Introduccion de un ultramicrometodo inmunocitoquimico para la cuantificacion de subpoblaciones linfocitarias identificadas con anticuerpos monoclonales

Se introdujo en nuestro laboratorio un ulktramicrometodo inmunocitoquimico (UMICIQ) para la cuantificacion de las principales subpoblaciones de linfocitos T identificadas con los anticuerpos monoclonales anti-CD3, anti-CD4 y anti-CD8. Las deteminaciones se realizaron en celulas mononucleares de sangre periferica de donantes de sangre supuestamente sanos, con edades entre 21 y 47 anos. El estudio de los 15 primeros individuos se realizo tanto por el UMICIQ como por un micrometodo de inmunofluorescencia indirecta (IFI), y cuando se compararon los resultados, no se encontraron diferencias estadisiticamente significativas. Para establecer los valores de referencia para el UMICIQ se tomaron las muestras de 30 donantes. Con la aplicacion de este metodo se pueden evaluar las subpoblaciones linfocitarias con una sensibilidad y especificidad similares a las observadas con la microtecnica del IFI; sin embargo, se introducen una serie de ventajas como: uso de menores concentraciones de celulas y por ende menor volumen de sangre para cada determinacion, uso de diluciones mayores de los anticuerpos y conjugados, se hace innecesario el uso del microscopio de luz UV y de la centrifuga refrigerada, se pueden distinguir la morfologia y el linaje de las celulas simultaneamente con la reactividad inmunologica de sus antigenos

Ultramicrometodo inmunocitoquimico. Titulacion de anticuerpos utilizados para el inmunofenotipaje celular

Se describe el procedimiento para la titulacion de los anticuerpos primarios y los antisueros conjugados, que hizo posible la introduccion en el Instituto de Hematologia Inmunologia, de un ultrametodo inmunocitoquimico para el estudio del inmunofenotipo en enfermedades inmunologicas y en las hemopatias malignas. Este metodo emplea celulas no deshidratadas adheridas a laminas portaobjetostratadas con poli-lisina. Al determinar la dilucion de trabajo de 32 anticuerpos monoclonales y 3 policlonales, se observo que con la misma cantidad de estos reactivos se pueden realizar entre 5 y 100 veces mas determinaciones con respecto al metodo de inmunofluorescencia indirecta. Entre otras ventajas, este metodo permite realizar 21 determinaciones en una misma lamina portaobjeto, requiere una menor cantidad de celulas, los resultados se evaluan en un microscopio de luz visible y las colaboraciones no se desvanecen con el tiempo, lo que permite realizar estudios retrospectivos

Linfoma linfocitico intermedio rn fase leucemica. Características citomorfológicas e inmunofenotipicas / Intermediate lymphocytic lymphoma in leukemic phase. Cytomorphological and immunophenotypic features

Se describen las alteraciones citomorfológicas e inmunofenotípicas de las células leucémicas en un caso de linfoma linfocítico intermedio en fase leucémica. Las células linfoides circulantes eran en su mayoría de mediano tamaño, muy pleomórficas y con irregularidades nucleares. En su membrana expresaban inmunoglubulinas de superficie, HLA-DR, CD19 y CD76, pero no el CD5, ni formaban rosetas de ratón. En general, las células leucémicas presentaban algunas características semejantes a las del manto folicular normal

Estandarización de un método citoquímico para el estudio de la enzima esto 5'-nucleotidasa en linfocitos / Standarization of a cytochemical method for the study of Ecto-5'nucleotidase enzyme on lymphocytes

Se describe un método para la detección de la enzima ecto 5'nucleotidasa (5'NT) en linfocitos de sangre periférica. El estudio se realizó en 25 adultos sanos (10 mujeres y 15 hombres) con un rango de edad entre 19 y 44 años y una edad promedio de 30 años. La cantidad de células y de reactivos se redujo con respecto a otras técnicas. El rango de células 5'NT+ obtenido es de 18 a 40 por ciento , lo que se corresponde con lo informado por otros autores

Obtención de anticuerpos especifícos para la IgG de ratón / Production of specific antibodies to mouse IgG

Se llevó a cabo la purificación de IgG de ratón, con la que se preparó un antisuero en cabra. A partir de este antísuero se aislaron los anticuerpos específicos por cromatrografía de afinidad, con el empleo de la IgG de ratón purificada acoplada a la Sepharosa C1-4B. Se obtuvo una concentración de los ancuerpos aislados de 1,5 mg/mL, con una cantidad que representó aproximadamente el 3 por ciento del total de anticuerpos. Se evaluó la pureza, la reactividad y la especificidad de estos anticuerpos

Factor inhibidor de la migración leucocitaria antes del tratamiento con factor de transferencia y después de el / Leukocyte migration inhibitory factor before and after treatment with transfer factor

Se realizaron determinaciones de la actividad del factor inhibidor de la migración leucocitaria "in vitro" en 10 niños con infecciones respiratorias recurrentes antes del tratamiento con factor de transferencia y después de él. Se encontró un incremento significativo (pó0,01) de esta función celular y de la respuesta cutánea a la tuberculina "in vivo", después del tratamiento con este medicamento. Los resultados señalan la importancia del estudio de pacientes con esta entidad y la utilidad de evaluar estas variables en su seguimiento clínico y terapéutico

Formación de rosetas de monocitos con hematies sensibilizados / Formation of monocyte rosettes with sensitized red blood cells

Se normalizó un método de formación de rocetas de monocitos con eritrocitos de carnero sensibilizados y antisuero de conejo clase IgG (REA-M), en 30 adultos sanos. Los valores normales obtenidos muestran un promedio de 71,60 por ciento +-8,90 de monocitos formadores de rosetas EA, lo que se corresponde con lo comunicado por diferentes autores. Esta técnica permite cuantificar la subpoblación de monocitos con receptores Fc para IgG y su aplicación en el estudio de diferentes enfermedades como las inmunodeficiencias primarias y secundarias

Transformación linfoblásticainducida por el mitogeno extraído de la fitolaca americana: valores de referencia / Lymphoblastic transformation induced by mitogen extracted from American Phytolaca : reference values

Se evaluó la transformación linfoblástica frente al mitógeno extraído de la Fitolaca americana por criterio de timidina tritiada, en células mononucleares de sangre periférica de 50 donantes (25 del sexo masculino y 25 del sexo femenino). No se encontró diferencia estadísticamente significativa cuando se comparó el índice de estimulación entre los sexos. Se determinó como valor de referencia para controles normales el de 36,65+-14,12 de índice de estimulación

Antígenos de superficie y su relación con diferentes estadios de activación de los linfocitos T II antígenos de activación intermedios / Surface antigens and their relationship with different activation stages of T-lymphocytes II intermediate and late antigens

Se describen las características quimiofísicas y biológicas, conocidas hasta ahora, de diferentes antígenos de activación intermedios se encuentran el CD38 y las moléculas reconocidas por los anticuerpos monoclonales OKT23 yOKT24. Entre los antígenos de activación tardíos se encuentran el LDA1,act1, VLA1 y la molécula RLA-DR. Los antigénos más estudiados han sido el CD38 y la molécula HLA_DR. Recientemente, la molécula VLA-1 perteneciente a la familia de la integrinas, también se ha estudiado ampliamente

Leucocitos polimorfonucleares neutrofilos formadores de roseta EA en la anemia drepanocítica / Rosette EA-forming neutrophil polymorphonuclear leukocytes in seckle cell anemia

Se estudió el número relativo de leucocitos polimorfonucleares neutrófilos formadores de roseta con hematies sensibilizados con anticuerpos, en 24 niños y 19 adultos con anemia drepanocítica y en un grupo control sustituido por 30 niños y 30 adultos sanos. Cuando se compararon los resultados de los pacientes con los controles en ambos grupos etáreos, se encontró una disminución estadísticamente significativa (p<0,001) con valores de 37,37 ñ12,04% vs. 64,30ñ14,33% en los niños y 57,95ñ17,47% vs. 78,63ñ9,51% en los adultos. Esta alteración indica la presencia de un desbalance en las subpoblaciones de leucocitos polimorfonucleares neutrófilos en los pacientes con anemia drepanocítica

Roseta alogénica: su aplicación en pacientes sometidos a estres agudo / Alogenic rosette: its aplication in patients undergoing acute stress

Se estudiaron tres variantes del método de formación de roseta alogénica (sin suero, con suero y con suero más tratamiento con neuraminidasa) en 30 controles normales. La variante con suero más neuraminidasa mostró mennor variabilidad que las otras dos. Se aplicó dicha variante a 58 pacientes sometidos a estrés agudo: 20 con infarto agudo del miocardio, 16 sometidos a grandes intervenciones quirúrgicas, 10 politraumatizados operados y 12 politraumatizados no operados. En todos los grupos estudiados se encontró un incremento de los linfocitos formadores de roseta alogénica (linfocitos-FRA), excepto en aquéllos que habian sufrido infarto agudo del miocardio

Factor de transferencia y levamisol: evaluación clínica e inmunológica en niños con infecciones respiratorias recurrentes; informe preliminar / Transference factor and levamisole: clinical and inmunological evaluation in children with recurrent respiratory infections: preliminary report

Se realizó la evaluación del tratamiento inmunoestimulante conjuntamente con el factor de transferencia (FT) y el levamisol, en 20 niños entre 1 y 5 años de edad con infecciones repiratorias recurrentes (IRR), por medio de su evolución clínica e inmunológica en un período de 24 semanas. Se demostró una alteración en el sistema inmune ocasionada por una disminución de los linfocitos T totales y T auxiliadores (CD4) así como de la actividad citotóxica de las células asesinas naturales (NK) y de la citotoxicidad celular dependientes de anticuerpos (ADCC). La evolución clínica y de laboratorio resultó favorable en todos los casos estudiados

Expresión del receptor de interleucina-2 en linfocitos estimulados con mitógeno / Expression of interleukin-2 receptor in mitogen stimulated lymphocytes

Se establecieron las condiciones óptimas para la determinar la expresión del receptor de interleucina-2 en linfocitos normales estimulados con mitógenos mediante el mètodo de inmunofluorescencia indirecta. Se utilizó un anticuerpo monoclonal anti-receptor de interleucina-2 comercial y otro purificado en Cuba. Se encontró una expresión mayor del receptor en los linfocitos cultivados durante 144 horas con fitohemaglutinina a una concentración de 2,5 ug/10 células/mL. Ambos anticuerpos monoclonales marcaron adecuadamente las células. Se hallaron valores normales según las variables óptimas encontradas para el anticuerpo monoclonal purificado en Cuba: de cada 100 células, 26+9 fueron positivas para la expresión del receptor de interleucina-2 al sexto día en cultivo

Reacción de hipersensibilidad tipo II-citotóxica / Type II hipersensitivity citotoxic reaction

Se realiza una revisión de la reacción tipo II (citotóxica) según la clasificación de Gell y Coombs. Se comentan los aspectos más sobresalientes de los diferentes mecanismos que median este tipo de reacción. Se hace una descripción detallada de la citotoxicidad mediada por células dependientes de anticuerpos (ADCC) y se señala la repercusión clínica de esta reacción productora de daño hístico

Efecto de la dosis profiláctica de cloroquina sobre la expresión de receptores Fc de neutrófilos / Effect of prophylactic dosages of chloroquinine on the expression of neutrophil Fc receptors

Se describe el efecto in vivo de la cloroquinina administrada en dosis de 300 y 600 mg base semanales sobre la expresión de receptores Fc de neutrófilos en voluntarios sanos. A todos los individuos se les realizó el estudio al inicio de los 6 meses de administración de la droga. Se encontraron diferencias estadisticamente significativas (p<0,01) entre los valores obtenidos antes del tratamiento y a las 6 semanas del mismo, en el grupo que recibe la dosis de 600 mg por semana

Normalización de una microtécnica para evaluar el factor inhibidor de la migracion leucocitaria in vitro / Standardization of a microtechnique for the evaluation of migration inhibition factor of leukocytes in vitro

Se normalizó la microtécnica directa de la prueba de inhibición de la migraciòn leucocitaria in vitro con la utilización del derivado proteico de la tuberculina (PPD) como antígeno de prueba. Se estableciò el punto de corte de la inhibiciòn de la migraciòn producida por esta linfocina para la concentraciòn del PPD empleado, el cual ajustamos en nuestro laboratorio para el índice de la migraciòn leucocitaria como < 0,65

Estandarización de una técnica de formación de rosetas con hematíes sensibilizados (EA) / Standardization of a rosette forming technique with sensibilized erythrocytes

Se informa que en 39 adultos sanos (30 hombres y 9 mujeres) con un promedio de edad de 31 años (rango de 22 a 46 años) se determinó la cifra de rosetas formadas por neutrófilos (RFN) con eritrocitos de carnero sensibilizados con antisuero de la clase IgG antieritrocitos de carnero producido en conejo. Se obtiene una media de 79,5% con una desviación estándar de 9,8% Se señala que estas cifras se corresponden con las comunicadas por otros autores. Se indica que la aplicación de esta técnica en nuestro laboratorio permite establecer los valores de referencia normales de RFN en adultos sanos, la aplicación de la misma a pacientes con infecciones recurrentes, procesos inflamatorios agudos y crónicos y utilizarla en síndromes mieloproliferativos, por lo que abre nuevas posibilidades en el estudio de los mecanismos de la inmunidad inespecífica

Formación de roseta espontánea con eritrocitos de ratón en la leucemia linfoide crónica / Spontaneous mouse erythrocyte-rosette formation in chronic lymphocytic leukemia

Se estudió la formación de linfocitos formadores de roseta espontánea con eritrocitos de ratón (linfocitos-FRER) en 41 enfermos con leucemia linfoide crónica (LLC), 31 hombres y 10 mujeres. La edad promedio fue de 70 años, con un rango entre 30 y 80 años. Treinta y cinco pacientes presentaron valores de inmunoglobulinas de superficie IgS superiores al 40

Marcadores de membrana linfocitaria en pacientes con fiebre hemorrágica por dengue / Surface markers for lymphocytes in patients with dengue hemorrhagic fever

Se investigan los marcadores de membrana en 78 pacientes (28 adultos y 50 niños) que presentan fiebre hemorrágica por dengue (FHD), durante la epidemia ocurrida en Cuba en el año 1981. El grupo de adultos está formado por 15 hombres y 13 mujeres. La edad promedio es de 32 años con un rango de 16 a 75 años. La distribución por sexo de los niños es de 24 varones y 26 hembras. En ellos da edad promedio es de 9 años, con un rango de 4 a 14 años. De acuerdo con los resultados serológicos, estos enfermos se consideran casos de reinfección. El agente etiológico identificado es el serotipo 2 del virus dengue. Con vistas a correlacionar las pruebas de laboratorio con el cuadro clínico los enfermos se clasifican en: leves, moderados, severos y graves. En los niños se encuentra correlación entre el estado de gravedad y el número de linfocitos T, medidos por la técnica de roseta espontánea total. Se sugiere que la cuantificación de los linfocitos T de la sangre periférica de los pacientes con FHD puede considerarse como un indicador del estado de gravedad de esta enfermedad