Susceptibilidad in vitro a cinco antifúngicos de aislamientos del Complejo Fusarium solani provenientes de úlceras corneales / In vitro susceptibility to five antifungals of Fusarium solani Complex isolates obtained from corneal ulcers

El Complejo Fusarium solani (CFS) se encuentra distribuido en la naturaleza, causando un amplio espectro de infecciones en los humanos, desde superficiales, como la queratitis, hasta infecciones fúngicas invasoras, caracterizándose por su resistencia a los antimicóticos. El objetivo de esta investigación fue determinar la susceptibilidad in vitro del CFS frente a cinco antifúngicos. Se utilizaron 30 aislados obtenidos de úlceras corneales provenientes de la colección de cultivos del Departamento de Micología del Instituto Nacional de Higiene “Rafael Rangel” y se siguió el protocolo descrito en el documento M38-A2 del Instituto de Estándares Clínicos y de Laboratorio (CLSI), determinando las Concentraciones Mínimas Inhibitorias (CMI) por microdilución en caldo para anfotericina B, itraconazol, posaconazol, voriconazol y fluconazol. En general, todas las drogas presentaron CMI elevadas, siendo voriconazol y anfotericina B los antifúngicos que exhibieron mejor actividad, mientras que itraconazol, posaconazol y fluconazol mostraron actividad nula. Los resultados de este estudio aportaron información importante sobre el comportamiento del CFS frente a los antifúngicos de uso común en la práctica clínica por primera vez en Venezuela. Es imprescindible que el médico conozca la actividad de estas drogas para poder tomar decisiones y orientar una conducta terapéutica adecuada.

The Fusarium solani Complex (FSC) is distributed in nature, producing a wide spectrum of infections in humans, from superficial ones such as keratitis, to invasive fungal infections, characterized by their resistance to antimycotics. The purpose of this investigation was to determine the in vitro susceptibility of the FSC to five antifungals. We used 30 isolates obtained from corneal ulcers kept at the culture collection of the Instituto Nacional de Higiene “Rafael Rangel” and we followed the protocol described in the M38-A2 document of the Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI) determining the Minimal Inhibitory Concentrations (MIC) by broth microdilution for amphotericin B, itraconazole, posaconazole, voriconazole and fluconazole. In general, all the drugs presented high MICs, voriconazole and amphotericin B being the antifungals which showed the best activity, while itraconazole, posaconazole and fluconazole showed a null activity. The results of this study provided, for the first time in Venezuela, important information about the behavior of the FSC towards commonly used antifungals. It is mandatory that physicians know the activity of these drugs in order to be able to take decisions and devise an guide an appropriate therapeutic management.

Susceptibilidad in vitro del complejo fusarium solani frente a cinco antifúngicos por concentración mínima inhibitoria según el método M-38A2 del CLSI / In vitro susceptibility of the fusarium solani complex against five antifungal agents by minimum inhibitory concentration according to CLSI method M-38A2

El complejo Fusarium solani (CFS) se encuentra ampliamente distribuido en la naturaleza, causando un amplio espectro de infecciones en los humanos, desde superficiales, como la queratitis, hasta infecciones fúngicas invasoras, caracterizándose por presentar una escasa actividad frente a los antifúngicos. El objetivo de esta investigación fue determinar la susceptibilidad in vitro del CFS frente a 5 antifúngicos según el método M38-A2 del Instituto de Estándares Clínicos y de Laboratorio (CLSI). Se utilizaron 30 aislamientos clínicos de úlceras corneales provenientes de la colección de cultivos del Departamento de Micología del Instituto Nacional de Higiene "Rafael Rangel" y del Hospital Universitario de Caracas. Se siguió el protocolo descrito en el documento M38-A2, que consistió en determinar las Concentraciones Mínimas Inhibitorias (CMI) por microdilución en caldo para anfotericina b (AB), itraconazol (IZ), posaconazol (POS), voriconazol (VZ) y fluconazol (FZ). En general, todas las drogas presentaron CMI elevadas, siendo VZ y AB los antifúngicos que mostraron mejor actividad, mientras que para IZ, POS y FZ la actividad fue nula. Los resultados de este estudio aportaron información importante sobre el comportamiento del CFS ante los antifúngicos de uso común en la práctica clínica por primera vez en Venezuela. Es imprescindible conocer la actividad de estas drogas para poder tomar decisiones y orientar una conducta terapéutica adecuada.

The Fusarium solani species complex (FSSC) is widely distributed in nature, causing a wide spectrum of human infections, from superficial as keratitis to invasive fungal infections, characterized by having low antifungal activity. The objective of this research was to determine the in vitro susceptibility of FSSC to 5 antifungal agents, according to the M38-A2 method of the Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI). It was used 30 clinical isolates of corneal ulcers, coming from the culture collection of the Departamento de Micología del Instituto Nacional de Higiene Rafael Rangel and the Hospital Universitario de Caracas. It was followed the protocol described in the document M38-A2 to determine the minimum inhibitory concentrations (MIC) by broth microdilution for amphotericin B (AB), itraconazole (IZ), (POS), voriconazole (VZ), and fluconazole (FZ). In general, all the drugs showed elevated MICs, being VZ and AB the drugs presenting the best antifungal activity, while IZ, POS and FZ showed no activity. The results of this study provided important information about the behavior of the FSSC against antifungal agents commonly used in clinical practice for the first time in Venezuela. It is essential to know the activity of these drugs in order to make decisions and to orient an appropriate therapeutic behaviour.

Estudio de Infecciones diseminadas por candida en pacientes con neutropenia febril asociada a enfermedades hemato-oncológicas / Study disseminated Candida infections in patients with febrile neutropenia associated with hemato-oncological diseases

Mundialmente, en las últimas dos décadas se ha observado un incremento en la frecuencia de las infecciones micóticas diseminadas, con alta morbi-mortalidad, particularmente importante en las infecciones por Candida. El objetivo es determinar la frecuencia de candidiasis diseminada, en pacientes con enfermedades hemato-oncológicas o aplasia medular que ingresaron a los servicios de medicina interna del hospital universitario de caracas, con fiebre y neutropenia, entre enero y septiembre de 2010, realizándose evaluación exhaustiva y tomándose muestras de sangre, además de otras muestras en caso de presencia de lesiones, para el diagnóstico micológico. Se evaluaron 48 pacientes en el período del estudio, diagnósticandose 21 casos (43,75%) de micosis diseminadas, catalogadas como infecciones probadas en 13 y probables en 8 casos. De las infecciones probadas 8 (38%) correspondieron a infecciones por Candida: en uno se aisló Candida albicans y en 7, Candida no albicans: 2 pacientes con candida tropicalis, 2 con candida glabatra y uno con candida guillermondii. Dos cepas fueron informadas como candida spp, y 5 por otros hongos. Las infecciones micóticas diseminadas contribuyen sustancialmente a la morbimortalidad de los pacientes con neutropenia, por lo tanto es fundamental la sospecha y diagnóstico temprano de estas entidades en los pacientes con cáncer de origen hematológico y aplasia medular.

Wordwide, there has been an increase in the incidence of disseminated fungal diseases during the last two decades, with high morbidity and mortality particularly importante in Candida infections. To determine the frequency of disseminated candidiasis in patients with hemato-oncological diseases or bone marrow aplasia and febrile neutropenia. A descriptive, prospective and analytical study was conducted. Patients with hemato-oncological diseases or bone marrow aplasia who were hospitalized at the internal medicine service of the hospital universitrio de caracas, with fever and neutropenia, between january and september, 2010 were included, making torough assessment and taking blook samples as well as other clinical specimen when other lesions were present, for mycological diagnosis. During the study period, 48 patients were evaluated. Twenty one cases were diagnosed (43.75%) as disseminated fungal disease. They were classified as proven in 13 cases and probable in 8. From the proven diseases, 8 (38%) corresponded to Candida infections: in one, Candida albicans was isolated and in 7, Candida non-albicans: 2 patients with Candida tropicalis were found, 2 with Candida glabrata and one with Candida guillermondii. Two were reported as Candida spp. In 5 patients other fungi were found. Dissemiated fungal infections substantially contribute to morbidity and mortality in neutropenic patients. For this reason, awareness and early diagnosis of this disease are crucial are crucial in patients with hematological cancer and bone marrow aplasis.

Modalidades de la Prueba del Tubo Germinal / Modalities of the Germ Tube Test

Las infecciones por levaduras del género Candida, en la actualidad son cada vez más frecuentes, particularmente cuando se presentan condiciones que inmunosuprimen al paciente, como el Síndrome de Inmunodeficiencia Adquirida y el uso de quimioterápicos e inmunomoduladores, entre otros. Candida albicans es la especie del género que se aísla con mayor frecuencia. Entre las pruebas de identificación para las especies de levaduras del género Candida se encuentran la evaluación de las características macroscópicas de las colonias, pruebas físiológicas, como la prueba del tubo germinal, termotolerancia, auxanograma, zimograma, ureasa y resistencia a la cicloheximida, entre otras. De estas, la prueba del tubo germinal es una prueba sencilla y rápida que puede ejecutarse de varias formas. De manera tradicional se ha realizado en tubo y con suero, aunque también se puede realizar en placa. En este trabajo se revisan las diversas formas de realizar esta prueba y se describe una modalidad adicional, producto de la experiencia diaria en el trabajo de laboratorio, con la ventaja del ahorro de material de vidrio y tiempo.

At the present time, the infections by yeasts of the genera Candida, are more and more frequent, particularly when exists inmunosuprimen conditions, like the Acquired Immunodeficiency Syndrome, the use of quimioterapics and inmunomodulators, among others. Candida albicans is the species most frequently isolated from clinical samples. Among the identification tests of the yeasts species of the genera Candida are the evaluation of colony characteristics, physiological and biochemical tests like the germ tube, termotolerancy, auxonogram, zimogram, urease, resistance to cicloheximide, among others. The germ tube test is a simple and fast test, of which several forms exist to carry out it. The traditional way has been made in tube, with serum, although it´s possible to be made in plate. Here we present the modality to directly make the test of the germ tube between slide and slide cover, with advantage of time saving and glass material saving.