ABSTRACT
Introducción: Las biopelículas constituyen un factor clave en el desarrollo de enfermedades infecciosas y la resistencia a fármacos para su control. Nuevas estrategias terapéuticas incluyen productos naturales como agentes antibiopelículas. Sin embargo, la comparación de los resultados suele ser difícil debido a la falta de homogeneidad y estandarización en los métodos empleados para estudiar la formación de biopelículas in vitro. Objetivo: Estandarizar un ensayo de adhesión en microplaca de Escherichia coli para su uso en el cribado de potenciales agentes antibiopelículas. Métodos: Se utilizó el método de adherencia en microplaca y la tinción con violeta cristal. Se evaluó la influencia de condiciones experimentales como la concentración bacteriana, el medio de cultivo y el tiempo de incubación. Resultados: Se identificaron como condiciones óptimas para la formación de biopelículas: el medio Luria Bertani (LB), la concentración bacteriana a 105 UFC/mL y un tiempo de incubación de 24 h. Conclusiones: Los resultados mostraron que las condiciones de cultivo influyen en la formación de biopelículas. Se determinaron las condiciones de cultivo óptimas para la formación de biopelículas de E. coli, que podrían emplearse en futuros estudios acerca del efecto de productos naturales sobre la inhibición o destrucción de biopelículas.
Introduction: Biofilms are a key factor in the development of infectious diseases and drug resistance for their control. New therapeutic strategies include natural products as anti-biofilm agents. However, comparing results is often difficult due to the lack of homogeneity and standardization of the methods used to study biofilm formation in vitro. Objective: To standardize an Escherichia coli microplate adhesion assay for potential anti-biofilm agents screening. Methods: The microplate adhesion method and crystal violet staining were used. The influence of experimental conditions such as bacterial concentration, culture medium, and incubation time were evaluated. Results: Optimal conditions for biofilm formation included: Luria Bertani (LB) medium, bacterial concentration at 105 CFU/mL, and an incubation time of 24 hours. Conclusions: The results showed that culture conditions influence biofilm formation. Optimal culture conditions for the formation of E. coli biofilms were determined, which could be used in further studies on the effect of natural products on the inhibition or destruction of biofilms.
Subject(s)
HumansABSTRACT
Se presenta una técnica para la optimización del medio de cultivo Caldo Triptona Soya suplementado con suero equino para el crecimiento de Gardnerella vaginalis. Se utilizó un diseño experimental 2² donde se evaluó la influencia de dos componentes del medio y un diseño compuesto central para mejorar los rendimientos celulares. Con la mejor variante de este estudio se realizaron corridas para caracterizar el crecimiento bacteriano empleando diferentes estimaciones. Se obtuvo que la dirección hacia los mayores crecimientos se localizó hacia mayores concentraciones de triptona soya y suero equino. La variación en la concentración de los componentes evaluados no influyó en la expresión de las proteínas antigénicas dado por los perfiles electroforéticos obtenidos.
The optimization of the cultural medium Soy Triptone Broth supplemented with equine serum to grow Gardnerella vaginalis is presented in this paper. An experimental design 2² was used in which the influence of two components of this medium was evaluated; and a central design aimed at improving cell performances. With the best variant of this study, the runs allowed characterize the bacterial growth using different estimations. The greatest growths were observed in higher concentrations of soy triptone and equine serum. The variation of the evaluated component concentrations did not have an impact on the expression of antigenic proteins given by the obtained electrophoretic profiles.
ABSTRACT
Introducción: la vaginosis bacteriana constituye una de las infecciones ginecológicas más prevalentes, asociada a afecciones obstétricas y ginecológicas como son: partos prematuros, bajo peso al nacer, rotura prematura de membranas ovulares, endometritis posparto, inflamación pélvica y riesgo de infertilidad, entre otras. Objetivo: incrementar la calidad del diagnóstico de vaginosis bacteriana. Métodos: se evaluó una técnica de aglutinación por látex para el diagnóstico de Gardnerella vaginalis, empleando un reactivo elaborado en la planta de Medios Diagnosticadores del Centro Nacional de Sanidad Agropecuaria (CENSA), a través del estudio de 500 muestras de exudados vaginales de mujeres que acudieron al Departamento de Microbiología del Hospital Docente Materno Infantil Diez de Octubre, durante los meses de febrero a julio de 2004. Resultados: la técnica evaluada mostró una sensibilidad de 98,05 por ciento y una especificidad de 89,02 por ciento, al compararla con 3 de los 4 criterios propuestos por Amsel y otros en 1983 para el diagnóstico de la vaginosis bacteriana, complementado con la técnica de coloración de Gram. El valor global de la prueba fue de 91,80 por ciento. Las pacientes cuyas edades oscilaron entre los 20 y 24 años mostraron la mayor incidencia a la infección con 28,04 por ciento de positividad al patógeno. Se diagnosticó la presencia de Gardnerella vaginalis mediante la técnica de látex en 37,8 por ciento de las muestras estudiadas. Conclusión: la técnica resultó rápida y sencilla; se pudo realizar en las propias consultas de ginecología por el personal paramédico y con ello establecer el tratamiento específico el mismo día.
Background: Bacterial vaginosis is one of the most prevailing gynaecological infections associated to obstetric and gynaecological problems such as preterm deliveries, low birhtweight, premature rupture of ovular membranes, postpartum endometritis, pelvic inflammation and risk of sterility, among others. Objective: to increase the quality of diagnosis of bacterial vaginosis. Methods: latex agglutination technique was evaluated for Gardnerella vaginalis diagnosis by using a reagent produced at the Diagnosing Media plant of the National Center of Agricultural Health(known as CENSA) and 500 vaginal smears from females who went for testing to the microbiology department of Diez de Octubre maternal and child hospital from February to July,2004. Results: the evaluated technique showed 98.05 percent sensitivity and 89.02 percent specificity rates when compared to three of the four Amsel et al´s criteria for bacterial diagnosis in 1983, supplemented by the Gram staining method. The overall value of this test was 91.80 percent. The patients aged 20-24 years showed the highest incidence rate of infection, with 28,04 percent positive samples to this pathogen. Gardnerella vaginalis was detected in 37.8 percent of the studied specimens through the latex technique. Conclusion: this technique was rapid and simple; it was performed at the gynaecological service offices by the paramedic staff, and thus, the specific treatment to be followed for this illness was quickly determined.