Rúbricas como instrumento de evaluación de ateneos en una residencia de Bioquímica Clínica de un hospital universitario. Estudio sobre su confiabilidad e impacto educativo / Rubrics as an evaluation instrument for conferences in a Clinical Biochemistry residency at a university hospital. Study on its reliability and educational impact / Rubricas como instrumento de avaliação de congressos em uma residência de Bioquímica Clínica de um hospital universitário. Estudo sobre sua confiabilidade e impacto educacional

Resumen El objetivo del estudio fue describir el uso de rúbricas para la evaluación formativa de la participación de profesionales en formación en el desarrollo de ateneos. Se realizó un estudio observacional, descriptivo, transversal y retrospectivo sobre la rúbrica de ateneos de programas de formación de posgrado de Bioquímica Clínica y se analizó la confiabilidad (por medio del coeficiente alfa de Cronbach) y su impacto educativo. Se analizaron 51 rúbricas sobre 41 ateneos de 9 profesionales en formación (residentes y becarios) por 19 evaluadores. La estimación de confiabilidad arrojó un alfa de Cronbach de 0,71 (nivel de confianza del 95%, p≤0,05). La rúbrica aquí analizada ha servido para clarificar las metas de aprendizajes de una actividad tradicional en la formación de posgrado en servicio. Se ha logrado generar un instrumento de evaluación confiable que puede ser utilizado en otras profesiones y especialidades del equipo de salud.

Abstract The objective of the study was to describe the use of rubrics for the formative evaluation of the participation of professionals in training in the development of conferences. An observational, descriptive, cross-sectional and retrospective study was carried out on the rubric of athenaeums of postgraduate training programmes in Clinical Biochemistry, analysing its reliability (by means of Cronbach's alpha coefficient) and its educational impact. Fifty-one rubrics difewere analysed on 41 athenaeums of 9 professionals in training (residents and fellows) by 19 evaluators. The reliability estimate yielded a Cronbach's alpha of 0.71 (95% confidence level, p≤0.05). The rubric analysed here has served to clarify the learning goals of a traditional activity in postgraduate training in service. It has been possible to generate a reliable evaluation instrument that can be used in other professions and specialties of the health team.

Resumo O objetivo do estudo foi descrever a utilização de rubricas para avaliação formativa da participação de profissionais em formação no desenvolvimento de ateneus. Foi realizado um estudo observacional, descritivo, transversal e retrospectivo da rubrica de ateneus dos programas de formação pós-graduação em Bioquímica Clínica, analisando a sua fiabilidade (através do coeficiente alpha de Cronbach) e o seu impacto educacional. Cinquenta e uma rubricas de 41 ateneus de 9 profissionais em formação (residentes e bolsistas) foram analisadas por 19 avaliadores. A estimativa de confiabilidade resultou em um alfa de Cronbach de 0,71 (nível de confiança de 95%, p≤0,05). A rubrica aqui analisada serviu para esclarecer os objetivos de aprendizagens de uma atividade tradicional na formação pós-graduação em serviço. Foi possível gerar um instrumento de avaliação confiável que pode ser utilizado em outras profissões e especialidades da equipe de saúde.

Validación de un método analítico para cuantificación de ferritina en líquido cefalorraquídeo / Validation of an analytical method for the quantification of ferritin in cerebrospinal fluid

Resumen La ferritina es una proteína de gran tamaño que se encuentra fisiológicamente en el líquido cefalorraquídeo (LCR) en concentraciones de 2-10 ng/mL. Su elevación puede utilizarse como biomarcador en distintas condiciones patológicas. El procedimiento de validación tradicional para la medición en LCR no puede ser utilizado debido a la ausencia de controles y calibradores comerciales para esta matriz. El objetivo de este trabajo fue llevar a cabo una validación analítica de ferritina en LCR. Se realizaron ensayos de estimación de precisión y veracidad mediante el protocolo EP15-A3, linealidad por el protocolo EP6-A (ambos de la guía de la CLSI), recuperación, estabilidad, contaminación por arrastre, interferencia por hemólisis y bilirrubina y límite de detección (LoD). La ferritina en LCR en el autoanalizador DxI 800 de Beckman Coulter tuvo una performance intra e interensayo <3,7%, el ensayo denota linealidad en el intervalo de 2,1-547 ng/mL; se estableció estabilidad por un período de 5 días y la recuperación resultó ser aceptable. No se evidenció efecto de contaminación por arrastre ni interferencia por hemólisis hasta un rango entre 300-500 mg/dL de hemoglobina, ni interferencia por bilirrubina hasta una concentración de 16,0 mg/dL de bilirrubina total. El LoD fue de 0,4 ng/mL. Por medio de los ensayos realizados se logró validar la ferritina en LCR a partir de la utilización de pools de muestras, lo que pudo garantizar la confiabilidad y exactitud del método analítico.

Abstract Ferritin is a large protein physiologically present in the cerebrospinal fluid (CSF) in concentrations of 2-10 ng/mL. Its elevation can be used as a biomarker in several pathological conditions. The traditional validation procedure for measurement in CSF cannot be used due to the absence of commercial controls and calibrators for this matrix. The objective of the present study was to perform CSF ferritin analytical validation. Assays such as precision and accuracy estimation through the EP15-A3 protocol, linearity according to the EP6-A protocol (both from the CLSI guidelines), recovery, stability, carry-over, hemolysis and bilirubin interference and limit of detection (LoD) were conducted. Serum samples with different concentrations of ferritin were added to aliquots of a normal CSF pool. CSF ferritin in the Beckman Coulter DxI 800 had a <3.7% intra and inter-assay performance, the assay shows linearity in the 2.1 -547 ng/mL interval, stability was established for a 5-day period and the recovery was acceptable. There was neither carry-over effect or hemolysis interference up to a range of 300-500 mg/dL of hemoglobin, nor interference by bilirubin up to 16.0 mg/dL of total bilirubin. The LoD was 0.4 ng/mL. By means of the performed assays, CSF ferritin was validated by using sample pools, thereby ensuring the reliability and accuracy of the analytical method.

Resumo A ferritina é uma grande proteína fisiologicamente encontrada no líquido cefalorraquidiano (LCR) em concentrações de 2 a 10 ng/mL. Sua elevação pode ser usada como biomarcador em diferentes condições patológicas. O procedimento de validação tradicional para medição no LCR não pode ser usado devido à ausência de controles e calibradores comerciais para esta matriz. O objetivo deste estudo foi realizar uma validação analítica da ferritina no LCR. Foram realizados estudos de precisão e veracidade utilizando o protocolo EP15-A3, linearidade pelo protocolo EP6-A (ambos das diretrizes do CLSI), recuperação, estabilidade, contaminação transportada, interferência de hemólise e bilirrubina e limite de detecção (LoD). A ferritina no LCR no DxI 800 da Beckman Coulter teve um desempenho intra e inter-ensaio <3,7%, o ensaio denota linearidade na faixa de 2,1-547 ng/mL, a estabilidade foi estabelecida em um período de 5 dias e a recuperação foi considerado aceitável. Nenhum efeito de transporte ou interferência por hemólise foi evidenciado até um intervalo entre 300-500 mg/dL de hemoglobina, nem interferência pela bilirrubina até uma concentração de 16,0 mg/dL de bilirrubina total. O LoD foi de 0,4 ng/mL. Através dos testes realizados, a ferritina no LCR foi validada, com base no uso de pool de amostras, o que poderia garantir a confiabilidade e a acurácia do método analítico.

Aseguramiento de Calidad en el Laboratorio de Biología Molecular: Control de Contaminación Ambiental / Quality Assurance in the Laboratory of Molecular Biology: Control of Environmental Contamination / Garantia de Qualidade no Laboratório de Biologia Molecular: Controle da Contaminação Ambiental

La reacción en cadena de la polimerasa (PCR) es la técnica más importante en Biología Molecular. Su principal deficiencia es la susceptibilidad a la contaminación de la muestra, ya sea con productos de amplificación generados en reacciones previas o con material genético proveniente de otras muestras. Se entiende por contaminación a la presencia indeseada de moléculas de ADN o ARN, que pueden actuar como templados en reacciones de amplificación. El objetivo del trabajo fue demostrar la importancia de la implementación de un control de contaminación ambiental periódico monitoreando la integridad del circuito de PCR. Para ello, se hisoparon puntos correspondientes a diferentes áreas de trabajo y se investigó la presencia de amplicones mediante PCR Real Time en Lighcycler 2.0, Roche® y Ampliprep Cobas s201, Roche®. En puntos críticos del circuito (flujo laminar o la cabina de seguridad del área de pre-PCR) no se detectaron amplicones, aunque sí se hallaron en las mesadas y heladeras. En el resto del circuito, la distribución de los amplicones fue variable. De esta forma se demuestra la importancia de la realización de un control de contaminación ambiental periódico en laboratorios que realizan la técnica de PCR, pudiendo detectar contaminación de forma precoz y tomar acciones correctivas a tiempo.

Polymerase chain reaction (PCR) is the most important technique in Molecular Biology. Its main deficiency is susceptibility to contamination of the sample, either with amplification products generated in previous reactions or with genetic material from other samples. Contamination is understood as the undesired presence of DNA or RNA molecules, which may act as annealing in amplification reactions. The objective of this work is to demonstrate the importance of implementing a periodic environmental pollution control by monitoring the integrity of the PCR. To do this, different areas of work were swabbed and the presence of amplicons were investigated by Real Time PCR in Lighcycler 2.0, Roche® and Ampliprep Cobas s201, Roche®. At critical points in the circuit (laminar flow or pre-PCR area booth) no amplicons were detected, although they were found in countertops and refrigerators. In the rest of the circuit, the distribution of the amplicons was variable. Thus, the importance of conducting a periodic environmental contamination control in laboratories that perform the PCR technique is demonstrated, enabling early detection contamination and corrective actions being taken on time.

A reação em cadeia da polimerase (PCR) é a técnica mais importante em Biologia Molecular. Sua principal deficiência é a suscetibilidade à contaminação da amostra, seja com produtos de amplificação gerados em reações prévias ou com material genético em reações prévias ou com material genético proveniente de outras amostras. Entende-se por contaminação a presença não desejada de moléculas de DNA ou ARN, que podem agir como temperados em reações de amplificação. O objetivo do trabalho foi demonstrar a importância da implementação de um controle de contaminação ambiental periódico monitorando a integridade do circuito de PCR. Para isso, se fez esfregaço de pontos correspondentes a diferentes áreas de trabalho e foi investigada a presença de amplicons mediante PCR Real Time em Lighcycler 2.0, Roche® e Ampliprep Cobas s201, Roche®. Em pontos críticos do circuito (fluxo laminar ou a cabine de segurança da área de pré-PCR), não foram detectados amplicons, apesar de serem encontrados nas bancadas e refrigeradores. No resto do circuito, a distribuição dos amplicons foi variável. Assim mostra a importância da realização de um controle de contaminação ambiental periódico em laboratórios que realizam a técnica de PCR, podendo detectar a contaminação de forma precoce e tomar ações corretivas a tempo.

Bone and mineral metabolism in primiparous women and its relationship with breastfeeding: a longitudinal study / Metabolismo óseo y mineral en mujeres primíparas y su relación con la lactancia: un estudio longitudinal

The aim of this study was to evaluate the changes in bone metabolism in breastfeeding women (BF). We selected 30 primiparous women and compared them to 31 nulliparous women. We assessed bone mineral density (BMD) in the lumbar spine (LS), femoral neck (FN) and trochanter (TROC), biochemical parameters of bone turnover and hormone and cytokine levels at the puerperium, 6 months and 12 months after delivery. A trend to lower BMD of LS was seen at initial evaluation in BF. BMD in LS, FN, and TROC were increased 12 months after delivery. Baseline body mass index was higher in puerperal women (p = 0.02) and correlated with an increased FN and TROC BMD one year post delivery (p = 0.001 and p = 0.003). An increase in bone remodeling markers, and lower urinary calcium was observed; after 12 months these values normalized. Prolactin, parathormone related peptide (PTHrP) and IL-6 were enhanced during the first six months of breastfeeding. We conclude that calcium for breastfeeding was obtained by transient mobilization of calcium deposits from the trabecular bone, and urinary calcium sparing induced by calciotrophic hormones and cytokines. Body weigth is an important factor in proximal femur BMD.

El objetivo de este estudio fue evaluar los cambios que suceden en el metabolismo óseo de mujeres que amamantan. Se seleccionaron 30 mujeres primíparas y se compararon con 30 mujeres nulíparas como grupo control. Se evaluó la densidad mineral ósea (DMO) del raquis lumbar (RL), cuello femoral (CF) y trocánter (TROC), parámetros del remodelado óseo, hormonas y citoquinas. Estos parámetros se midieron en el puerperio inmediato, y a los 6 y 12 meses post-parto. La DMO del RL de la mujeres primíparas evidenciaron una tendencia a menores valores al comienzo de la lactancia comparadas con las mujeres controles, y se observó un incremento significativo de la DMO a los 12 meses, alcanzando valores similares al grupo control. La DMO en CF y del TROC aumentó significativamente a los 12 meses post parto. El índice de masa corporal basal fue mayor en el grupo de primíparas en el puerperio inmediato (p = 0.02) y correlacionó con el incremento observado en la DMO CF y del TROC al año del post-parto (p = 0.001 y p = 0.003, respectivamente). Un alto remodelado óseo y descenso en el calcio urinario se observaron en el puerperio inmediato, y tanto los marcadores óseos como la calciuria se normalizaron a los 12 meses post-parto. Prolactina, interleuquina-6 y el PTHrP aumentaron significativamente en los primeros 6 meses. Concluimos que el calcio de la leche materna proviene de la movilización de los depósitos cálcicos del hueso trabecular y del ahorro de la pérdida renal inducido por las hormonas calcitrópicas y las citoquinas involucradas en el metabolismo óseo. El peso corporal es un factor de importancia en el incremento de DMO del fémur proximal.

Variaciones estacionales de 25-hidroxivitamina D en jovenes y ancianos de la ciudad de Buenos Aires / Seasonal variations in 25-hydroxyvitamin D in young and elderly populations in Buenos Aires City

La hipovitaminosis D es un fenómeno observado con frecuencia en personas mayores y en centros urbanos. Los objetivos de este estudio fueron determinar los niveles circulantes de 25-hidroxi-vita-mina D, 25(OH)D, en pacientes ambulatorios ancianos y jóvenes de la ciudad de Buenos Aires y establecer el impacto de valores descendidos de Vitamina D en la remodelación ósea. Se evaluaron 83 ancianos y 76 jóve-nes de 71.9±8.1 y 29.8±6.6 años respectivamente, mediante la medición de 25(OH)D, parathormona medio-molecular y de marcadores del metabolismo óseo y mineral. En invierno se comprobaron valores de 25 (OH) D en grado de insuficiencia en ambos grupos y un 14.2% de ancianos y 15.9% de jóvenes con valores menores de 10 ng/ml. En verano se observó un incremento de la 25(OH)D en toda la población, sin embargo los niveles circulantes de Vitamina D no superaron los 40 ng/ml, en ambos grupos. Los niveles plasmáticos de parathormona fueron más elevados en ancianos que en jóvenes y en esa subpoblación se observó la presencia de hiperparatiroidismo secundario. La elevación de parathormona está condicionada por la deficiencia de vitamina D y otros factores adicionales como la edad, la insuficiencia renal y el grado de nutrición de la población. La remodelación ósea presentó variaciones estacionales: se incrementó en invierno en ambos grupos. En la ciudad de Buenos Aires se han observado niveles descendidos de Vitamina D en jóvenes y mayores, durantetodo el año. Se deberán evaluar las políticas sanitarias apropiadas destinadas a corregir esta deficiencia, lacual predispone a la osteoporosis.