ABSTRACT
SKF525A, an inhibitor and inducer of cytochrome P450, was tested on different developmental stages of Trypanosoma cruzi. Growth, motility and structure of epimastigotes, motility and infectivity of trypomastigotes, and infectivity of trypomastigotes to Vero cells in culture were abolished by the drug at 10-100 muM concentration. When blood from infected mice was treated with the drug, and used to infect 8 day-old-mice, no parasites were observed at 0.6-1 mM, and all animals survived. Blood cell morphology was well preserved, and the sleeping time of pentobarbital-treated mice inoculated with the same amount of drug was not increased. The present results suggest that SKF525A or other related inhibitors of cytochrome P450 coned be tested as an additive for blood sterilization in blood banks.
Subject(s)
Animals , Male , Mice , Enzyme Inhibitors/pharmacology , Proadifen/pharmacology , Trypanocidal Agents/pharmacology , Trypanosoma cruzi/drug effects , Cells, Cultured , Cytochrome P-450 Enzyme System/drug effects , Mice, Inbred BALB C , Pentobarbital/pharmacology , Time Factors , Trypanosoma cruzi/enzymology , Trypanosoma cruzi/ultrastructure , Vero Cells/drug effectsABSTRACT
Diferentes fracciones subcelulares de epimastigotes de T.cruzi fueron ensayadas en su capacidad de inducir protección o agresión en animales experimentales. La fracción flagelar (F) tuvo las mejores propiedades protectoras, sin efectos agresivos sobre los tejidos. Se prepararon varios anticuerpos monoclonales contra esta fracción. Dos de ellos, FCH-F8-1 y 4, mostraron capacidad de neutralizar la infectividad de tripomastigotes sanguíneos, de producir la lisis mediada por complemento de tripomastigotes de cultivo y de reconocer antígenos de la superfície de ambas formas epi y tripomastigotes. El anticuerpo FCH-F8-1, reconoce por inmunoprecipitación, una proteína de 85 kDa en tripomastigotes, mientras que en "blotting" reaccionó con una molécula de 43 kDa, en ambas formas del parásito. El otro anticuerpo, FCH-F8-4 reaccionó por esta última técnica, con varias proteínas de peso molecular entre 50 y 150 kDa, en epimastigotes y sólo con dos (15 y 48 kDa) en tripomastigotes. Ratones inmunizados con antígenos purificados por cromatografia de afinidad usando FCH-F8-4, fueron protegidos contra el desafio de formas infectantes. En una biblioteca de ADNc de epimastigotes de T. cruzi construída en el vector I gt11 se detectaron varios clones, tres con FCH-F8-4 y dos con FCH-F8-1. Dos clones, uno de cada grupo fueron estudiados, y (FCH-F8-1) 1 y (FCH-F8-4) 1. El tamaño de los insertos para ambos fue de 150 pares de bases y utilizados como sondas detectaron ARNm de epimastigotes de 3,5 y 5,0...