O processo inflamatório, a resposta imune in situ e a morte neuronal em sistema nervoso central de pacientes com raiva transmitida por morcegos / Inflammatory process, in situ immune response and neuronal death in central nervous system of patients with rabies transmitted by bats

A raiva é uma doença do sistema nervoso central que é quase invariavelmente fatal. Apesar de causar cerca de 60.000 mortes/ano, a raiva ainda permanece uma doença negligenciada na maioria dos países, principalmente naqueles em desenvolvimento. O objetivo do nosso estudo foi verificar nos microambientes meningeal, perivascular e intraparenquimatoso do sistema nervoso central, o processo inflamatório, a resposta imune do hospedeiro e a morte dos neurônios frente à infecção rábica transmitida por morcegos. Verificamos que a raiva humana transmitida por morcegos é uma meningoencefalomielite. Através de reação imuno-histoquímica caracterizamos e quantificamos in situ a distribuição do antígeno viral, o fenótipo de células inflamatórias, as células expressando citocinas pró inflamatórias, citocinas representativas de padrão Th1 e Th2 e células em apoptose. O antígeno viral foi encontrado difusamente no parênquima cerebral, em maior abundância em neurônios, não diferindo sua distribuição em relação as regiões cerebrais. As células da glia, em especial os astrócitos, estavam imunomarcadas com o antígeno da raiva, assim como as células endoteliais e células mononucleadas da luz vascular. Esses achados contribuíram para a hipótese da ocorrência de uma via hematogênica alternativa de disseminação viral, através da infecção de células endoteliais pelo vírus, posterior infecção de astrócitos e finalmente infecção de neurônios. A expressão significativa de IL-12 nos pacientes rábicos provavelmente traduz imunidade de base preservada. Identificamos, outrossim, falta de resposta efetiva das células NK e comprometimento da resposta imune adaptativa sequencial, demonstrada pela depleção de linfócitos TCD4+ no parênquima cerebral, prejuízo da atividade citotóxica dos linfócitos TCD8+ com proporcionalmente baixa expressão de granzima e expressão rarefeita de IFN-g e IL-2r. Essa situação deve ser reflexo da manipulação do vírus sobre a resposta imune inata e adaptativa...

Viral disease of central nervous system almost invariable fatal, rabies causes about 60.000 deaths yearly, and still remain a neglected disease in most countries, specially in developing ones. We study the meningeal, perivascular and parenquimal environment in central nervous system from patients who dies after bat transmitted rabies, looking for the inflammatory process, host immune response and neuronal death. We show that human rabies transmitted by bats is a meningoencephalomyelitis. Immunohistochemistry allows the in situ quantification of viral antigen distribution, inflammatory cellular phenotype, expression of cytokines representing both Th1 and Th2 profile and pro-inflammatory and cell apoptosis. Viral antigen was found disseminatted in cerebral parenquima, more abundant in neurons, without cerebral area preference. Glial cells, specially astrocytes, were immunostained with rabies antigen, as well as endothelial and vascular mononuclear cells. These findings contributed for an alternative hypothesis of the occurrence of hematogenic viral dissemination, through viral infection or passage by endothelial cells, followed by astrocyte infection, and finally reaching neurons. IL-12 significant expression in central nervous system from rabies patients probably reflect preservation of immunity. The lack of effective NK cells could compromise adaptive immune response, demonstred by TCD4+ lymphocytes depletion in cerebral parenquima, ineffective TCD8+ cytotoxic activity with low granzyme expression and low expression of IFN-g and IL-2r. This situation reflects viral effect on host innate and adaptive immune response leading to an ineffective response for viral clearance. High pro-inflammatory cytokine expression, IL- 1b, IL-6 and TNF-a, contribute for neuronal damage, with predominant Th2 cytokine profile in central nervous system in rabies patients, with high expression of IL-4 and IL-10. Increased TGF-b expression also shows an immune suppressor...

Portal cd4+ and cd8+ t lymphocyte correlate to intensity of interface hepatitis in chronic hepatitis C

BACKGROUND: The pathogenesis of chronic hepatitis C is still a matter of debate. CD4+ and CD8+ T lymphocytes (TL) are typically observed within the portal and periportal spaces of affected livers, but their functional role in hepatitis C progression has not been fully elucidated. METHODS: CD4+ and CD8+ TL were quantified by immunohistochemistry in portal and periportal spaces of 39 liver biopsies from patients with chronic hepatitis C. They were associated to demographic data, histological parameters, laboratory findings of patients and hepatitis C genotypes. RESULTS: There was high numbers of CD4+ and CD8+ TL from which the density of CD4+ T was higher than CD8+ TL in portal and periportal spaces. CD4+ and CD8+ TL were directly correlated to intensity of interface hepatitis. CD8+ TL correlated to serum enzyme levels. CONCLUSION: The high numbers of CD4+ and CD8+ TL in portal and periportal spaces and their correlation to interface hepatitis suggest that hepatitis C evolution depends on the action of intrahepatic T lymphocytes, lending support to the notion of an immune-mediated mechanism in the pathogenesis of chronic hepatitis C.

INTRODUÇÃO: A patogênese da hepatite C crônica ainda está em discussão. Sabe-se que linfócitos T (LT) CD4+ e CD8+ são tipicamente observados no espaço portal e peri-portal de pacientes com hepatite C crônica, mas o conhecimento exato de suas ações no fígado, bem como sua influência na progressão da doença hepática ainda estão em discussão. MÉTODOS: Os LT CD4+ e T CD8+ foram quantificados por imunohistoquímica nos espaços porta e peri-portais em 39 biópsias hepáticas de pacientes cronicamente infectados pelo vírus da hepatite C. Esses dados foram associados com os dados demográficos, as alterações histológicas, os achados laboratoriais dos pacientes com hepatite C e com os genótipos do vírus da hepatite C. RESULTADOS: Houve grande quantidade tanto de LT CD4+ como de CD8+, sendo que houve maior densidade de LTCD4+ do que CD8+ nos espaços portal e peri-portal. Tanto o número de linfócitos T CD4+ como de CD8+ foram diretamente relacionados com a intensidade da hepatite de interface. Os linfócitos T CD8+ foram estatisticamente relacionados às enzimas hepáticas. CONCLUSÃO: O encontro de numerosos linfócitos T CD4+ e linfócitos T CD8+ no espaço-portal e peri-portal e sua correlação com a hepatite de interface sugerem que a evolução da hepatite C dependa da ação dos linfócitos T intra-hepáticos, ou seja, há um mecanismo imuno-mediado na patogênese da hepatite C crônica.

Immunohistochemical study of the cellular immune response in human Pneumocystis carinii pneumonia

OBJETIVO: Trabalhos experimentais demonstram que as defesas do hospedeiro frente ao Pneumocystis carinii incluem interações complexas entre as células imunes, principalmente linfócitos TCD4+ e macrófagos alveolares. Sendo esse um agente importante associado às imunodeficiências, nosso objetivo foi caracterizar a resposta inflamatória em pulmão de necrópsias de pacientes com AIDS. MÉTODOS: Foram selecionadas 25 necrópsias com diagnóstico de pneumonia por Pneumocystis carinii para pesquisa imuno-histoquímica de linfócitos TCD4+, TCD8+, macrófagos CD68+, células NK CD57+ e células com expressão de TNF-alfa. As células imunomarcadas foram quantificadas e analisadas estatisticamente. RESULTADOS: Todos os espécimes evidenciaram elevado parasitismo na luz dos alvéolos. Observou-se espessamento septal com infiltrado inflamatório constituído predominantemente por linfócitos e macrófagos. Houve diminuição no número de linfócitos TCD4+ e aumento de linfócitos TCD8+, macrófagos e células NK. No septo alveolar freqüentemente observaram-se células expressando TNF-alfa. CONCLUSÕES: A imunossupressão relacionada à AIDS induz a diminuição de linfócitos TCD4+ e favorece a permanência de elevado parasitismo. Os componentes celulares que caracterizam o infiltrado inflamatório contribuem para os danos irreversíveis no pulmão desses pacientes.