Enterotoxin genes, multidrug resistance, and molecular typing of Staphylococcus spp. isolated from organic bovine milk / Genes de enterotoxinas, multirresistência a antimicrobianos e caracterização molecular de espécies de Staphylococcus spp. isoladas de leite bovino orgânico

The multidrug resistant and the emergence of methicillin-resistant staphylococci isolated from animals, food, and humans are public health concern. These microorganisms produce different toxins related to food poisoning in humans. This study aimed to characterize Staphylococcus spp. isolated from two organic milk farms in Brazil. A total of 259 milk samples were collected, from which 58 (22.4%) Staphylococcus spp. were isolated. The highest sensibility to ceftiofur and sulfamethoxazole/trimethoprim was observed in 96.6% of Staphylococcus spp., and whereas 89% were resistant to penicillin G. The mecA gene was detected in 13.8% of the isolates. SEA and SEC were the most common enterotoxins detected. PFGE revealed genetic heterogeneity from S. intermedius and S. warneri analyzed, while S. aureus presented similar profiles among isolates from the two studied herds. To the best of our knowledge, the current study describes for the first time presence of enterotoxins, mecA gene, and genetic diversity of staphylococci isolated from organic dairy farms in Brazil.(AU)

A emergência de estafilococos multirresistentes e resistentes à meticilina, isolados de animais, alimentos e humanos é uma preocupação em saúde pública. Esses micro-organismos produzem diferentes toxinas relacionadas à intoxicação alimentar em humanos. Este estudo caracterizou Staphylococcus spp. isolados em duas fazendas orgânicas no Brasil. Foram coletadas 259 amostras de leite em duas propriedades leiteiras orgânicas, nas quais 58 (22,4%) estirpes de Staphylococcus spp. foram isoladas. A maior sensibilidade dos isolados foi observada para ceftiofur e sulfametoxazol/trimetoprim em 96,6%. Em contraste, acima de 89% de resistência dos estafilicocos foi encontrada para penicilina G. O gene mecA foi identificado em 13,8% dos isolados. SEA e SEC foram as enterotoxinas mais comumente detectadas. PFGE revelou heterogeneidade genética entre S. intermedius e S. warneri, enquanto S. aureus demonstraram perfis semelhantes entre isolados dos dois rebanhos estudados. Relata-se pela primeira vez no Brasil a detecção de enterotoxinas, o gene mecA e diversidade genética em estafilococos isolados de vacas em produção orgânica.(AU)

MOLECULAR IDENTIFICATION AND ANTIMICROBIAL RESISTANCE PATTERN OF SEVEN CLINICAL ISOLATES OF Nocardia spp. IN BRAZIL / Identificação molecular e perfil de sensibilidade a antimicrobianos de sete isolados clínicos de Nocardia spp. no Brasil

Nocardia is a ubiquitous microorganism related to pyogranulomatous infection, which is difficult to treat in humans and animals. The occurrence of the disease is on the rise in many countries due to an increase in immunosuppressive diseases and treatments. This report of cases from Brazil presents the genotypic characterization and the antimicrobial susceptibility pattern using the disk-diffusion method and inhibitory minimal concentration with E-test® strips. In summary, this report focuses on infections in young adult men, of which three cases were cutaneous, two pulmonary, one neurological and one systemic. The pulmonary, neurological and systemic cases were attributed to immunosuppressive diseases or treatments. Sequencing analysis of the 16S rRNA segments (1491 bp) identified four isolates of Nocardia farcinica, two isolates of Nocardia nova and one isolate of Nocardia asiatica. N. farcinica was involved in two cutaneous, one systemic and other pulmonary cases; N. nova was involved in one neurological and one pulmonary case; and Nocardia asiatica in one cutaneous case. The disk-diffusion antimicrobial susceptibility test showed that the most effective antimicrobials were amikacin (100%), amoxicillin/clavulanate (100%), cephalexin (100%) and ceftiofur (100%), while isolates had presented most resistance to gentamicin (43%), sulfamethoxazole/trimethoprim (43%) and ampicillin (29%). However, on the inhibitory minimal concentration test (MIC test), only one of the four isolates of Nocardia farcinica was resistant to sulfamethoxazole/trimethoprim.

Nocardia é um microorganismo ubiquitário relacionado a infecções piogranulomatosas, com difícil resolução tecidual em humanos e animais. A doença é mundialmente emergente devido ao aumento de doenças e tratamentos imunossupressores. Este relato de casos ocorridos no Brasil visa apresentar a identificação molecular dos isolados e o padrão de sensibilidade a antimicrobianos por disco-difusão e concentração inibitória mínima (CIM) através de fitas E-test®. Os casos ocorreram em homens, em idade adulta. Três quadros foram cutâneos, dois pulmonares, um neurológico e um sistêmico. O quadro respiratório, o neurológico e um sistêmico estavam associados à doença ou terapia imunossupressoras. O sequenciamento do gene 16S rRNA (1491pb) possibilitou a identificação de quatro isolados de Nocardia farcinica, dois de Nocardia nova e um de Nocardia asiatica. N. farcinica foi observada em dois casos dermatológicos, um pulmonar e um quadro sistêmico, N. nova foi isolada de um caso neurológico e outro pulmonar; e N. asiatica em um caso dermatológico. O teste de disco-difusão mostrou que amicacina (100%), amoxicilina/clavulanato (100%), cefalexina (100%) e ceftiofur (100%) foram mais efetivos; enquanto gentamicina (43%), sulfametoxazol/trimetoprim (43%) e ampicilina (29%) foram menos efetivos. No entanto, no teste de concentração inibitória mínima (CIM), apenas um dos quatro isolados da espécie Nocardia farcinica mostrou-se resistente a sulfametoxazole-trimetropina.

Pesquisa de Cryptococcus neoformans e Candida spp. em excretas de psitacídeos e passeriformes cativos / Research on Cryptococcus neoformans and Candida spp. in the excretas of captive psittacisittacines and passeriformes / Investigación de Cryptococcus neoformans y Candida spp. en excretas de psittacidae y psittaciformes cautivos

As leveduras podem causar diversas doenças no homem e animais. Nas aves, as leveduras estão envolvidas principalmente em lesões no trato respiratório e digestório. Entre as leveduras patogênicas, Cryptococcus neoformans vem se destacando pela alta prevalência de criptococose humana em pacientes imunodeprimidos. Assim, os objetivos deste estudo foram identificar C. neoformans e outras leveduras patogênicas na cloaca e coana de passeriformes e psitaciformes e em excretas coletadas do fundo de gaiolas de aviários. Foram obtidas 29 amostras de 15 aves manifestando algum sinal respiratório, provenientes do Ambulatório de Animais Selvagens da UFPR (n=6) e da Clínica Veterinária Vida Livre (n= 23). As amostras foram semeadas em Ágar Sabouraud e Ágar Níger e mantidas a 300ºC por até 30 dias. Todas as colônias foram analisadas quanto à macro e micromorfologia. Para aquelas identificadas como leveduras, foram realizadas as provas bioquímicas: assimilação de carbono e nitrogênio e formação de tubo germinativo para identificação de Candida albicans. As amostras de excreta dos aviários (n=8) foram misturadas com solução fisiológica contendo antibiótico e o sobrenadante foi semeado em Ágar Níger. Nenhuma amostra das aves apresentou resultado positivo para C. neoformans, porém identificaram-se amostras positivas para C. albicans (duas amostras de coana), C. famata (uma amostra de coana) e C. tropicalis (uma amostra de coana). As excretas foram negativas para C. neoformans. Portanto, apesar de não ter sido isolado C. neoformans, outras leveduras patogênicas foram isoladas, demonstrando a importância dessas aves como possíveis veiculadoras de doenças para humanos.

The yeasts can cause many diseases in man and animals. On birds, the yeasts are involved mainly in respiratory and digestive tract lesions. Among pathogenic yeast, Cryptococcus neoformans is an important cause of human cryptococcisis associated with immunocompromised states. The purpose of this study is to identify the occurrence of C. neoformans and other pathogenic yeasts in cloacae and choana from passeriformes and psittacines as well as in excretas from poultry cages. Twenty nine samples from fifteen birds showing some respiratory symptom, from Veterinary Hospital of UFPR (n = 6) and Vida Livre Veterinary Clinic (n = 23), were collected. The samples were spread in Sabouraud dextrose Agar and Staib medium and kept at 30°C and observed for 30 days. All colonies were analyzed with respect to its micro and macromorphology. Biochemical assays were conducted for samples presenting yeasts: carbon and nitrogen assimilation profile and germ tube for Candida albicans identification. Samples from birds’ extracts (n = 8) were diluted in sterile saline solution with antibiotic and the supernatant was inoculated in spread on Niger seed agar. All samples were negative for Cryptococcus neoformans, however, C. albicans (two samples from choana), C. famata (one sample from choana) and C. tropicalis (choana) were found. Excretas from bird cages were negative to C. neoformans. Results suggested that birds harbor various pathogenic species of yeast, but not C. neoformans, and the result showed potential danger to carry diseases to humans.

Las levaduras pueden causar diversas enfermedades en el hombre y animales. En las aves, las levaduras están involucradas principalmente en lesiones en el tracto respiratorio y digestivo. Entre las levaduras patogénicas, Cryptococcus neoformans viene destacándose por la alta incidencia de cryptococcus humana en pacientes inmune deprimidos. Así, el objetivo de este estudio fueron identificar C. neoformans y otras levaduras patogénicas en la cloaca y coana de psittacidae y psittaciformes y en excretas colectadas de las jaulas de pajareras. Fueron obtenidas 29 muestras de quince (15) aves manifestando algún señal respiratorio, provenientes del Ambulatorio de Animales Salvajes de la UFPR (n=6) y de la Clínica Veterinaria Vida Livre (n= 23). Las muestras fueron sembradas en Ágar Sabouraud y Ágar Níger y mantenidas a 30ºC hasta 30 días. Todas las colonias fueron analizadas cuanto a la macro y micromorfología. Para aquellas identificadas como levaduras, fueron realizadas las pruebas bioquímicas: asimilación de carbono y nitrógeno, y formación de tubo germinativo para identificación de Candida albicans. Las muestras de excreta de los pajareros (n=8) fueron mezcladas con solución fisiológica conteniendo antibiótico y el sobrenadante fue sembrado en Ágar Níger. Ninguna muestra de las aves presentó resultado positivo para C. neoformans, pero se identificaron muestras positivas para C. albicans (dos muestras de coana), C. famata (una muestra de coana) y C. tropicalis (una nuestra de coana). Las excretas fueron negativas para C. neoformans. Por lo tanto, a pesar de no haber sido aislado C. neoformans, otras levaduras patogénicas fueron aisladas, demostrando que esas aves son posibles transmisoras de enfermedades para los seres humanos.