Utilidad de la citocentrifugación en el diagnóstico bacteriológico microscópico de fluidos corporales / Utility of cytocentrifugation in the microscopic bacterial diagnosis of body fluids

El diagnóstico rápido de microorganismos presentes en fluidos corporales estériles es de gran importancia clínica. La tinción de Gram constituyela principal herramienta para el diagnóstico de estas infecciones, pero la sensibilidad de está técnica varía segín el tipó de muestray la carga bacteriana presente en ella. La concentración de la muestra previa a la tinción, mejora el rendimiento pero requiere volúmenes significativos de la muestra. La citocentrifugación resulta útilya que requiere de escaso volumen de muestra y permite obtener preparaciones uniformemente concentradas. Con el objetivo de evaluar la cito centrifugación en el diagnóstico de fluidos corporales, se estudiaron 52 muestras de fluidos de cavidades estériles recividas en el Laboratorio de Urgencia del Servicio de Laboratorios Clínicos de la Red de Salud UC. Las muestras fueron separadas para centrifugación convencional (CC) a 3000 rpm por 5 minutos (centrifuga Jouan CR3i r) y para citocentrifugación (CT) a 2000 rpm por 10 minutos (Citocentrifuga Cytospin Shandon Inc r). Del sedimento obtenido por CC se realizó un frotis para tición de Gram y cultivo. De la CT se obtuvo una mono capa celular concentrada en un área de 6 mm de diámetro para tinción de Gram. Ambos frotis fueron leídos por el mismo observador. De las 52 muestras analizadas, 18 fueron sugerentes de infección clínica. La sensibilidad para CT v CC fue de 89 por ciento y 61 por ciento, respectivamente. La especificidad fue de 100 por ciento para ambas técnicas. En una evaluación cuantitativa de la celularidad de las muestras, se observó un aumento de los leucocitos en la CT con respecto a CC. Estos resultados muestran que la CT puede ser de gran ayuda en el diagnóstico rápido de las infecciones de fluidos corporales con baja carga bacteriana. Presenta una mayor sensibilidad y facilita la visualización de bacterias, especialmente en muestras con bajo recuento celular

Resistencia del virus de inmunodeficiencia humano (VIH) a zidovudina (AZT): análisis genotípico en cepas aisladas de pacientes chilenos / Resistance of human immunodeficiency virus (VIH) to zidovudine: genotypic analysis in strains isolated from chilean patients

Background: Resistance of HIV to AZT is the result of mutations in the pol gene that codifies the enzyme reverse transcriptase. Aim: To asses the resistance to antiretroviral drugs in Chhilean patients infected with HIV. Material and methods: The presence of mutations was searched in 22 patients infected with HIV. The emergence or persistence of these mutations was studiend in sequential samples of 19 patients. The presence of the mutation that confers resistance to didanosine (ddi) was studied in those subjects exposed to the drug. Polymerase chain reaction techniques were used to analyze mutations in codons 41, 70 and 215 of the pol gene (resistance to AZT) and the mutation in codon 71 (resistance to DDI). Results: On admission, none of the patients without previous exposure to AZT had drug resistance mutations. Seven of 12 patients (58.3 percent) that had received AZT had mutations in codon 215. In two, they were associated to a mutation in codon 41 and in two, to a mutation in codon 70. After a mean follow up of 14 months, 13 of 15 patients (86 percent) that received AZT had viral strains genotypically resistant to the drug. In nine of these, the resistance was associated with disease progression. None of the 10 patients that received DDI had the mutation in codon 74 that confers resistance to the drug. However, in one of these patients, that never receided AZT, virus with a mutation in codon 215 was detected. Conclusions: A high percentage of patients that have received monotheraphy with AZT have genotypic resistance to the drug. This resistance is associated with clinical and immunological derangement in 70 percent of these subjects