Comparação de métodos para avaliação da atividade antimicrobiana e determinação da concentração inibitória mínima (cim) de extratos vegetais aquosos e etanólicos / Comparison of methods for evaluation of antimicrobial activity and determination of minimum inhibitory concentration (mic) of aqueous and ethanol plant extracts

Vários estudos estão sendo conduzidos para a descoberta de novos agentes antimicrobianos provenientes de plantas, para que possam ser utilizados em produtos farmacêuticos, cosméticos e na indústria alimentícia. A ausência de padronização de métodos utilizados para a avaliação de extratos vegetais com potencial antimicrobiano dificulta a comparação de resultados. Considerando a necessidade de estabelecer um método com resultados consistentes para avaliar a atividade antimicrobiana dos extratos vegetais, este trabalho propôs-se a avaliar a atividade antimicrobiana e determinar a concentração mínima inibitória de extratos de plantas da família Myrtaceae sobre diferentes micro-organismos, utilizando três métodos para avaliação de antimicrobianos. Os métodos empregados foram microdiluição em caldo e difusão em ágar por disco e poço. Foram avaliados os extratos de Psidium guajava, Myrciaria cauliflora e Syzygium cumini sobre bactérias Gram-positivas, negativas e levedura. Em geral, a inibição promovida pelos extratos no teste de difusão em ágar por poço foi maior do que os valores obtidos por disco, independentemente do extrato vegetal testado. Contudo, a atividade inibitória de todos os micro-organismos só pôde ser determinada com o método de microdiluição em caldo, que também apresentou os resultados mais reprodutíveis, e mostrou-se o mais econômico e confiável para se avaliar a atividade antimicrobiana de extratos vegetais quando comparado aos outros métodos.(AU)

Several studies have been conducted to discover new antimicrobial agents from plants to be used in pharmaceuticals, cosmetics and in the food industry. The lack of standardized methods for the evaluation of plant extracts with antimicrobial potential complicates the comparison of results. Taking into consideration the need to establish a method with consistent results to evaluate the antimicrobial activity of plant extracts, this study aimed to evaluate the antimicrobial activity of extracts of some plants from the Myrtaceae family on different micro-organisms based on a comparative assay with three methods that are commonly used for the assess antimicrobials. The methods used were broth microdilution, and agar diffusion by disc and well. The evaluated extracts were those of Psidium guajava, Myrciaria cauliflora, and Syzygium cumini for Gram-positive and negative bacteria and yeast. In general, inhibition extracts promoted by the agar diffusion test by well was higher than the values ​​obtained by disc, regardless of the plant extracts tested. However, the inhibitory activity of all micro-organisms was only possible to be determined with the microdilution broth method, which also presented the more reproducible results, and proved to be the most economic and reliable way to evaluate the antimicrobial activity of plant extracts in contrast with other methods.(AU)

Avaliação da atividade antimicrobiana de extratos vegetais frente a sorovares de salmonella spp. de origem avícola / Evaluation of antimicrobial activity of plant extract against serovars of salmonella spp. of poultry products

A carne de aves é importante veículo de transmissão de Salmonella sp. e a ampla utilização de antibióticos nas rações tem conduzido a multirresistência bacteriana. Em virtude disso estudam-se formas alternativas com as mesmas vantagens de um antibiótico, porém com ação menos tóxica como, por exemplo, os extratos vegetais. O objetivo desse trabalho foi avaliar a resistência/sensibilidade de Salmonella spp. frente a diferentes extratos vegetais. Foram avaliados nove extratos vegetais aquosos quanto a atividade antimicrobiana sobre 14 sorovares de Salmonella spp., isolados de aves. O método utilizado foi de microdiluição em caldo. Distribuiu-se 160 µL de Caldo Müller-Hinton em poços de uma placa de microdiluição, adicionou-se 8 µL de inóculo bacteriano previamente padronizado e, por último, 160 µL do respectivo extrato com concentrações finais de 50, 100, 150 e 200 µg/mL. As microplacas foram incubadas a 35 ºC por 24 horas, em condições de aerobiose. A determinação das CIMs teve como base presença ou ausência de turvação, convencionado presença de turvação como crescimento bacteriano e ausência como não crescimento. A partir dos poços que não apresentaram crescimento bacteriano visível, foi retirada uma alíquota de 10 µL e semeada na superfície do ágar MH incubado a 35 ºC e, após 48 horas, foi definida a concentração bactericida mínima. Verificou-se que o extrato aquoso de Allium sativum apresentou maior atividade antimicrobiana bacteriostática e bactericida, seguido por Dendranthema grandiflora com maior atividade bacteriostática em todas as concentrações testadas, e bactericidas para alguns sorovares. O extrato de Plectranthus barbatus não apresentou atividade antimicrobiana sobre nenhum sorovar avaliado. Dos 14 sorovares estudados, S. Lexigton foi o que demonstrou maior sensibilidade e os sorovares com menor sensibilidade aos extratos testados foram S. Cubana, S. Infantis, S. Give, S. Newport.

The poultry meat is an important vehicle of transmission of Salmonella sp. and the widespread use of antibiotics in feed has led to bacterial multidrug resistance. In virtue of this are studied alternative forms with the same advantages of the antibiotic, but with less toxic action, for example, plant extracts. The objective of this work was to evaluate the resistance / sensitivity of Salmonella spp. against different plant extracts. Nine aqueous plant extracts antimicrobial activity were evaluated against 14 serovars of Salmonella sp. isolated from poultry. The method used was microdilution in broth. One hundred and sixty microliters of Müller-Hinton broth were distributed in wells of microdilution plate, then 8 µL of bacterial inoculum previously standardized were added followed by the addition of 160 µL of respective extract with concentrations of 50, 100, 150 and 200 µg/mL. The microplates were incubated at 35 ° C for 24 h in aerobic conditions. The determination of MICs was based on the presence or absence of turbidity, which by conventionrepresented bacterial growth and the absence of turbidity indicated no growth. From the wells that showed no visible bacterial growth an aliquot of 10 µL was taken and seeded on the MH agar surface, incubated at 35°C and after 48 hours the minimal bactericidal concentration was determined. It was found that the aqueous extract of Allium sativum showed greater bacteriostatic and bactericidal antimicrobial activity, followed by Dendranthema grandiflora with greater bacteriostatic activity at all concentrations and bactericidal for some serovars. Plectranthus barbatus extract did not show any antimicrobial activity against all serovars evaluated. Of the 14 serovars studied, S. Lexigton showed a higher sensitivity to the extracts and the serovars with less sensitivity to the extracts tested were S. Cubana, S. Infantis, S. Give, S. Newport.