In vivo expression of beta-galactosidase by rat oviduct exposed to naked DNA or messenger RNA

Intra-oviductal administration of RNA obtained from oviducts of estradiol-treated rats resulted in accelerated egg transport (Rios et al., 1997). It is probable that estradiol-induced messenger RNA (mRNA) entered oviductal cells and was translated into the proteins involved in accelerated egg transport. In order to test this interpretation we deposited in vivo 50 micrograms of pure beta-galactosidase (beta-gal) mRNA, 50 micrograms of pure DNA from the reporter gene beta-gal under SV40 promoter or the vehicle (control oviducts) into the oviductal lumen of rats. Twenty four hours later the beta-gal activity was assayed in oviductal tissue homogenates using o-nitrophenyl-beta-D-galactopyranoside as a substrate. The administration of beta-gal mRNA and pSVBgal plasmid increased beta-gal activity by 71% and 142%, respectively, over the control oviducts. These results indicate that naked DNA and mRNA coding for beta-gal can enter oviductal cells and be translated into an active enzyme. They are consistent with the interpretation that embryo transport acceleration caused by the injection of estradiol-induced RNA in the oviduct involves translation of the injected mRNA

A segment and epithelium specific messenger ribonucleic acid fragment up-regulated by estradiol in the rat oviduct

Estradiol accelerates oviductal embryo transport in the rat through changes of genomic expression in oviductal cells. However, the genes involved are unknown. We used a differential display by reverse transcription-polymerase chain reaction to detect estradiol (E2)-dependent genes in the rat oviduct. Rats on day 2 of pregnancy were untreated or treated with 10 micrograms of E2 and the oviducts were extracted at 30, 180 and 360 min later and used to isolate RNA. Products of reverse transcriptase-PCR, made with pairs of arbitrary and oligo-deoxythymidine primers, were separated on denaturing polyacrylamide gels and candidate bands were excised and reamplified. Truly positive cDNA fragments determined by a single strand conformation polymorphism assay were cloned and sequenced. A ribonuclease protection assay confirmed that clone 25 is up-regulated by E2 in the oviduct at 30, 180 and 360 min. This clone exhibited no homology with known genes and in situ hybridization showed it is only expressed in the epithelial cells of the isthmic segment. Clone 25 is likely to represent a new gene, which is up-regulated by E2 in the epithelium of the isthmic segment of the rat oviduct. Its time frame of response is compatible with a mediator of the effect of E2 on oviductal embryo transport.

Comparison of the effect of hypothalamic neuropeptides upon luteinizing hormone secretion by cultured rat anterior pituitary cells

Bovine median eminence contains a factor difference from gonadotropin-releasing hormone (GnRH) than increases basal luteinizing hormone (LH) secretion and potentiates GnRH-stimulated LH release. We compared the effect of hypothalamic neuropeptides on basal and GnRH-stimulated LH secretion using rat pituitary cells under static incubation conditions to determine if any of them mimics the LH-releasing activity no attributable to GnRH present in bovine median eminence extracts. Both, galanin and eurotensin (10(-9)-10(-5)) stimulated basal LH secretion in a dose-response manner. Galaninincreased 3-4 fold and neurotensin doubled the basal LH secretion. The GnRH antagonist Nal-Glu 10(-6) M abolished the effect of 10(-7) M GnRH and 10(-5)M neurotensin, but did not block the LH-releasing activity of galanin. Leucin-enkephalin, beta-endorphin, substance P and neuropeptide Y (NPY) did not alter basal LH secretion. Neuropeptides produced three types of response on GnRH-stimulated LH release. First...

Patología anexial no inflamatoria durante el uso de implantes de levonorgestrel (Norplant) o dispositivos intrauterinos / Annexial pathology non inflammatory during levonorgestrel implant use (Norplant) or intrauterine devices

Se revisan las fichas clínicas de 477 mujeres usuarias de Norplant y 200 portadoras de T-Cobre que reúnen 28548 y 9752 meses de exposición, respectivamente. Se evaluó la presencia de masas anexiales no inflamatorias iguales o mayores de 5 cm, analizando su frecuencia, evolución natural y terminaciones. En 54 usuarias de Norplant (11,3%) se diagnosticaron 62 episodios de masas anexiales que corresponden a 2,6 episodios por 1.200 meses de uso. En 7 usuarias de T-Cobre (3,5%) se diagnosticaron 8 episodios, con una tasa de 1,0 episodios por 1.200 meses de uso. Las masas fueron casi siempre ováricas y unilaterales y se interpretaron en su mayoría como quístes ováricos funcionales por sus características clínicas y ecográficas y por su evolución. En 2 mujeres de cada grupo la masa se ubicó en la trompa y correspondió a embarazos tubarios. La incidencia de embarazo tubario en el grupo Norplant fue de 1 por 100 años mujer, inferior a lo ocurrido en el grupo T-Cobre y a lo referido con otras progestinas. En la mayoría de los casos (72,6% en el grupo Norplant y 62,5% en el grupo T-Cobre) la masa anexial era asintomática y se detectó en un control ginecológico de rutina. Los motivos de consulta en los otros casos fueron algia pelviana y sangrado anormal. Los episodios regresaron espontáneamente en el 90,4% de las usuarias de Norplant y en el 62,5% del grupo T-Cobre, la mayoría de ellos en los 60 días que siguieron al diagnóstico. Las indicaciones quirúrgicas en usuarias de Norplant fueron 2 embarazos tubarios, 2 quistes foliculares y 2 tumores neoplásicos. En el grupo T-Cobre las indicaciones quirúrgicas fueron 2 embarazos ectópicos y un quiste ovárico simple. Se concluye que los quistes funcionales ováricos son más frecuentes en mujeres portadoras de implantes Norplant que en los controles, que generalmente son asintomáticos y regresan espontáneamente. Deben ser vigilados hasta su desaparición por la posibilidad que se trate de una masa anexial de otra etiología que requiera tratamiento quirúrgico

Amenorrea, anovulación e infertilidad asociadas a la lactancia en un grupo seleccionado de mujeres urbanas / Amenorrhea, anovulation and infertility associated with breast feeding in a selected group of urban women

Se midió la influencia del amamantamiento sobre la duración de la amenorrea en un grupo de mujeres altamente motivadas para amamantar en libre demanda por un tiempo prolongado. Se calculó la probabilidad de presentar el primer sangrado en 676 mujeres en lactancia exclusiva al segundo mes postparto. El 52% presentó el primer sangrado estando en lactancia exclusiva, antes del término del sexto mes postparto. El tiempo transcurrido desde el parto y la suplementación influyeron negativamente en la duración de la amenorrea. Frecuencias de ocho o más mamadas en 24 hooras no lograron prolongar la amenorrea en todos los casos. El reinicio de los ciclos ovulatorios se estudió en 48 mujeres en amenorrea y lactancia exclusiva al tercer mes postparto. El 28% de las mujeres presentó el primer sangrado, y el 26% de los casos ovuló antes del término del sexto mes postparto. La probabilidad acumulada de embarazo fue de 9,4% al sexto mes postparto en las mujeres en lactancia exclusiva que no usaron métodos anticonceptivos. El riesgo fue menor del 2% en aquellos casos que permanecieron en amenorrea durante este período. En la población estudiada la lactancia no resultó un método eficaz para espaciar los nacimientos, con excepción de los casos que se mantuvieron con lactancia exclusiva y amenorrea

Ensayo clínico de anillos vaginales liberadores de progesterona como anticonceptivos en la lactancia / Clinical trial of progesterone releasing vaginal rings as contraceptives during lactation

El objetivo de este ensayo fue investigar los niveles plasmáticos de progesterona y la eficacia anticonceptiva de anillos vaginales liberando progesterona durante la lactancia. Se probaron dos tipos de anillos, que liberaban un promedio aproximado de 5 ó 10 mg. diarios, respectivamente, en 165 mujeres sanas, en plena lactancia. Se constituyó un grupo control de 162 portadores de DIU - T/Cobre. Los anillos fueron insertados el día 60- posparto, y renovados cada tres meses por otros. Al comienzo del ensayo, los niveles plasmáticos de progesterona eran, aproximadamente, 10 nmol/L y 15 nmol/L para anillos que liberaban, respectivamente, 5 y 10 mg por día, y se reducían ligeramente después de 30 días. Los niveles en períodos de uso subsecuentes, observados, se acercaban a los del primer período o etapa. Estos niveles varían dentro de la amplitud eficaz para inhibir la fertilidad de mujeres en lactancia. Se diagnosticó un embarazo en 1005 meses-mujer de uso del anillo de progesterona, y no ocurrió ninguno en 1075 meses-mujer de uso de T/Cu. Esto contrasta con la alta incidencia de embarazos comprobada en un grupo de mujeres en lactancia, sin tratamiento, en quienes se gestaron 19 embarazos, o sea, una incidencia en 677 meses-mujer. No se detectaron efectos deletéreos sobre la lactancia ni sobre el crecimiento de los niños, como tampoco sobre la salud materna o infantil. La conclusión es que el anillo vaginal de progesterona es un método adecuado para el suministro de progesterona como anticonceptivo para madres en lactancia

Influencia de los implantes anticonceptivos Norplant (R) en la lactancia y el crecimiento de los niños / Influence of Norplant contraceptive implants on lactation and infant growth

El presente trabajo estudia la influencia de Norplant (R) sobre la lactancia y sobre el crecimiento del lactante durante el primer año post parto. 100 mujeres en lactancia exclusiva recibieron Norplant (R) el día 55 + ou - 3 post parto y a 100 mujeres con similares características se les insertó una T cobre. No hubo diferencias significativas en la evolución de la lactancia entre los dos grupos hasta el 12§ mes post parto en que el grupo Norplant observó un menor porcentaje de mujeres en lactancia exclusiva. Los niños presentaron un crecimiento ponderal normal en los dos grupos, aunque las hijas del grupo Norplant crecieron significativamente menos durante el 4§ mes de vida, al compararlas con las hijas de mujeres portadoras de DIU. No se diagnosticaron embarazos ni efectos colaterales relevantes. En la leche materna se detectaron concentraciones variables de levonorgestrel con valores que fluctuaron entre 23 y 311 pc/ml. La dosis recibida por el niño se estimó en 15 a 18 ng/Kg/día durante el primer mes de uso de Norplant (R), dosis baja que probablemente no representa riesgo para la salud de los niños, aunque se necesita más investigación sobre el tema. Hasta el momento, el uso de Norplant durante la lactancia debería limitarse a aquellos casos que necesitan protección efectiva y que otros métodos anticonceptivos no hormonales estén contraindicados o no sean aceptados