Implementación de un protocolo para la identificación de vibrio parahaemolyticus a través de PCR / Implementation of a protocol for the identification of vibrio parahaemolyticus by PCR

Vibrio parahaemolyticus es una de las principales bacterias Gram-negativas causantes de toxiinfecciones alimentarias y gastroenteritis aguda en humanos. En peces causa septicemia hemorrágica y ulceraciones de la piel, conviertiéndose en una de las principales causas de pérdidas en las explotaciones piscícolas. El presente trabajo documenta el establecimeinto de un protocolo de identificación de Vibrio parahaemolyticus por la técnica de acción en cadena de la polimerasa (PCR). Se realizaron caracaterizaciones genómicas de 24 aislados de Vibrio sp. obtenidos del cepario del laboratorio de Bacteriología de Sanidad Animal CENIAP-INIA en Maracay, estado Aragua, Venezuela. En la identificación genética los aislados fueron caracterizaciones mediante la PCR, siguiendo la metodología descrita por Lee y col. (1) con modificaciones en la extracción del ADN, que se realizó con DNAzol. Los iniciadores utilizados para tal fin fueron: 5`-GCGAATTCGATAGGGTGTTAACC-3` y 5`-CGAATCCTTGAACATACGCAGC-3`. De los 24 aislados analizados por PCR se obtuvieron 7 amplificados, que se identificaron como V. parahaemolyticus

Aislamiento de vibrio cholerae a partir de lisas y tilapias en Venezuela / Isolates of vibrio cholerae from lisas and tilapias in Venezuela

Un importante patógeno humano es vibrio cholerae, causante de diarreas profusas (cólera) y otros desórdenes. Su transmisión está asociada con el consumo de alimentos marinos contaminados. En el presente estudio se realizaron caracterizaciones fenotípicas de 24 aislados de Vibrio sp. obtenidos por necropsia y del cepario del laboratorio de Bacteriología de Sanidad Animal CENIAP-INIA en Maracay, estado Aragua; entre los cuales fue aislado vibrio cholerae proveniente de lisas y tilapsias. Las técnicas de identificación bacteriana se basan en sus características fenotípicas y metabólicas, desarrollo de colonias en medios de cultivos, morfología microscópica y reacciones tintoriales y características bioquímicas basadas en la utilización de sustratos. En los ejemplares de tilapia estudiados se identificó vibrio cholerae no-O1 y en las lisas, predominaron vibrio parahaemolyticus y vibrio cholerae no-O1. Este hallazgo es de gran importancia sanitaria, ya que los peces son de consumo humano, lo que constituye un riesgo en salud pública

Implementación de un protocolo para la identificación de la tóxina de vibrio cholerae / Implementation of a protocol for the indentification of vibrio cholerae

Vibrio cholerae produce una potente toxina codificada por dos genes: el operón ctxAB. Los estudios epidemiológicos han sido limitados por las técnicas fenotípicas; por ello es necesrio establecer un protocolo para la detección del gen de la subnidad A (ctxA), que codifica la toxina de Vibrio cholerae, por lo cual se realizaron caracterizaciones genéticas de 24 horas aislados de la familia Vibrionaceae obtenidos del cepario del laboratorio de Bacteriología de Sanidad Animal-CENIAP-INIA, que provienen de lisas, tilapias y cachamas. Se siguió la metodología recomendada por Fields et al. (1992) con modificaciones, siendo la secuencia de los iniciadores: 5'-GGGCAGATTCTAGACCTCCTG-3' Y 5'-CGATGATCTTGGAGCATTCCCAC-3'. Los aislados de Vibrio cholerae no 01 analizados no poseen la toxina colérica. La investigación de la toxina colérica en aislados ambientales es necesaria, ya que en los peces en los que fueron aislados son de consumo humano, lo que constituye un riesgo en salud pública.

Reduction of Sephadex-induced lung inflammation and bronchial hyperreactivity by rapamycin

Rapamycin is a macrolide antibiotic whose potent immunosuppressor activity was recently described in vivo and in vitro. The aim of the present work was to determine if rapamycin could affect an established inflammatory response. Conscious pathogen-free Dunkin-Hartley guinea pigs (300-400 g) were injected intravenously with Sephadex beads (G50, superfine, 10 to 40 microns, 24 mg/kg) to induce lung inflammation and bronchial hyperreactivity. Bronchoalveolar lavage (BAL) fluid was collected 2, 12 and 24 h after Sephadex administration and the cells were counted. Bronchial tissue was used to construct dose-response (contraction, g) curves to histamine and acetylcholine 24 h after the Sephadex injection, using a cascade system. Results are presented as area under the log dose-response curves. Test animals were injected with rapamycin (5 mg/kg) or its vehicle by the intramuscular route either 2 or 12 h after Sephadex injection and BAL fluid collected 24 h after Sephadex administration. Rapamycin administration 2 h after Sephadex reduced eosinophil and lymphocyte numbers in BAL by 52 and 55 per cent , respectively, but not ex vivo bronchial hyperreactivity induced by Sephadex injection. However, rapamycin administration 12 h after Sephadex reduced BAL eosinophil and lymphocyte numbers (55 and 62 per cent , respectively) and bronchial hyperreactivity. The increase in neutrophil numbers in BAL induced by Sephadex injection was not modified by rapamycin. Since lymphocyte numbers in BAL were significantly increased in Sephadex-treated animals at 12 h but not at 2 h after Sephadex injection, the present results suggest that the inhibition of bronchial hyperreactivity by rapamycin may be dependent on the presence of lymphocytes elicited into the airways by Sephadex injection