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1.
Rev. cuba. med. trop ; 65(2): 177-184, abr.-jun. 2013.
Article in Spanish | LILACS | ID: lil-675499

ABSTRACT

Introducción: las especies del género Leptospira son los agentes causales de la leptospirosis, enfermedad considerada como la zoonosis de mayor distribución en el mundo.En Argentina reviste carácter endémico. La provincia de Santa Fe registra el mayor número de casos humanos. Desde mediados de la década de 1980, las especies patógenas de leptospiras aisladas de animales y humanos fueron diferenciadas sobre la base de estudios de hibridización ADN-ADN, surgiendo nuevas especies: L. interrogans, L. kirschneri, L. weilii, L. noguchii, L. borgpetersenii, L. santarosai, L. meyeri, L. inadai, L. faineri y L. alexanderi. Objetivo: aislar y caracterizar mediante métodos moleculares, leptospiras de fuentes de agua que vierten en un canal que atraviesa la ciudad de Casilda, Santa Fe, en Argentina. Métodos: se sembraron 6 muestras de agua de las vertientes al canal, previa filtración con filtros Millipore de 0,22 µm, en medios EMJH y Fletcher para aislamiento de leptospiras. Se incubaron en estufa a 30 °C durante 15 días, se observaron semanalmente mediante microscopia de campo oscuro. Se implementó la técnica de reacción en cadena de la polimerasa bajo las condiciones específicas (Sugathan, 2005), con dos juegos de cebadores (Gravekamp, 1993), que permiten detectar la presencia de ADN de leptospiras patógenas. La técnica molecular utilizada para genotipificar fue multiple-locus variable-number tandem repeats analysis (MLVA). Resultados: se obtuvieron 5 aislamientos de Leptospira spp., de los cuales 2 resultaron positivos a la reacción en cadena de la polimerasa, determinando que se trataba de leptospiras patógenas. Mediante la genotipificación por MLVA se pudo observar que uno de los aislamientos patógenos mostró un patrón correspondiente a la especie Leptospira borgpetersenii, no siendo identificable la otra cepa. Conclusiones: en la ciudad del estudio, que tiene alrededor de 40 000 habitantes, se logró identificar por primera vez una cepa de Leptospira borgpetersenii de fuentes de aguas urbanas, con el peligro potencial que esto representa para la población humana y animal.


Introduction: the Leptospira genus species are causative agents of leptospirosis, a disease that is considered the most widely spread zoonotic disease worldwide. In Argentina, leptospirosis is endemic and Santa Fe province has the highest number of human cases. Since mid-1980's, the pathogenic leptospira species isolated from animals and humans have been differenciated through DNA-DNA hybridization tests, resulting in new species: L. interrogans, L. kirschneri, L. weilii, L. noguchii, L. borgpetersenii, L. santarosai, L. meyeri, L. inadai, L. faineri y L. alexanderi. Objectives: to isolate and to characterize by molecular test leptospiras from water poured into a channel that runs through Casilda City in Santa Fe Province, Argentina. Methods: six samples of water from the channel were cultured after having been filtered through 0.22 µm, Millpore filtres in EMJH and Fletcher media to isolate leptospires. They were incubated at 30 °C for 15 days, and weekly observed through dark field microscopy. Polymerase chain reaction assay was used under specific conditions (Sugathan, 2005), with two sets of primers (Gravekamp, 1993), to determine whether the isolates were pathogenic. The molecular technique for genotyping was Multiple-Locus Variable-number tandem repeats Analysis (MLVA). Results: five Leptospira spp. isolates were obtained of which 2 were positive to PCR, all of which determined that they were pathogenic leptospiras. MLVA genotyping allowed the observation of a pattern similar to that of L. borgpetersenii species in one pathogenic isolates, but the other isolate was not identified. Conclusions: in the City where the study was carried out, with a population of about 40,000 inhabitants, a L. borgpetersenii species was identified for the first time in urban water sources, with the potential risk that it may pose for human and animal populations.

2.
Rev. cuba. med. trop ; 65(2): 185-0, abr.-jun. 2013.
Article in Spanish | LILACS | ID: lil-675500

ABSTRACT

Introducción: la leptospirosis es una de las zoonosis más difundidas mundialmente. La aparición de epidemias urbanas ocasionadas por las inundaciones, la transformaron en un grave problema para la salud pública. Una de las especies animales más afectadas por la leptospirosis es la canina. Los perros se infectan con Leptospira interrogans y padecen la enfermedad, que constituye uno de los factores de riesgo más importante en la transmisión de leptospiras en zonas urbanas. El diagnóstico de certeza de la leptospirosis, debido a la característica polisindromática de la enfermedad, solo es posible a través de los resultados de laboratorio. Objetivo: estimar la tasa de seropositividad a distintos serovares de Leptospira interrogans en caninos de la ciudad de Rosario. Métodos: se realizó un estudio epidemiológico descriptivo transversal en una población de perros de Rosario. Se estudiaron perros de los 2 sexos, de cualquier edad, sin distinguir raza ni estado de vacunación. Las muestras se analizaron mediante la técnica de aglutinación microscópica (MAT), estandarizada a nivel internacional. En el ensayo se emplearon los serovares de Leptospira interrogans siguientes: Pomona, Icterohaemorrhagiae, Canicola, Bratislava, Grippotyphosa, Pyrogenes y Castellonis. El punto de corte utilizado para la técnica fue 1:100. Se procesaron 156 muestras de sueros. Resultados: de las muestras analizadas 134 resultaron negativas y 22 positivas a la técnica de aglutinación microscópica. Se hallaron 12 (54,54 %) positivas a Castellonis, 7 (53,84 %) a Canicola; 1 (4,54 %) a Pyrogenes, 1 (4,54 %) a Pomona y 1 (4,54 %) a Icterohaemorrhagiae. Los títulos más altos fueron de 1:200 y correspondieron a Castellonis. Conclusión: los resultados sugieren que el serovar Castellonis es el detectado con mayor frecuencia en la actualidad para la población canina de Rosario y que debería tenerse en cuenta en la formulación de inmunógenos contra la leptospirosis canina.


Introduction: leptospirosis is one of the most widespread zoonoses worldwide. The urban epidemics caused by floods, became a serious problem for public health. Canine species is the most affected by leptospirosis. Dogs become infected with Leptospira interrogans and the disease, which represents one of the most important risk factors in the transmission of leptospires in urban areas. Definitive diagnosis of leptospirosis due to multisyndromic feature of the disease is only possible through laboratory results. Objective: the objective was to estimate the rate of seropositivity to different serovars of L. interrogans in dogs in the city of Rosario. Methods: a descriptive cross-sectional epidemiological study in a dog population of Rosario, which included dogs of both sexes, all ages, regardless of race or vaccination status. The samples were analyzed by internationally standardized Microscopic Agglutination (MAT). This experiment used the following serovars of L. interrogans: Pomona, Icterohaemorrhagiae, canicola, Bratislava, grippotyphosa, and castellonis Pyrogenes. The cutoff point for the technique was 1:100. One hundred fifty six samples were processed. Results: of the analyzed samples, 134 were negative and 22 positive to MAT. There were 12 (54.54 %) positive to Castellonis, 7 (31.81 %) to Canicola, 1 (4.54 %) to Pyrogenes, 1 (4.54 %) to Pomona and 1 (4.54 %) to Icterohaemorrhagiae. The highest titers were 1:200 and in Castellonis serovar. Conclusions: the results of this study indicate that serovar Castellonis is the most frequently detected one for the canine population of Rosario at present, and it should be considered in the formulation of immunogens against canine leptospirosis.

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