Aislamiento y propagación del virus de la hepatitis E en diferentes líneas celulares / Isolation and propagation of hepatitis E virus in several cell lines

Antecedentes: el virus de la hepatitis E es el agente causal de la hepatitis E. Las propiedades biológicas y moleculares de las cepas asiáticas del VHE ya han sido exploradas en cultivos celulares. Objetivos: aislar y propagar una cepa cubana del virus de la hepatitis E en diferentes líneas celulares. Métodos: la monocapa de las células A549 fue inoculada con una suspensión de heces obtenida de un paciente con diagnóstico serológico y molecular de hepatitis E. Estas células fueron observadas hasta el décimo pase. Mientras que, las líneas celulares MRC5, LLCMK2, HEP-2, FRhK4 y HeLa fueron utilizadas para propagar el virus de la hepatitis E, a partir del sobrenadante obtenido del tercer pase en A549. Estas células fueron seguidas hasta el tercer pase. El ARN y los antígenos de la cepa ECV/2349-03 fueron identificados por TR-RCP e inmunofluorescencia indirecta. Resultados: en las células A549 el ECP apareció desde el primer pase, a los 3 d de posinoculación. El genoma y los antígenos del virus fueron identificados en todos los pases seriados. En el resto de las líneas celulares estudiadas no se observó el ECP. En estas células el material genético del virus de la hepatitis E se detectó desde el primer pase y los antígenos a partir del segundo pase, excepto en las HeLa. Conclusiones: estos resultados confirman que las células A549 pueden ser utilizadas para aislar y propagar el virus de la hepatitis E, mientras que las células MRC5, LLCMK2, HEP-2 y FRhK4 son capaces de mantener el crecimiento viral.

Background: hepatitis E virus (HEV) is the causative agent of hepatitis E. Biological and molecular properties of Asian HEV strains have been explored in cells cultures. Objetives: the aim of this investigation was to isolate and propagate a Cuban HEV isolate in different cell lines. Methods: A549 cells monolayer was infected with faeces suspension from patient with sporadic hepatitis E and followed up until tenth passage. Lately, the supernatant harvested from third passage in A549 cells was inoculated in MRC5, HEP-2, LLCMK2, HeLa y FRhK4 for propagation study. These cells were observed up to third passage. RNA and viral antigen of ECV/2349-03 HEV strain were identified by RT-PCR and indirect immunofluorescence. Results: CPE appeared since first passage, at third day of post-inoculation in A549 cells. HEV antigens and genome were detected in all serial passages. CPE was not observed in the rest of cellular cultures. In the cells used for propagation the viral genome was observed from first passage, while the antigens were detected since second passage, except HeLa. Conclusions: these results confirm that A549 can be used to isolate and propagate HEV. Meanwhile, the MRC5, HEP-2, LLCMK2 and FRhK4 were able to support viral growing.

Reflexiones éticas sobre una aplicación científico-médica de actualidad: la distracción osteogénica / Osteogenic Distraction: ethical considerations on this current medical application

Un aspecto importante del progreso científico es el experimento. Por lo tanto, las ciencias médicas tienen que apoyarse en este para incorporar nuevas tecnologías, diagnósticas y terapéuticas a la práctica clínica; validando su seguridad y eficacia en animales y seres humanos. La ética de la experimentación con seres humanos no es sólo una de las áreas fundamentales de la bioética, sino también una de las problemáticas que le dieron origen. Se describen en este trabajo algunas implicaciones éticas y aspectos sociales de la experimentación en seres humanos, particularmente en el marco de la incorporación de una tecnología de punta como es la distracción osteogénica en la cirugía maxilofacial, para la reconstrucción de defectos combinados en tejidos duros y blandos; se analizan el origen y evolución de la bioética, los aspectos regulatorios para la realización de ensayos clínicos y su valoración moral, los tipos de experimentación; la realidad mundial y cubana en cuanto a investigación clínica y tecnología y el consentimiento informado. Se concluye que el criterio ético fundamental de las investigaciones en seres humanos es su disposición al servicio del hombre como fin y nunca como medio.

An important aspect of the scientific progress is the experiment. Therefore, the medical sciences have to lean on this to incorporate new technologies, diagnostic and therapeutic to the clinical practice; validating their security and effectiveness in animals and human beings. The ethics of the experimentation with human being is not only one of the fundamental areas of bioethics, but also one of the problems that brought about its origin. Some ethical implications and social aspects of the experimentation in human beings are described in this work, particularly while talking about the incorporation of a high technology in the ostegenic distraction in maxilofacial surgery for the reconstruction of defects combined in hard and soft fabrics; the origin and evolution of bioethics are analysed, the regulatory aspects for the realization of clinical rehearsals and their moral valuation, the experimentation types; the world and Cuban reality as for clinical investigation and technology and the informed consent. As a conclusion it is said that the fundamental ethical approach of the investigations in human beings is its disposition to the man's service as a goal and never as a way.

La Salud Pública en América Latina y El Caribe / Public Health in Latin America and the Caribbean

Se consideran a través de la situación de salud, las características de la Salud Pública en América Latina y el Caribe, su evolución y los hechos que justifican los procesos de reforma del sector, sus fuentes teóricas, la forma en que se desarrollan, y los problemas que enfrentan. Se describen las características esenciales de Colombia, Chile, México, Venezuela y se particulariza en el modelo cubano. Se realiza una reflexión final respecto a la contradictoria situación prevaleciente y se analiza su contexto político.

The characteristics of Public Health in Latin America and the Caribbean through the present health state of the region is considered. The evolution of these characteristics and the facts that justify the processes of reformation of the sector, as well as their theoretical sources ; the form in which they are developed, and the problems they face are also regarded. The essential characteristics of Colombia, Chile, Mexico, Venezuela and particularly those of the Cuban model are described. A final reflection regarding the contradictory prevalent situation and its political context is made.

Isolation and identification of Adenovirus in hospitalized children, under five years, with acute respiratory disease, in Havana, Cuba

Nine Adenovirus (Ad) strains isolated in Cuba, from 128 nasopharingeal swab specimens of children below five years old, with acute respiratory diseases, during 1996 and 1997, were studied by restriction enzyme analysis of genomic DNA with two endonucleases BamH I and Sma I. All different fragment patterns were compared with the respective prototypes. The identified adenoviruses were Ad 1 (n=4), Ad 2 (n=1) and Ad 6 (n=4). Males were more frequently infected than females. The analysis of the occurrence of these Adenovirus strains of subgenus C revealed that Ad 1 and Ad 6 were the predominant serotypes in 1996 and in 1997, respectively

Neumonía hemorrágica por Influenza virus: diagnóstico virológico / Hemorrhagic pneumonia caused by influenza virus: virological diagnosis

The paper presents the case of a female patient who was admitted to "Calixto GarcÝa" General Hospital with respiratory distress and hypovolemic or septic shock. She was diagnosed with viral hemorrhagic pneumonia. From the endotracheal secretion taken as a sample, the influenza virus was isolated as etiological agent, which, through the hemaglutination inhibition technique, was characterized as a strain belonging to H3N2 subtype, very similar to strain A/Johannesburg/33/94 from the antigenic viewpoint. The patient recovered satisfactorily after being treated with rivabirin.

Brote de meningoencefalitis por Coxsackievirus B5 en Cuba, 1995 / Outbreak of meningoencephalitis due to Coxsackievirus in Cuba, 1995

Se detectó un incremento en los casos reportados de meningoencefalitis viral (MEV) en los meses de octubre y noviembre de 1995 con respecto a igual período de 1994. Se recibieron en el Laboratorio de Enterovirus del Instituto de Medicina Tropical "Pedro Kouri" 43 muestras de heces fecales procedentes de niños con este diagnóstico, y se obtuvieron 23 aislamientos (53,4 por ciento) identificados como Coxsackievirus B5. Además, en 43 sueros pareados investigados por la prueba de neutralización frente a varios Enterovirus, se obtuvieron 21 positivos (48,8 por ciento) al agente aislado. Esto nos permitió afirmar, apoyados en el cuadro clínico y en la epidemiología, que estábamos en presencia de un brote de MEV producido por coxsackievirus B5

Comparación de la línea NCI-H292 con otras líneas continuas para la multiplicación de virus respiratorios

La línea continua NCI-H292 de células mucoepidermoides de pulmón humano ha sido reportada ser de utilidad para la propagación de muchos virus, principalmente Adenovirus y Paramyxovirus. Se plantea la posible sustitución de cultivos primarios de riñón de mono por NCI-H292 para el aislamiento de dichos agentes. En el presente trabajo se evalúa la utilidad de esta nueva línea para la multiplicación de los virus sincitial respiratorio, Adenovirus 3 y 7 y los virus parainfluenza 1, 2 y 3 en comparación con las líneas celulares continuas utilizadas tradicionalmente para la propagación de éstos; para lo cual se inocularon cepas de los virus en cuestión en las líneas Vero, HEp-2 y HeLa, según sus sensibilidades conocidas, y en NCI-H292 paralelamente. La multiplicación viral se detectó por aparición de efecto citopático o por hemadsorción. Como resultado se corroboró la capacidad de multiplicación de la línea NCI-H292 para los Adenovirus 3 y 7 y el parainfluenza 3, siendo más útil para la multiplicación de éstos que las líneas tradicionalmente usadas.

The NCI-H292 continual line of mucoepidermoid cells of the human lungs has been reported to be useful for the propagation of many viruses, mainly Adenovirus and Paraxymovirus. It is stated the possible substitution of primary cultures of monkey kidney for NCI-H292 in order to isolate such agents. In the present paper it is evaluated the utility of this line for multiplying the respiratory syncytial viruses Adenovirus 3 and 7, and the parainfluenza viruses 1, 2, and 3, in comparison with the continual cellular lines traditionally used for the propagation of these viruses, whose strains were inoculated this time in the Vero, HEp-2, and HeLa lines, according to their know sensitivities as well as in NCI-H292 simultaneously. The viral multiplication was detected by the appareance of the cytopathic effect or by hemaadsorption. As a result, it was demostrated the multiplication capacity of the NCI-H292 line for Adenoviruses 3 and 7 and parainfluenza 3, being more useful for their multiplication than the tradicionally used lines.

Tratamiento de la demencia senil tipo Alzheimer con campo magnetico y ozono / Treatment of senile dementia of the Alzheimer type with electromagnetic fileds and ozone

Se estudiaron 45 pacientes con diagnostico de demencia senil tipo Alzheimer, los cuales se dividieron aleatoriamente en 3 grupos de tratamiento: ozonoterapia rectal, magnetoterapia y tratamiento combinado. Se definieron 3 tipos de respuestas: regresion o mejoria, progresion y sin cambios, de acuerdo con la escala de deterioro global dependiente de la edad y de la enfermedad de Alzheimer, el miniexamen del estado mental de Folstein, el criterio familiar y de observacion del equipo medico de mejoria en manifestaciones psiquiatricasy conductuales, asi como otros indicadores que miden calidad de vida. Se obtuvo una respuesta de regresion o mejoria en el 60 por ciento de los casos con campo magnetico y ozonoterapia combinados al mes de tratamiento, siendo mantenida en el 46,6 por ciento de los pacientes, aun a los 6 meses de tratamiento, respuestasque no se obtuvo con el empleo del campo magnetico o del ozono, como metodos aislados. No se presentaron manifestaciones de toxicidad en los pacientes