Avaliação in vitro e in vivo de matrizes de quitosana como arcabouço tridimensional para regeneração óssea / Evaluation in vitro and in vivo matrix of chitosan as three-dimensional framework for bone regeneration

Na primeira parte desse estudo, foi avaliada in vitro a influência de 2 diferentes graus de N-acetilação (DA) de matrizes tridimensionais (3D) de quitosana sobre a viabilidade, adesão, distribuição e proliferação de células mesenquimais extraídas da medula óssea de ratos (rBMSC's), assim como, a influência do soro autólogo de rato (RS), sobre os mesmos aspectos, como fonte de proteínas e fatores de crescimento. Para tanto, 10 animais foram utilizados para extração do RS e das rBMSC's. As células foram semeadas e induzidas a osteodiferenciação sobre matrizes 3D de quitosana, com FBS (Soro Fetal Bovino) e sem adição do RS. Na segunda parte dessa análise, foi analisado in vivo o comportamento biológico de matrizes 3D de quitosana para a regeneração óssea, com DA's de 4 e 15 por cento, quando implantadas em defeitos com morfologia e dimensões críticas, criados em calvária de rato. Utilizou-se 80 animais, distribuídos em 4 grupos, com 5 animais cada, avaliados nos pontos biológicos de 7, 15, 45 e 120 dias. Os grupos foram divididos em: GI Controle - Sem implantação de biomaterial; Gil - Implantação de matriz de quitosana 4 por cento; GIII - Implantação de matriz de quitosana 15 por cento; GIV - Implantação de matriz de colágeno tipo I. Os espécimes foram fixados e incluídos em blocos de resina e cortados em micrótomo de alto impacto, para tecidos não descalcificados e corados em H/E, Picrosírius Red e Tricrômio de Masson Goldner para avaliação histológica em microscopia de Luz. Também, foram confeccionados blocos em parafina para análise imunohistoquímica da formação vascular utilizando-se PECAM-1. Os resultados in vitro demonstraram que as rBMSC's apresentaram-se viáveis quando cultivadas nos 2 tipos de soro. Mais ainda, as rBMSC's aderiram e proliferaram sobre as matrizes de quitosana, em especial sobre a de 4 por cento. Em adição, os achados sugeriram que o RS apresenta as proteínas e fatores necessários para o crescimento das rBMSC's. Quando analisado o comportamento biológico das matrizes 3D in vivo, concluiu-se que, muito embora, as matrizes tenham sido consideradas biocompatíveis, e que tenham tido a sua região central permeada por vasos sangüíneos, não foi encontrada formação óssea de novo nos sítios de implantação.

Imagem digital em Periodontia / Digital image in Periodontology

Estudos longitudinais em Periodontia requerem a detecção de mínimas mudanças ósseas. A utilização da imagem digital pela técnica da radiografia por subtração e análise dos níveis de cinza confere melhor eficácia ao diagnóstico e à proservação dos casos tratados, pois, é mais sensível para detectar precocemente a reabsorção ou neoformação óssea de áreas selecionadas. O presente trabalho objetiva fazer uma breve revisão da literatura a respeito da aplicabilidade e vantagens dessas técnicas no diagnóstico e avaliação da terapia periodontal comparada à técnica radiográfica convencional.

Longitudinal assays in Periodontology require detection of paucity bone changes. Therefore, the use of digital images by the subtraction radiography technique and density levels give better diagnosis arguments once the obtained image allows precise assessment of the under evaluation area, removing interferences and emphasizing bone changes. This paper intends to point out the advantages and applications of these two techniques in periodontal follow-up, especially when compared to the conventional radiographic technique.

Diagnóstico molecular em Periodontia / Molecular Diagnosis in Periodontology

O papel das citocinas, em especial da interleucina-1 (IL-1), na patogênese da doença periodontal vem se confirmando pelos seus efeitos biológicos nas manifestações das doenças inflamatórias. As citocinas são mediadores químicos locais produzidos por células mononucleadas e leucócitos que podem provocar a síntese e secreção de inúmeras outras substâncias, formadoras da base molecular de comunicação de célula para célula, incluindo-se aqui as prostaglandinas e fatores de crescimento, que interagem direta ou indiretamente com as células ósseas. Além disto, o polimorfismo gênico das citocinas pró-inflamatórias, o qual particulariza a resposta do hospedeiro, tem sido alvo de estudos cujo objetivo é diagnosticar precocemente mecanismos destrutivos da doença periodontal, assim, apontando os indivíduos susceptíveis à severidade desta patologia. Este artigo explicita os fatores envolvidos na destruição periodontal, os vários eventos que permeiam o mecanismo imunológico frente à agressão por periodontopatógenos e a influência da expressão gênica dos mediadores químicos no curso da doença periodontal.

The role of cytokines, especially interleukin-1 (IL-1), in the pathogenesis of periodontal disease has been assured by the relevance of their biological effects in the manifestations of inflammatory diseases. Cytokines are local chemical mediators produced by leukocytes and mononucleate cells that synthesize a great number of substances which comprises the molecular basis of cell-to-cell linkage, such as prostaglandins and growth factors, acting directly or indirectly on bony cells. Besides, cytokines's genetic polymorphisms, which characterize host response, have been studied in order to detect earliest destructive mechanisms of periodontal disease, focusing on susceptible patients. In such way this paper points out the factors involved in periodontal breakdown, immunologic mechanisms and genetics expression of chemical mediators in periodontal disease.