Proliferaçao, diferenciaçao e caracterizaçao de progenitores hemopoieticos GM-CFC in vitro / Proliferation, differentiation and characterization of GM-CFC heamopoietic progenitors in vitro

A detecçao de progenitores hemopoieticos, de acordo com a metodologia primeiramente descrita por Fauser & Messner, envolve a cultura de celulas hemopoieticas de diferentes tecidos em meio de cultura suplementado por fatores de crescimento em uma matriz semi-solida. Usando-se a tecnica de clonaçao em agar, populaçoes distintas de celulas progenitoras de GM-CFC de medula ossea de individuos higidos puderam ser detectadas e definidas em sua linhagem hemopoietica pela capacidade de originar colonias de aspecto caracteristico em meio semi-solido, apos um periodo de incubaçao de 9-11 dias, a 37 graus C, em atmosfera umida, com 5-10 por cento de CO2. Os tipos de colonias de GM-CFC observados foram de tamanho variado, brancas, refringentes, compactas ou espalhadas. Celulas hemopoieticas constituintes dessas colonias foram morfologicamente identificadas apos coloraçao de May-Grunwald-Giemsa. A natureza mieloide das celulas geradas nessas colonias confirmou-se por reaçoes citoquimicas de Peroxidase, Sudam Black B, Esterase Nao-especifica (ENE) e Esterase do alfa-naftil AS-D Cloroacetato (EACA). A aplicaçao destes ensaios na rotina hematologica permitira o estudo de numero significativo de disturbios hemopoieticos ou associados a hemopoiese, controle sobre os procedimentos de congelamento/descongelamento de medulas para transplante, detecçao de marcadores cromossomicos, etc