ABSTRACT
@#[摘 要] 目的：探讨miRNA let-7i-5p在肾细胞癌（renal cell carcinoma，RCC）组织中的表达水平及其对RCC细胞769-P的增殖、迁移、侵袭和透明质酸结合蛋白4（hyaluronan-binding protein 4，HABP4）表达的影响。方法：利用TCGA RCC数据库及GEO数据库对let-7i-5p在RCC组织中的表达进行meta分析。体外常规培养人RCC细胞769-P并对其进行转染，根据转染物不同分为过表达组（转染let-7i-5p模拟物）、抑制组（转染let-7i-5p抑制物）和对照组（转染NC序列）。采用CCK-8、细胞划痕实验、Transwell实验及WB法检测let-7i-5p对769-P细胞增殖活力、划痕愈合率、穿膜侵袭细胞数及HABP4表达水平的影响。双荧光素酶报告基因实验验证let-7i-5p与HABP4 mRNA的靶向关系。结果：分析TCGA RCC数据库及5个GEO数据集（GSE23085、GSE47582、GSE95385、GSE16441和GSE71302）中数据结果显示，let-7i-5p在RCC组织中的表达水平显著高于正常肾组织（均P<0.05）。体外实验结果显示，与对照组相比，过表达组在24、48及72 h时细胞增殖活力显著升高，而抑制组显著降低（均P<0.01）；过表达组的划痕愈合率[（37.276±2.058）% vs（15.663±2.949）%，P<0.01]和穿膜侵袭细胞数[（377.000±34.044） vs （255.667±25.384）个，P<0.01]均显著升高，而抑制组的划痕愈合率[（8.791±2.568）% vs（15.663±2.949）%，P<0.05]和穿膜侵袭细胞数[（170.333±14.978）vs（255.667±25.384）个，P<0.01]均显著降低。在野生型HABP4-3’ URT质粒组中，过表达let-7i-5p可显著抑制细胞的荧光素酶活性（P<0.01）；而在突变型HABP4-3’ URT质粒组中，过表达let-7i-5p对细胞的荧光素酶活性无影响（NS，P>0.05）。WB检测结果显示，与对照组相比，过表达组的HABP4和E-cadherin的水平均降低（均P<0.01）、CDK2的水平升高（P<0.01），而抑制组则相反（均P<0.01）。结论：Let-7i-5p在RCC组织中呈高表达，其可能通过靶向HABP4基因来促进769-P细胞的增殖、迁移和侵袭。