Desenvolvimento morfológico dos ovários em embriões e fetos bovinos da raça Nelore / Morphological development of the ovaries in embryos and fetuses of Nelore breed

Investigaram-se os eventos morfológicos relacionados ao desenvolvimento pré-natal de ovários de 81 embriões e fetos da raça Nelore, coletados em frigoríficos, com idades variando de 26 a 240 dias pós-fecundação. Observou-se formação da crista gonádica e presença de células germinativas em seu interior aos 29 e 34 dias, respectivamente. As oogônias e folículos primordiais, ao contrário dos folículos em crescimento, apresentaram diferenças significativas de diâmetro nos vários períodos estudados. Verificou-se correlação positiva (P<0,05) entre o diâmetro das oogônias e de seus núcleos, bem como entre o diâmetro dos folículos primordiais e em crescimento com seus oócitos e respectivos núcleos. A gônada apresentou-se completamente formada aos 40 dias. Folículos primordiais, em crescimento e antrais surgiram, aproximadamente, aos 95, 140 e 180 dias, respectivamente. Na raça Nelore, a oogênese tem início e duração semelhante à de raças taurinas, mas apresenta como peculiaridade a antecipação do surgimento da foliculogênese.

Effect on insulin-like growth factor-1 during in vitro oocyte maturation and in vitro culture of bovine embryos

Avaliaram-se o efeito do IGF-I na maturaçäo in vitro (MIV) (experimento I) e no desenvolvimento embrionário (DE) (experimento II) de oócitos bovinos fecundados in vitro, quanto às taxas de clivagem (TC), de blastocistos (TB) e de eclosäo(TE). Para MIV, complexos cumulus-oócitos imaturos foram cultivados em meio TCM-199 suplementado com HEPES, bicarbonato e piruvato de sódio, aditivos, soro fetal bovino (meio B-199) e gonadotrofinas 14U/ml de PMSG e 7U/ml de hCG. Para o desenvolvimento embrionário, os oócitos/zigotos foram cultivados em meio B-199 com células epiteliais do oviduto bovino em suspensäo sob óleo de silicone. As condiçöes de cultivo in vitro para ambos os experimentos seguiram os tratamentos: 1- meio B-199 + 200 ng/ml IGF-I; 2- B-199 + 100 ng/ml IGF-I; 3- B-199 + 50 ng/ml IGF-I; 4- B-199 + 10 ng/ml IGF-I; 5- B-199 + 0 ng/ml IGF-I. Todas as culturas foram realizadas a 38,5§C em atmosfera com 5(porcento) de CO2 e os dados foram analisados pelo teste do qui-quadrado. No experimento I, näo houve diferença (P>0,05) entre os tratamentos quanto às TC, TB e TE, quanto ao meio de MIV foi suplemento com IGF-I. No experimento II, a adiçäo de IGF-I ao meio de DE resultou em aumento na TC (P<0,05) mas näo influenciou a TB e a TE. A adiçäo de 200 ng/ml de IGF-I ao meio DE melhorou a TC (71,1(porcento)) quando comparada com a TC dos grupos de 100 ng/ml de IGF-I (57,6(porcento)) ou controle (56,7(porcento)), entretanto näo houve diferença quando comparada com a dos grupos de 50 ng/ml (69,4(porcento)) ou 10 ng/ml (73,1(porcento)) de IGF-I. Näo houve efeito benéfico na adiçäo de 10 a 200 ng/ml de IGF-I nos meios de MIV e de DE com relaçäo ao desenvolvimento de embriöes produzidos a partir de oócitos maturados e fecundados in vitro

Detecçäo de subfertilidade em vacas leiteiras por meio de medidas anatômicas da regiäo pélvica e do aparelho genital / Evaluation of subfertility in dairy cows by measuring the pelvis and the genital tract

O objetivo deste estudo foi mensurar as regiöes que compöem a garupa da vaca leiteira, com aparelho desenvolvido para esse fim, e avaliar o efeito dessas variáveis na contaminaçäo intra-uterina e na eficiência reprodutiva (intervalos parto-primeiro cio e parto-primeira inseminaçäo, número de serviços por concepçäo e período de serviço). Foram usadas 252 vacas Holandesas, paridas há mais de 30 dias e näo inseminadas. Realizaram-se medidas anatômicas da regiäo pélvica e do aparelho genital e cultivo bacteriológico de material uterino. A influência das variáveis independentes (mensuraçöes) sobre a presença de contaminantes intra-uterinos foi analisada por meio de regressäo logística, a da presença de contaminantes intra-uterinos sobre a eficiência reprodutiva, por análise de variância, e a das variáveis independentes (mensuraçöes) sobre a eficiência reprodutiva por meio de regressao linear múltipla. A presença de contaminantes intra-uterinos näo foi influenciada por nenhuma das variáveis. Staphylococcus sp. (29,6 por cento) foi o microrganismo mais encontrado no material uterino, seguido por Actinomyces pyogenes (26,0 por cento), Streptococcus sp. (22,2 por cento) e coliformes (22,2 por cento), porém essa contaminaçäo nao teve efeito negativo nos índices reprodutivos. Das medidas anatômicas avaliadas, as que influenciaram as características reprodutivas foram: abertura do ílio (maior abertura menor eficiência reprodutiva), localizaçäo do óstio cranial da cérvice (quanto mais abdominal, piores os índices reprodutivos) e presença de urovagina (influência negativa na taxa de concepçäo)

Remoçäo do folículo dominante por aspiraçäo transvaginal guiada por ultra-som e resposta superovulatória em vacas Nelore / Dominant follicle removal by ultrasound guided transvaginal aspiration and superovulatory response in Nellore cows

O presente estudo analisou o significado fisiológico do folículo dominante (FD) e sua remoçäo na resposta superovulatória de 42 vacas Nelore e testou a hipótese de que o número de folículos subordinados pequenos (3-8mm) poderia ser usado como critério único para a avaliaçäo da presença ou ausência de um FD nos ovários. Exames ultra-sonográficos foram realizados dois dias antes do início do tratamento superovulatório (D0) e as vacas foram divididas em três grupos: grupo sem FD (SFD), grupo com FD (FD) e grupo com um FD aspirado (FDA). A resposta superovulatória das doadoras näo diferiu entre os grupos, mas a taxa de viabilidade embrionária foi maior nos grupos SFD (69,40 por cento) e FDA (68,99 por cento) grupos, comparados ao FD (48,54 por cento). O número de estruturas näo fertilizadas näo diferiu entre os grupos SFD e FD nem entre SFD e FDA, mas foi maior no grupo FD comparados ao FDA. Pode-se concluir que, em vacas Nelore, a determinaçäo do número de folículos subordinados é um critério seguro para a avaliaçäo da presença ou ausência de um FD nos ovários, mas erros poderiam ser evitados se apenas folículos de 4-8mm fossem considerados, e que a presença de um FD no início da superovulaçäo reduz a taxa de viabilidade embrionária e sua remoçäo por aspiraçäo transvaginal guiada por ultra-som induziu taxas de viabilidade embrionárias semelhantes àquelas observadas na ausência de um FD

Avaliaçäo das condiçöes de maturaçäo oocitária e do efeito do reprodutor na produçäo in vitro de embriöes bovinos / Evaluation of oocyte maturation conditions and bull effect on the in vitro bovine embryo production

Avaliaram-se as condiçöes de cultura para maturaçäo dos oócitos (Exp. I) e o efeito do reprodutor (Exp. II) sobre as taxas de clivagem (TC) e de mórulas e blastocistos (MO/BL) produzidos in vitro. Oócitos imaturos foram submetidos a maturaçäo in vitro sob diferentes condiçöes: meio B-199, acrescido de 5 por cento de soro de vaca em estro (SVE), 5 por cento de soro fetal bovino (SFB) e células da granulosa (T1 subscrito/Exp. I) ou meio B-199, acrescido de 10 por cento de SFB, 14 UI/ml de PMSG e 7 UI/ml de hCG (T2 subscrito/Exp I). Após 24 h de cultura, os oócitos maturos foram inseminados com sêmen descongelado de dois reprodutores (R1 subscrito e R2 subscrito/Exp. II) e, após 48 h de incubaçäo, os embriöes de 2 e 4 células foram transferidos para placas de cultivo in vitro, onde permaneceram em cultura por mais 9 dias. No Exp. I, os oócitos de T1 subscrito e T2 subscrito foram inseminados com sêmen do R1 subscrito/Exp. II. No Exp. II, os oócitos do T1 subscrito/Exp. I foram inseminados com sêmen de R1 subscrito e R2 subscrito/Exp. II. No Exp. I, a TC foi superior (p<0,0l) para T2 subscrito, quando comparado com T1 subscrito. A produçäo de MO/BL näo foi diferente (p>0,05) entre tratamentos. No Exp. II, a TC e a taxa de MO/BL diferiram (p<0,05) para cada reprodutor. A adiçäo de hormônios no meio de maturaçäo, embora näo tenha interferido na produçäo de embriöes, parece ser um procedimento mais prático que o uso de células da granulosa. A utilizaçäo de sêmen de diferentes reprodutores afetou o subseqüente desenvolvimento embrionário in vitro

Proteínas ligantes do insulin-like growth factor (IGFBPs) e dominância folicular em vacas Bos taurus indicus puras e cruzadas / Insulin-like growth factor-binding proteins and follicular dominance in Bos taurus indicus pure and crossed cows

O objetivo deste estudo foi identificar um marcador bioquímico de folículos bovinos com diâmetro maior do que 10 mm, o qual poderia ser utilizado para identificar folículos dominantes nesta espécie. Líquido folicular era aspirado de folículos com diâmetros menores do que 5 mm, entre 5 e 10 mm e maiores do que 10 mm, provenientes de ovários de 37 fêmeas bovinas abatidas. Após aspiraçäo, o líquido folicular (LF) era acondicionado em ependorfs etiquetados e congelados. Os padröes eletroforéticos em SDS-PAGE das proteínas do LF foram deteminados e verificou-se que os folículos com diâmetro maior do que 10 mm apresentaram um polipeptídeo com PM entre 39 e 43 KDa identificado como a proteína ligante de IGF-3 (IGFBP-3), o qual näo foi observado em folículos com diâmetro menor do que 5 mm e entre 5 e 10 mm. Este estudo sugere que este polipeptídeo possa ser utilizado como marcador bioquímico de folículos maiores do que 10 mm

Relationship between plasma 17-beta estradiol on the day of estrus and number of viable embryos in Bos indicus (Nellore) cows superovulated with FSH

Thirteen cows, Bos indicus, of the Nellore breed were superovulated with 22 mg of follicle stimulating hormone (FSH) administered by intramuscular route during four consecutive days (D10, D11, D12 and D13), starting on the 10th day of the estrous cycle (day 0 = estrus). Prostaglandin (PGF2 alpha, 1.0 mg, im) was administered on D12, 48 h after the first FSH injection, for the induction of estrus on D14, when artificial insemination was performed. Seven days later (D21 of the cycle), embryos were collected, and evaluated, and the ovarian response was estimated on the basis of number of corpora lutea determined by rectal palpation. Blood samples were obtained for the determination of plasma 17-beta estradiol on D10, D11, D12, D13, D14 and D21 and plasma progesterone on D14 by RIA. The donors were divided into two groups according to progesterone levels on D14, the day of the induced estrus (GI: P4 < or = 1.00 ng/ml, N = 5 and GII: P4 > 1.00 ng/ml, N = 8). A linear positive correlation was observed between plasma 17-beta estradiol concentration on the day of estrus and viable embryo number. We conclude that plasma 17-beta estradiol and progesterone concentrations on the day of estrus can be used to predict the viability of embryos recovered from Nellore cows superovulated with FSH.