ABSTRACT
Este estudo teve por objetivo implantar um protocolo de amplificação genômica, precedida de transcrição reversa (RT-PCR) para o gene da nucleoproteína do vírus da raiva, para a utilização dessa metodologia em laboratórios onde são realizadas investigações para a detecção do vírus rábico. Foram utilizadas 50 amostras de tecido encefálico de animais (44 bovinos, 5 eqüinos e 1 quiróptero) oriundos do Estado do Rio de Janeiro, positivos por imunofluorescência direta e/ou prova biológica para o vírus rábico. A extração do RNA foi feita a partir da suspensão a 10 por cento em PBS pH7,2 do tecido encefálico utilizando-se a metodologia de TRIzolTM (Life Technologies) e o protocolo de RT-PCR descrito por Heaton et al. (1997), incluindo algumas modificações. Dentre as 50 amostras analisadas, 50 foram positivas pela prova biológica e pela RT-PCR e destas, 49 foram positivas pela imunofluorescência direta. Estes resultados demonstram ser este protocolo de RT-PCR uma metodologia sensível, específica, rápida e extremamente valiosa, podendo ser utilizada como rotina em laboratórios que trabalham no diagnóstico de vírus rábico.
Subject(s)
Animals , Diagnosis , Polymerase Chain Reaction , Rabies virus , Transcription, Genetic , Cattle , Chiroptera , HorsesSubject(s)
Guinea Pigs , Animals , Feces/microbiology , Genes, Viral , Intestines/microbiology , RNA, Viral , Rotavirus/genetics , Rotavirus/ultrastructureABSTRACT
Evidência sorológica de infecçäo por rotavírus em uma colônia de cobaios - Anticorpos reagindo com rotavírus símio SA11 foram demonstrados por ensaio imuno-enzimático (EIE) e por "Western blot assay" (WBA) em soros de cobaios mantidos para fins experimentais na Fundaçäo Oswaldo Cruz, Rio de Janeiro, Brasil. A proporçäo de animais soro-positivos e os níveis de anticorpos subiram rapidametne em 1985, mantiveram-se altos em 1986 e baixaram em 1987. Näo foram observados sinais de doença coincidente com a elevaçäo de anticorpos. Resultados de WBA sugerem que o rotavírus responsável pela resposta sorológica pertence ao subgrupo do grupo A
Subject(s)
Guinea Pigs , Animals , Antibodies, Viral/analysis , Rotavirus/immunology , Disease Susceptibility , Immunoenzyme TechniquesABSTRACT
Preparaçöes da amostra SA11 de rotavírus símio mantidas em diferentes laboratórios foram comparadas entre si por eletroforese do genoma viral em gel de poliacrilamida. Diferenças na migraçäo dos segmentos genômicos 4,5 e 7 permitiram a classificaçäo de oito preparaçöes virais em quatro tipos eletroforéticos