ABSTRACT
Modulação do potencial de membrana celular endógeno por um campo elétrico externo influencia a estrutura e função dos compartimentos da membrana, de suas proteínas e da bi-camada lipídica. Neste trabalho, os efeitos da aplicação de potencial no crescimento de Saccharomyces cerevisiae foram caracterizados por experimentos simples, mas conclusivos. O perfil temporal de crescimento celular e a divisão celular foram investigados como respostas macroscópicas ao estímulo elétrico. Experimentos controle foram conduzidos em condições idênticas, exceto pela ausência de potencial aplicado. Através de análise comparativa, verificou-se que o estímulo elétrico alterou o ciclo celular como foi possível observar através da medida da dispersão de tamanho celular de cada população, sugerindo um possível sincronismo na divisão celular. Análise do espectro de potência foi empregada para sustentar o aumento no sincronismo, e uma modelagem matemática foi conduzida para determinar mudanças na cinética de crescimento celular. Parâmetros cinéticos do modelo tipo Monod para crescimento foram determinados por regressão não-linear. A constante de afinidade (a saber, KS) apresentou uma dependência com o potencial aplicado, sugerindo mudanças no transporte através da membrana celular. Verificou-se, também, que o estresse promovido eletroquimicamente inibiu o crescimento e induziu mudanças na viabilidade celular.
Subject(s)
Cell Cycle , In Vitro Techniques , Saccharomyces cerevisiae , Cell Membrane , Cell Survival , Electric StimulationABSTRACT
A poligalacturonase produzida em cultura semi sólida de Aspergillus niger 3T5B8 foi purificada usando fracionamento por adiçäo de sal (salting out), diálise e cromatografia de gel-filtraçäo. A adiçäo de sulfato de amônio em diferentes níveis de saturaçäo apresentaram um compromisso entre purificaçäo e recuperaçäo da atividade enzimática. A cromatografia por gel-filtraç o forneceu bons resultados quando azida de sódio foi utilizada nos tampöes de eluiçäo, diminuindo as perdas na atividade enzimática em 14 por cento. O peso molecular determinado para esta poligalacturonase foi de 34700 daltons