Validación del método de valoración biológica de gonadotrofina coriónica humana / Validation of the biological potency test for human chorionic gonadotropin

Introducción: en el Centro de Investigación y Desarrollo de Medicamentos se cuenta con una serie de ensayos biológicos para el control de calidad que deben ser sujetos a validación, entre ellos se encuentra la valoración biológica de gonadotrofina coriónica humana. Objetivo: evaluar el desempeño del método de valoración biológica de gonadotrofina coriónica humana. Métodos: se evaluaron la exactitud, la precisión y la especificidad como parámetros de validación siguiendo la metodología descrita en la Regulación 41-2007 del Centro para el Control Estatal de la Calidad de los Medicamentos (CECMED) para la Validación de métodos de análisis. Resultados: en el estudio de exactitud no se observaron diferencias significativas entre los valores de peso del útero obtenidos al ensayar la muestra y el material de referencia a las tres dosis administradas. En el estudio de la repetibilidad se alcanzaron coeficientes de variación menor del 50 por ciento. No se observaron diferencias significativas entre las precisiones alcanzadas por dos analistas diferentes en días diferentes. El estudio de especificidad mostró que los excipientes o sustancias auxiliares de la formulación no interfieren en la valoración biológica del producto. Conclusiones: el método biológico validado resultó ser específico, exacto y preciso en el rango de concentraciones estudiadas, lo que corrobora su calidad, teniendo un valor agregado

Introduction: a number of biological tests for quality control used in the Center for Drug Research and Development should be validated. Biological potency test of human chorionic gonadotropin is one of them. Objective: to evaluate the performance of the human chorionic gonadotropin biological potency test. Methods: the accuracy, precision and specificity were evaluated as validation parameters according to the 41-2007 Regulation of the Center for the State Control of Drug Quality (CEDMED) for analysis method validation. Results: in the accuracy test, no significant differences were observed between the uterus weight values from tested sample and the reference material at the 3 tested doses. Variation coefficients were less than 50 percent in the repeatability test. There were no significant differences between the precision values of two different analysts at different times. The specificity test showed that excipients or auxiliary substances in the formulation did not interfere with the results of the biologic potency test of the final product. Conclusions: the validated biological method showed good accuracy, precision and specificity in the range of studied concentrations, all of which proved its quality, so it has added value

Validación del método de determinación de efecto anestésico local / Validation of the measuring method of local anesthetic effect

Introducción: la determinación del tiempo de anestesia local de un medicamento o principio activo en investigación se realiza empleando un ensayo biológico. Objetivo: validar el método de determinación del tiempo de anestesia local para disponer de un método de ensayo validado para la evaluación de medicamentos genéricos con esta actividad farmacológica. Métodos: se evaluaron los parámetros de exactitud, precisión, robustez, linealidad, paralelismo y especificidad siguiendo la metodología descrita en la Regulación 41-2007 del Centro para el Control Estatal de la Calidad de los Medicamentos (CECMED) para la Validación de métodos de análisis. Resultados: en el estudio de exactitud no se observaron diferencias significativas entre los resultados al ensayar la muestra y el material de referencia. En el estudio de la repetibilidad se alcanzaron coeficientes de variación menor del 50 . No se observaron diferencias significativas entre las precisiones alcanzadas por dos analistas diferentes, en días diferentes, a tres lotes diferentes. El estudio de especificidad mostró que los excipientes o sustancias auxiliares de la formulación no interfieren en la evaluación del producto. El método resultó ser lineal en el intervalo de concentraciones de 50 a 120 por ciento con exactitud y precisión aceptable para cada dilución y mostró paralelismo. El ensayo de robustez mostró que no existen diferencias en las respuestas obtenidas al variar diferentes parámetros. Conclusiones: el método biológico resultó ser exacto, preciso, específico, lineal y robusto

Introduction: a biological test is used to measure local anesthesia time of a drug or an active principle under research. Objective: to validate the measuring method of local anesthesia time for the evaluation of generic drug with this pharmacological action. Methods: accuracy, precision, robustness, linearity, parallelism and specificity were evaluated according to the methodology described in 41-2007 Regulation of the Center for the State Control of Drug Quality (CEDMED). Results: in the accuracy test, no significant differences were observed between the results of tested sample and the reference material at the 3 tested doses. Variation Coefficients was less than 50 percent in the repeatability test. There were no significant differences between the precision values of two different analysts at different times and in three different batches. The specificity test showed that excipients or auxiliary substances in the formulation did not interfere with the evaluation of the product. The method was linear in a 50-120 percent range of concentrations, with acceptable accuracy and precision, and parallelism. The robustness test yielded no differences in the results obtained after changing various parameters. Conclusions: biological method proved to be accurate, precise, specific, linear and robust

Toxicidad de un extracto tánico de Pinus caribaea Morelet / Toxicity of a tanin extract from Pinus caribea Morelet

Se determinó la toxicidad aguda oral, dérmica y toxicogenética de un polvo de taninos obtenido a partir de un extracto acuoso de la corteza de Pinus caribaea Morelet secado por spray dry. En todos los casos se emplearon ratas Wistar de ambos sexos y peso corporal entre 150 y 200 g. Se empleó el ensayo de dosis límite y aplicación cutánea de parche oclusivo durante 24 h, para determinar la toxicidad aguda oral y dérmica, respectivamente. El polvo fue administrado en dosis de 2 000 mg/kg en ambas ocasiones. Después de 14 días de observación, los animales fueron sacrificados para realizarles autopsia y examen macroscópico de órganos y tejidos. El estudio toxicogenético se realizó en un modelo in vitro: el sistema Salmonella/microsoma (Ames) y otro in vivo: el ensayo de inducción de micronúcleos en médula ósea de ratón. En el ensayo de Ames se testaron las cepas TA 100, TA 98, TA 1535 y TA 1537 de Salmonella typhimurium con y sin activación metabólica en el rango de concentraciones de 50, 150, 500, 1 500 y 5 000 mg/placa. En el ensayo de inducción de micronúcleos se ensayaron dosis de 500, 1 000 y 2 000 mg/kg de peso corporal. Se comprobó que el polvo de taninos, obtenido a partir de un extracto acuoso de corteza de Pinus caribaea secado por spray dry, no es tóxico por administración oral y dérmica en los animales y es genotóxico in vitro e in vivo. Sería útil realizar otros estudios, con otras condiciones, para precisar la genotoxicidad de esta preparación

Acute oral, dermal and toxicogenetic toxicity of a spray dry-dried tanin powder from an aqueous extract of the wood of Pinus caribaea Morelet was determined. For all cases, Wistar rats of both sexes weighing 150-200g were used. Limit dose test and application of an occlusive patch on the skin for 24 hours determined the acute oral and dermal toxicities, respectively. The powder was administered at a dose of 2 000 mg/kg in both occasions. After 14 day-observation, the animals were killed to make autopsy and macroscopic test of organs and tissues. The toxicogenetic study was carried out in in vitro model called Salmonella/microsome system(Ames) and in vivo model, that is, the micronucleus induction test in the mouse bone marrow. In Ames test, strains TA 100, TA 98, TA 1535 and TA 1537 of Salmonella typhiumuriun with and without metabolic activation in the range of 50, 150, 500, 1 500 and 5 000 mg/plate concentrations were analyzed. Doses of 500, 1 000 and 2 000 mg/kg of body weight were tested in the micronuclei induction test. It was proved that the spray dry-dried tanin powder obtained from an aqueous extract of the wood of Pinus caribaea is not toxic by oral and dermal administration in the animals but it is genotoxic in vitro and in vivo. It will be advisable to perform other studies under different conditions so as to exactly determine the genotoxicity of this extract.