Infecciones asintomáticas por Chlamydia trachomatis: un problema controlable en la población adolescente / Asymptomatic Chlamydia trachomatis infection in adolescent population: a manageable problem

La detección precoz de la infección por Chlamydia trachomatis (CT) asintomática (70-75%) reduce la incidencia de complicaciones, sobre todo las relacionadas a la infertilidad y esterilidad en ambos sexos siendo relevante en las mujeres. Objetivos: Conocer la prevalencia de CT en la población asintomática de jóvenes y adolescente (JA) de la ciudad de Córdoba (Argentina); evaluar los factores de riesgo y proponer un programa de detección adecuado a nuestro medio. Métodos: Se estudiaron, entre enero de 2004 y enero de 2006, 427 JA de ambos sexos entre 18 y 24 años (221 estudiantes universitarios (GU) y 206 adolescentes no universitarios (GNU) con nivel socio económico bajo). Se realizó PCR en orina con dos técnicas: plásmido y proteína de la membrana externa de CT; cultivo en líneas celulares para las muestras positivas; y tratamiento de los individuos positivos y control posterior. Resultados: La prevalencia global fue 8,7% (37/427) siendo mayor en las mujeres (13,7% vs. 4,1%; p = 0.0004), en el GNU (13.1 vs. 4.5%; p = 0.001) y en aquellos con las necesidades básicas (NB) insatisfechas (14.8% vs. 6.1%; p = 0.0006). No hubo diferencias significativas (DS) con respecto al comportamiento sexual y al uso de diferentes métodos anticonceptivos. Los antecedentes previos de exudado vaginal o uretral y adenomegalias inguinales tuvieron un elevado valor predictivo negativo (93,01% y 94,2%, respectivamente). Conclusiones: Es recomendable efectuar tamizaje de jóvenes en diferentes escenarios con técnicas sensibles. Los programas basados en los factores de riesgo son inadecuados en nuestro medio. La información y la educación general y sexual deben ser consideradas herramientas imprescindibles para controlar esta infección.

Propuesta de un algoritmo alternativo con pruebas complementarias en donantes con resultados reactivos en pruebas de tamizaje para HIV / HIV screening test. An alternative algorithm of complementary tests in seroactive donors

En este trabajo se presentan los resultados de la experiencia del Banco de Sangre de la Universidad Nacional de Córdoba con el uso de equipos de 4ª generación en el screening de HIV y la valoración de la eficiencia del mismo utilizando diferentes técnicas serológicas y PCR. Además se propone un algoritmo para ser implementado en bancos de sangre con el fin de minimizar el descarte de bolsas y aclarar el status para HIV en los donantes con screening inicial reactivo. De 3822 donantes de sangre procesados por HIV Ag/Ac Combination ABBOTT Murex se descartaron 30 unidades de sangre repetidamente reactivas y repetidamente en zona gris, de las cuales solamente en 2 se confirmó infección por HIV. Las 30 muestras fueron procesadas por las siguientes técnicas: Murex HIV-1.2.0 ABBOT Murex (EIE), Murex HIV Antigen Mab ABBOTT Murex (EIE), Microelisa system Vironostika HIV Uni- Form II plus O BIOMÉRIEUX, SFD HIV 1/2 PA BIORAD FUJIREBIO (aglutinación de partículas de gelatina o APG), NEW LAV BLOT I BIO-RAD (Western Blot o WB), IFI-HIV-1-BIO-MANGUINHOS y PCR "in house". La detección de anticuerpos (3ª generación) y del antígeno p24 por separado con el reactivo ABBOTT Murex resultó en 10 muestras repetidamente reactivas y en zona gris para los anticuerpos y 1 repetidamente reactiva para el antígeno. Por Western blot, de las 30 muestras 2 fueron positivas, 6 negativas y 22 indeterminadas. Con el ensayo de 4ª generación utilizado hubo 0,73 por ciento de falsos positivos lo que determinó un descarte innecesario de unidades de sangre y un estado de incertidumbre para el donante. La PCR fue de gran utilidad para resolver el diagnóstico en donantes con resultados discordantes por los inmunoensayos. Consideramos que la estrategia propuesta resulta útil hasta que sea posible la incorporación de NAT para el screening de HIV en nuestros bancos de sangre.

Usefulness of a Nested-polymerase chain reaction for molecular diagnosis of human T-cell lymphotropic virus type I/II

This study aimed at implementing a Nested-polymerase chain reaction (Nested-PCR) for the molecular diagnosis of human T-cell lymphotropic virus type I/II (HTLV-I and HTLV-II) infections in peripheral blood mononuclear cells of infected subjects in Argentina. The sensitivity and specificity of the assay for the detection of regional strains were assessed by comparing them with the molecular assay of reference PCR-hybridization. The Nested-PCR detected 1 MT-2 cell ( 8 proviral copies)/1x106 non-infected cells showing high sensitivity for provirus detection. While both molecular assays showed high specificity (100 percent) for HTLV-I and HTLV-II detection, the sensitivity values differed: 100 percent for Nested-PCR and 67 percent for PCR-hybridization assay. Moreover, this technique showed less sensitivity for the detection of DNA sequences of HTLV-II (33 percent) than for the detection of DNA sequences of HTLV-I (75 percent). The high sensitivity and specificity of the Nested-PCR for regional strains and its low costs indicate that this assay could replace the PCR-hybridization assay for the molecular diagnosis of HTLV-I/II infections. It will be interesting to assess the usefulness of this assay as a tool for the molecular diagnosis of HTLV-I/II infections in other developing countries. Other studies that include a greater number of samples should be conducted.

Técnicas moleculares como herramientas para el tamizaje viral. Estado actual del desarrollo de una técnica de RT-Multiplex-Nested PCR para el control de HIV en sangre / Molecular techniques for viral screening. RT-Multiplex-Nested PCR for HIV control in blood

Los índices de morbilidad y mortalidad en receptores de sangre aumentan drásticamente debido a la transmisión de infecciones virales por vía transfusional. Entre los virus transmitidos por sangre, el de mayor impacto sanitario y social es el virus de la inmunodeficiencia humana tipo 1 (HIV-1). A pesar de que la implementación del tamizaje de anticuerpos para HIV en los Bancos de Sangre de Argentina ha permitido reducir considerablemente la transmisión del virus por vía sanguínea, existe en la actualidad evidencia suficiente de la transmisión de HIV por unidades de sangre con serología negativa. En los Bancos de Sangre de la mayoría de los países europeos y en los Estados Unidos se utilizan, desde el año 1999, técnicas de amplificación de ácidos nucleicos (NAT) para detectar HIV y HCV, con el fin de reducir el período de ventana inmunológica. En este trabajo realizamos una actualización del uso de las técnicas moleculares como herramientas de tamizaje de HIV en la sangre destinada a transfusión y presentamos los resultados preliminares obtenidos a partir del desarrollo de una técnica molecular artesanal: transcripción reversa y reacción en cadena de la polimerasa anidada (RT-Multiplex-Nested PCR), de alta sensibilidad y de bajo costo. Los resultados obtenidos demuestran que la sensibilidad y la especificidad de esta técnica para detectar cepas de HIV regionales están dentro de los límites establecidos por las reglamentaciones internacionales. En esta etapa del trabajo se está realizando la validación de la técnica desarrollada utilizando estándares internacionales. Esta última técnica podrá ser utilizada para el control de la sangre en Córdoba, con el fin de reducir el riesgo de transmisión del virus HIV por esta vía.

Immunofluorescence assay reactivity patterns of serum samples presenting indeterminate Western blot results for antibodies to HIV-1 and HTLV-I/II in Cordoba, Argentina

Serum samples (n: 110) from blood donors and high risk individuals from Cordoba, Argentina with indeterminate HIV-1 and HTLV-I/II Wb profiles were studied for specific antibodies to HTLV-I/II and HIV-1 by indirect immunofluorescence assay (IFA) and for the presence or absence of HIV-1 and HTLV-I/II specific bands by Wb. This study was carried out in order to characterize their putative reactions with HIV-1 and HTLV-I/II proteins and to resolve the retrovirus infection status of these individuals. Results indicated that blood donors sera displaying indeterminate HIV-1 or HTLV-I/II Wb patterns were not immunoreactive to HTLV-I/II and HIV-1 on IFA. However, a high rate of indeterminate HIV-1 and HTLV-I/II Wb samples from high risk individuals had positive HTLV-I/II and HIV-1 IFA results respectively. Our study supports the growing evidence that HTLV-HIV indeterminate seroreactivity in low risk population is due to a cross reaction against nonviral antigens, and in high risk populations the indeterminate samples show serological cross-recognition between HIV-1 proteins and HTLV-I/II proteins on Wb. These results point out the necessity to investigate the HTLV-I/II reactivity in indeterminate HIV-1 samples and viceversa in order to confirm the diagnosis. Finally, this study shows the potential usefulness of IFA in elucidating the status of HIV-1 and HTLV-I/II infection of individuals with indeterminate Wb profiles, thus enabling resolution of retrovirus infection status

Efficiency of indirect immunofluorescence assay as a confirmatory test for the diagnosis of human retrovirus infection (HIV-1 and HTLV-I/II) in different at risk populations

Avaliou-se a eficiencia da tecnica de immunofluorescencia indireta (IFI) como metodo confirmatorio no diagnostico da infeccao por HIV-1 e HTLV-I/II. Para isto, processaram-se amostras com sorologia positiva ou negativa por Western blot (Wb) para ambos virus, pertencentes a populacoes em diferentes graus de risco de adquirir a infecao e determinaram-se os valores de sensibilidade, especificidade, valores preditivos positivo e negativo e o indice de concordancia Kappa da IFI para cada sistema viral em comparacao com o Wb. Como fontes de antigenos da IFI empregaram-se as linhas celulares H9 (HTLV-III b), MT-2 e MT-4 (persistentemente infectadas com HTLV-I), MO-T (persistentemente infectadas com HTLV-II). Os valores globais de sensibilidade e especificidade para o sistema HIV-1, foram 96,80 por cento e 98,60 por cento respectivamente, enquanto os valores preditivos positivo e negativo 99,50 por cento e 92,00 por cento respectivamente...