mononuclear cells from the bone marrow of the femur. Weekly radiographs were taken of the surgery region and histological analyses was performed in seven animals in each group at 15 days and in seven animals of each group at 30 days after the surgery. A gradual increase of bone density was observed and the experimental animals presented the bone bridge in 85.7 percent (6/7) of the cases, while only 42.8 percent (3/7) of the animals in the control group presented this structure 28 days after the surgery. The histopathological parameters analyzed did not show any statistical difference between the control and experimental group in 15 and 30 days of analysis. The results suggest that the mononuclear cells from the marrow bone can better support the autograft regeneration in mandible defects in rabbits.

Avaliou-se a regeneração óssea de auto-enxerto, considerado "padrão ouro" da crista ilíaca associado à terapia celular da medula óssea em coelhos. Foi criado um defeito ósseo de 10x5x5mm na mandíbula de 28 coelhos, distribuídos em grupo-controle com, 14 animais, reparados com auto-enxerto de crista ilíaca, e grupo experimental com, 14 animais, em que o auto-enxerto foi associado a células mononucleares da medula óssea autógena do fêmur. Foram realizadas radiografias semanais da região operada e análise histológica em sete animais de cada grupo aos 15 e em sete de cada grupo aos 30 dias do pós-operatório. Houve aumento gradativo da densidade óssea, e 85,7 por cento (6/7) dos animais do grupo experimental e 42,8 por cento (3/7) do grupo-controle apresentaram formação de ponte óssea 28 dias após a cirurgia. Na análise histopatológica aos 15 dias, os enxertos foram facilmente visualizados e a atividade das células fagocitárias foi intensa. Já aos 30 dias, a visualização foi mais difícil e, quando possível, apenas um resquício foi visualizado. Os resultados sugerem que a adição de células mononucleares da medula óssea favorece a regeneração do auto-enxerto em defeitos mandibulares de coelhos.