ABSTRACT
Abstract Background: The white spot syndrome virus (WSSV) causes high mortalities in aquaculture. The use of immunostimulants increases animal resistance. Objective: To evaluate the WSSV infection percentage and the immunostimulant effect of lactic acid bacteria and yeast (MI= microbial immunostimulants) on WSSV infected Litopenaeus vannamei. Methods: A bioassay was performed for 33 d, with treatments in triplicate. The MI was added to the feed at 8.5 mg/kg feed and offered to shrimp (9.9 ± 3.1 g) daily, every 2 days, or every 3 days. Shrimp were infected with WSSV at 9 and 19 days. The expression of four immune system-related genes was studied using qRT-PCR. Results: No significant differences were observed in growth and survival among treatments. At the end of the bioassay, WSSV infection percentage (low viral load) decreased 8.3 and 25% in treatments III and IV as compared to the control group. Treatments with MI showed significant differences in the relative expression of LvToll, transglutaminase, and prophenoloxidase genes when MI was offered daily as compared to the control group. The MI did not regulate the expression of the superoxide dismutase gene. The WSSV infection percentage decreased when feed with MI was offered every 3 d. Conclusion: The MI decrease WSSV infection percentage in L. vannamei infected with low viral load when it is offered every three days. The MI up-regulates LvToll, Tgase, and proPO genes when it is offered daily. Further research is needed regarding prophylactic treatment with microbial immunostimulants against WSSV in commercial shrimp farms.
Resumen Antecedentes: El virus del síndrome de la mancha blanca (WSSV) ocasiona alta mortalidad en acuacultura. El empleo de inmunoestimulantes incrementa la resistencia de los animales. Objetivo: Evaluar el porcentaje de infección de WSSV y el efecto inmunoestimulante de bacterias ácido lácticas y levadura (MI= inmunoestimulantes microbianos) en Litopenaeus vannamei infectado con WSSV. Métodos: Se realizó un bioensayo durante 33 días con tratamientos por triplicado. Se agregó MI al alimento (8,5 mg/kg de alimento), suministrandolo al camarón (9,9 ± 3,1 g) diariamente, cada 2, o cada 3 días. Los camarones se infectaron con WSSV a los 9 y 19 días. Se estudió la expresión de cuatro genes relacionados con el sistema inmune utilizando qRT-PCR. Resultados: No hubo diferencias significativas en el crecimiento y la sobrevivencia entre los tratamientos. Al final del bioensayo, el porcentaje de infección de WSSV (baja carga viral) disminuyó un 8,3 y un 25% en los tratamientos III y IV en comparación con el grupo control. Los tratamientos con MI mostraron diferencias significativas en la expresión relativa de los genes LvToll, transglutaminasa, y profenoloxidasa cuando se suministró MI diariamente en comparación con el grupo control. Los MI no regularon la expresión del gen de la superóxido dismutasa. El porcentaje de infección de WSSV disminuyó cuando el alimento con MI se aplicó cada 3 d. Conclusiones: Los MI disminuyen el porcentaje de infección de WSSV en L. vannamei infectado con baja carga viral cuando se aplican cada tres días. Además, los MI causan una sobre-expresión de los genes LvToll, Tgase y proPO cuando se administran diariamente. Se necesita más investigación sobre los inmunoestimulantes microbianos como tratamiento profiláctico contra WSSV en granjas comerciales de camarón.
Resumo Antecedentes: O vírus da mancha branca (WSSV) causa alta mortalidade na aqüicultura e o uso de imunoestimulantes aumenta a resistência em animais. Objetivo: Este trabalho avaliou a prevalência do WSSV e o efeito imunoestimulante de bactérias ácido lácticas e levadura (MI= inmunoestimulantes microbianos) em Litopenaeus vannamei infectado con WSSV. Métodos: Se realizou um bioensayo durante 33 dias com tratamientos por triplicado. Se agregou MI al alimento (8,5 mg/kg feed) e se o fornecimento de camarão (9,9 ± 3,1 g) diariamente, cada 2 e cada 3 d. Los camarones foram infectados com WSSV a los 9 y 19 d. Se estudió a expressão de quatro genes relacionados com o sistema imune, use qRT-PCR. Resultados: No hubo diferencias significativas no crescimento e na supervisão entre os tratamientos. Al final del bioensayo, a prevalência do WSSV diminuiu um 8.3 e não 25% nos tratamentos III e IV em comparação com o grupo de controle. Os tratamentos com MI mostraram diferenças significativas na expressão relativa dos genes. LvToll, transglutaminasa e prophenoloxidase quando se administraron em diários de MI em comparação com o controle de grupo. Los MI não regularam a expressão do genótipo da superóxido dismutasa. A prevalência do WSSV diminuiu quando o alimento com MI se aplicó cada 3 d. Conclusões: Los IM diminuir a prevalência de WSSV em L. vannamei infectado com baixa carga viral quando aplicável a cada três dias. Além disso, os IM causaram uma sobre-expressão dos genes LvToll, Tgase e proPO quando se administran diariamente. Há mais informações sobre imunoestimulantes microbianos como tratamento profiláctico contra WSSV en granjas comerciales de camarón.
ABSTRACT
Infectious diseases especially those caused by bacterial and viral pathogens are serious loss factors in shrimp farming. In this study, bacteria were isolated from the gut and hepatopancreas of stressed shrimps obtained from a commercial farm. The isolates were screened on Thiosulfate citrate bile salt sucrose (TCBS) agar plates for the selection of Vibrio species. Presumptive vibrios were characterized through tests for hemolytic and enzymatic activity, hydrophobicity, growth and molecular identification. Three experimental infections were conducted in order to confirm the pathogenicity of selected bacterial strains VHPC18, VHPC23, VHPC24 and VIC30. In the third experimental challenge the LD50 was obtained, it lasted 10 days with 10 shrimp, weighing 6.9±1.1g, per tank. The treatments in triplicate were: (1) saline solution (control group); (2) 2×10(5)CFU/shrimp; (3) 4×10(5)CFU/shrimp; (4) 2×10(6)CFU/shrimp; (5) 4×10(6)CFU/shrimp, and (6) 8×10(6)CFU/shrimp. In all challenges, water parameters measured during the experimental period remained within optimum ranges. Pathogenicity tests confirmed that the mixture of four vibrio isolates, identified as Vibrio sinaloensis, was virulent for L. vannamei. The LD50 value was 1.178×10(5)CFU/g body weight. V. sinaloensis may act as opportunistic pathogens for cultured L. vannamei. Rev. Biol. Trop. 60 (2): 567-576. Epub 2012 June 01.
Las enfermedades de etiología infecciosa, especialmente las causadas por patógenos bacterianos y virales ocasionan graves pérdidas en el cultivo de camarón blanco Litopenaeus vannamei. En este estudio se caracterizo: la actividad enzimática y hemolítica; hidrofobicidad; crecimiento e identificación molecular de vibrios aislados del intestino y hepatopancreas de camarones estresados, obtenidos de una granja comercial, en medio Agar Tiosulfato Citrato Bilis Sacarosa. Además, se realizaron tres infecciones experimentales para confirmar la patogenicidad de las cepas bacterianas seleccionadas VHPC18, VHPC23, VHPC24 y VIC30. En la tercera infección experimental se obtuvo la LD50, el reto duro 10 días, con 10 camarones por tanque con un peso de 6.9±1.1g. Los tratamientos se realizaron por triplicado: (1) solución salina (grupo control); (2) 2×10(5)UFC/camarón; (3) 4×10(5)UFC/camarón; (4) 2×10(6)UFC/camarón; (5) 4×10(6)UFC/camarón y (6) 8×10(6)UFC/camarón. En todos los retos, los parámetros del agua permanecieron dentro de los intervalos óptimos. Las pruebas de patogenicidad confirmaron que la mezcla de cuatro aislados de Vibrio, identificados como Vibrio sinaloensis, fue virulenta para L. vannamei. El valor de la LD50 fue de 1.178×10(5)UFC/g de peso corporal. Los resultados permiten establecer que las cepas de V. sinaloensis pueden actuar como patógenos oportunistas en L. vannamei cultivado.