Editing the Human Genome with CRISPR/Cas: A Review of its Molecular Basis, Current Clinical Applications, and Bioethical Implications

ABSTRACT CRISPR/Cas genes evolved in prokaryotic organisms as a mechanism of defense designed to identify and destroy genetic material from threatening viruses. A breakthrough discovery is that CRISPR/Cas system can be used in eukaryotic cells to edit almost any desired gene. This comprehensive review addresses the most relevant work in the CRISPR/Cas field, including its history, molecular biology, gene editing capability, ongoing clinical trials, and bioethics. Although the science involved is complex, we intended to describe it in a concise manner that could be of interest to diverse readers, including anyone dedicated to the treatment of patients who could potentially benefit from gene editing, molecular biologists, and bioethicists. CRISPR/Cas has the potential to correct inherited diseases caused by single point mutations, to knock-in the promoter of a gene whose expression is highly desirable or knockout the gene coding for a deleterious protein. CRISPR/Cas technique can also be used to edit ex vivo immune cells and reinsert them in patients, improving their efficiency in attacking malignant cells, limiting the infectious potential of viruses or modulating xenotransplant rejection. Very important bioethical considerations on this topic include the need to internationally regulate its use by ad hoc expert committees and to limit its use until safety and bioethical issues are satisfactorily resolved.

Prototipo de alimento deshidratado con base en harina de auyama enriquecido con fuentes proteicas no convencionales / Prototype of dehydrated food based on butternut squash flour enriched with non-conventional protein sources

RESUMEN Debido al contenido de macronutrientes, micronutrientes y antioxidantes, la ingesta de hortalizas y de legumbres en la dieta puede reducir el riesgo de enfermedades, por tanto, el objetivo de esta investigación fue desarrollar un prototipo de alimento deshidratado con base en harina de auyama (Cucurbita moschata Duchense), enriquecido con fuentes proteicas, provenientes de granos. Se establecieron seis tratamientos empleando nueve materias primas, variando el porcentaje de cada una de ellas, donde la mayor proporción correspondió a la harina de auyama, se realizó un análisis bromatológico para cada materia prima y tratamiento. Posteriormente, se adelantó el análisis de carotenos totales, carbohidratos y calorías; para las variables materia seca (MS), cenizas, grasa, proteína cruda (PC), fibra detergente ácida (FDA) y fibra detergente neutra (FDN), se empleó un análisis de varianza y para la prueba sensorial, se aplicó la prueba Friedman, con 60 jueces. Al emplear los factores de conversión Atwater, los resultados indicaron que los materiales seleccionados para formular un prototipo de alimento deshidratado presentan bajo contenido de fibra detergente neutra (FDN) y fibra detergente ácida (FDA). La prueba de Friedman estableció que el mejor tratamiento para los 60 evaluadores fue el 6 seguido del 1, con la inclusión de harina de auyama del 15 y 20 %, respectivamente. Se concluye que, a partir de la inclusión de harina de hortaliza y de leguminosas es posible obtener un producto deshidratado con alto contenido de macronutrientes.

ABSTRACT Due to the content of macronutrients, micronutrients, and antioxidants, the intake of vegetables and legumes in the diet can reduce the risk of diseases, therefore, the objective of this research was to develop a prototype of dehydrated food based on butternut squash (Cucurbita moschata Duchense) enriched with protein sources from grains. six treatments were established using nine raw materials, varying the percentage of each of them, where the highest proportion corresponded to butternut squash, a bromatological analysis was carried out for each raw material and treatment. Subsequently, the analysis of total carotenoids, carbohydrates, and calories was carried out; for the variables dry matter (DM), ashes, fat, crude protein (CP), acid detergent fiber (ADF), and neutral detergent fiber (NDF), an analysis of variance was used and for the sensory test the Friedman test was performed with 60 judges. When using the Atwater conversion factors, the results indicated that the materials selected to formulate a dehydrated food prototype have a low content of neutral detergent fiber (NDF) and acid detergent fiber (ADF). The Friedman test established that the best treatment for the 60 evaluators was 6 followed by 1, with the inclusion of butternut squash at 15 and 20 %, respectively. It is concluded that, from the inclusion of vegetable and legume flour, it is possible to obtain a dehydrated product with a high content of macronutrients.

Un análisis de la Estrategia Curricular de Inglés de la carrera Cultura Física / An Analysis about the English Curricular Strategy for Physical Culture degree

RESUMEN La presente investigación tiene como objetivo exponer un análisis de las tendencias y regularidades de la Estrategia Curricular de Inglés en la carrera de Cultura Física, en la Universidad de Pinar del Río, con el propósito de presentar un conjunto de acciones que permitan minimizar las insuficiencias presentadas durante la implementación de dicha estrategia. Para ello se utilizaron métodos fundamentalmente a nivel empírico, tales como el análisis de documentos, la encuesta y la entrevista. Se trabajó con una muestra de 56 estudiantes de II, III y IV años (curso regular diurno) de la Facultad de Cultura Física y 10 profesores, quienes imparten las diferentes asignaturas en estos años. Como resultado trasciende un conjunto de insuficiencias, las cuales denotan que en la práctica la estrategia no ha cumplido las expectativas para que fue diseñada. El trabajo sugiere los aspectos a tenerse en cuenta para optimizar la aplicación de la Estrategia Curricular de Inglés, en el contexto de la nueva política para el perfeccionamiento de la enseñanza del inglés en la Educación Superior Cubana.

ABSTRACT This research is aimed at stating an analysis of the English Curricular Strategy tendencies and regularities in the Physical Culture degree of Pinar del Rio University, leading to introduce actions able to reduce insufficiencies in the already mentioned strategy implementation. To meet the goal, it was used mainly empirical methods such as documents `analysis, the survey and the interview. It was considered a sample of 56 students from I, II, III and IV years (Daytime Regular Course) of Physical Culture Faculty and 10 teachers who teach the different subjects in these years. As the result a group of insufficiencies transcends, which convey that in the practice, the strategy has not achieved the mission it was designed for. The work suggests some aspects that should be taken into consideration to optimize the strategy application in the context of the new policy about the English teaching improvement in the Cuban Higher Education.

Reconocimiento y Participación de nuevos agentes educativos en la Escuela: Auxiliares de la Educación / Recognition and participation of new educational agents in the school: Educational assistants

Resumen Los auxiliares de la educación, es una categoría que abarca a las personas que trabajan en Instituciones Educativas como: vigilantes, conserjes, asistentes administrativos, personal de aseo, secretarias, entre otros. Se plantea desde un enfoque hermenéutico interpretativo, la incidencia de este personal en el proceso educativo. Por ello se precisa analizar la posición que éstos asumen en diferentes situaciones que se presentan en la convivencia escolar permitiendo, desde las categorías de emociones y reconocimiento, identificar sus aportes al proceso formativo en la Institución Educativa.

Abstract Educational assistants corresponds to a category that comprises people working for educational institutions, such as security guards, custodians, administrative assistants, cleaning staff, secretaries, among others. The incidence of this staff on the educational process is posed from a hermeneutical interpretive approach. For that reason, it is necessary to analyze the position that these people take on in different situations that arise in the school coexistence allowing, from the categories of emotions and recognition, to identify their contributions to the training process in the educational institution.

Enfermedad de moyamoya: presentación de un caso y discusión / Moyamoya Disease: Case Report and Discussion

La enfermedad de moyamoya es una rara afección cerebrovascular, caracterizada por estenosis bilateral de la carótida interna en su porción terminal y por el desarrollo de vasculatura colateral anormal en la base del cerebro, secundario a un proceso isquémico. Su etiología es desconocida, pero se cree que es un trastorno genético. En el presente artículo, a propósito de un caso clínico de un paciente masculino de 24 años de edad con diagnóstico de esta enfermedad luego de un trauma craneano, se presenta una revisión corta de la bibliografía actual en cuanto al diagnóstico por imágenes de la enfermedad de moyamoya.

Moyamoya disease is a rare cerebrovascular disease characterized by bilateral internal carotid artery stenosis in its terminal portion and by the development of abnormal collateral vasculature in the base of the brain, secondary to an ischemic process. Its etiology is unknown, but it is believed to be a genetic disorder. The purpose of this article is a short review of the current literature of diagnostic imaging of moyamoya disease regarding the case of a 24 year old male patient with this condition, diagnosed after head trauma.

MLPA (amplificación de sondas dependiente de ligandos múltiples) en el diagnóstico perinatal rápido de las principales aneuploidías / MLPA (multiplex ligation-dependent probe amplification) in perinatal rapid diagnosis of major aneuploidies

Introducción: El MLPA (amplificación de sondas dependiente de ligandos múltiples) es un método reciente, basado en la reacción en cadena de la polimerasa (RCP), de cuantificación relativa del número de copias normales y anormales de ácido desoxirribonucleico (ADN) de hasta 40 secuencias genómicas diferentes. Su uso se ha difundido tanto en la investigación como en el diagnóstico clínico. Recientemente, el MLPA se ha utilizado en diagnóstico prenatal y en el estudio de abortos. Objetivo: Presentar los primeros resultados obtenidos con MLPA en el diagnóstico perinatal de las principales aneuploidías de los cromosomas 13, 18, 21, X y Y. Material y métodos: Se obtuvo ácido desoxirribonucleico genómico de tejidos sin cultivar de aborto, biopsia de vellosidades coriales (VC), líquido amniótico (LA), cordón umbilical (CU) de óbitos o sangre periférica (SP) de recién nacidos, en 13 casos con patología perinatal. Para el MLPA se utilizó el kit p 290 para diagnóstico prenatal y sus productos se cuantificaron en un secuenciador ABI Prism 3130. Todos los casos se procesaron para cariotipo en forma paralela. Resultados: Se obtuvieron resultados con MLPA entre dos y tres días en las 13 muestras estudiadas. Seis de ellas mostraron aneuploidías. El cariotipo se obtuvo entre 15 y 21 días en 11 casos, cinco fueron aneuploides y dos fallaron. Los resultados entre MLPA y cariotipo fueron concordantes en las fallas del cultivo celular, el diagnóstico se obtuvo por MLPA. Conclusiones: El MLPA es un método útil y rápido en el diagnóstico perinatal de las principales aneuploidías; además, tiene la ventaja de permitir estudiar tejidos con baja viabilidad celular como ocurre en algunos casos de aborto u óbito.

Introduction: The MLPA (multiplex ligation-dependent probe amplification) is a new method based on polimerase chain reaction (PCR) for relative quantification of normal and abnormal numbers of copies of desoxyribonucleic (DNA), up to 40 different genomic sequences. Its use is widespread in both, research and clinical diagnosis. MLPA recently began to be used in prenatal diagnosis and study of pregnancy losses. Objective: Present the first results obtained with MLPA in perinatal diagnosis of major aneuploidies of chromosomes 13, 18, 21, X and Y. Methods: Genomic DNA was obtained from different uncultivated tissues: abortion, chorionic villus, amniotic fluid, umbilical cord blood or peripheral blood in 13 cases with perinatal pathology. MLPA kit p290 for prenatal diagnosis was used and its products were quantified in ABI Prism 3130 sequencer. All cases were processed in parallel for karyotype. Results: MLPA results were obtained in 2 to 3 days in the 13 samples studied. Six of them showed aneuploidy. Karyotype was obtained between 15 and 21 days in 11 cases, five were aneuploidy and two failed. The results obtained with MLPA and karyotypes were concordant and in cases where the cell culture failed, the diagnosis was obtained by MLPA. Conclusions: MLPA is a rapid and useful method in the perinatal diagnosis of major aneuploidies, it also has the advantage of allowing the study of tissues with low cell viability, as in some cases of abortion and fetal death.

Análisis descriptivo de los pacientes del departamento 6, varones, del Instituto Psiquiátrico Dr. José Horwitz Barak / Patients' descriptive analysis of departament 6 of men at the Instituto Psiquiátrico Dr. José Horwitz Barak

Se presentan los resultados de un estudio descriptivo realizado por el equipo profesional del Departamento 6 varones de larga estadía del Instituto Psiquiátrico, con la intensión de revisar parámetro, tanto clínicos como sociales y de rehabilitación, para someterlos a un estudio comparativo y confirmar la hipótesis que sugiere que la situación biopsicosocial y de rehabilitación de estos pacientes es significativamente mejor que antes. El estudio incluye resultados obtenidos en 15 pacientes a los cuales se ha incorporado a su esquema terapéutico, el fármaco clozapina. Se demuestran importantes cambios favorables. Se describen además, resultados electroencefalográficos en este grupo. Los resultados corroboran lo planteado en la hipótesis de trabajo. Se verifican avances significativos en su rehabilitación, estado clínico y parámetros sociales

Tres casos de psitacosis / Three cases of psittacosis

Se presentan tres casos clínicos de psitacosis, uno con manifestaciones exclusivamente respiratorias y dos que asociaron compromiso extrarrespiratorio: hematológico, encefálico y renal. El diagnóstico etiológico fue sospechado por el cuadro clínico y el antecedente epidemiológico. En un caso se confirmó al verificarse un cambio significativo en el título de anticuerpos específicos, mientras que en los otros dos la sospecha fue reafirmada por un estudio serológico positivo y la buena rápida respuesta al tratamiento con doxiciclina. El interés de la presente comunicación reside en recordar que Chlamydia psittaci es uno de los agentes causales de neumopatías adquiridas en la comunidad y que esta etiología debe ser sospechada cuando existe el antecedente epidemiológico, y el cuadro clínico es compatible. Además se destacan las distintas maneras de presentarse la infección y los diferentes niveles de gravedad que pueden adoptar, yendo desde las formas inaparentes, hasta la enfermedad generalizada grave, donde varios parénquimas pueden estar comprometidos, y existir riesgo vital en los casos de falla orgánica

Efectividad de la Penicilina V para el control de la infección postquirúrgica en odontectomías de terceros molares incluidos / V Penicillin effectiveness in post-surgical infecction in odontectomies of included third molars

Este estudio fué realizado para evaluar la efectividad en la infección postquirúrgica en odontectomía de terceros molares incluídos en cuarenta pacientes, tomando un grupo control y otro experimental de 20 pacientes, respectivamente; los dos grupos evaluados fueron escogidos con las necesidades quirúrgicas del estudio, no teniendo en cuenta edad ni sexo. Fueron observados por medio de exámenes de laboratorio: Cuadro hemático, Frotis y Cultivo; con muestras prequirúrgicas y postquirúrgicas al tercer y séptimo día postoperatorio; no se encontraron diferencias estadísticamente significativas entre los dos grupos analizados de acuerdo a los parámetros usados para la evaluación. Los resultados indican que la penicilina V no tiene mayor efecto en la infección secundaria postquirúrgica seguida de odontectomías de terceros molares incluídos, comparada con un grupo control, siempre y cuando se mantengan principios básicos de cirugía oral

Alteración de la distribución de subpoblaciones T en la sangre periférica de pacientes con anemia severa idiopática / Changes in distribution of T subpopulations in the peripheral blood of patients with severe idiopathic anemia

Se efectuaron estudios inmunológicos en células mononucleares de sangre periférica de 17 pacientes con diagnóstico de aplasia severa de médula ósea (AMO): a) fenotipo linfocitario; b) respuesta proliferativa a la PHA; c) valoración de la producción de interleukina 2 (IL2) y expresión del antígeno CD25 (Tac). El rango de edad fue de 4 a 25 años. De los diecisiete enfermos 15 presentaron una disminución significativa de la relación CD4/CD8 (0,72 + ou- 0,19 VN: 1,8 + ou - 0,6). La respuesta proliferativa a la PHA fue normal en el 80% y sólo 2 pacientes mostraron una respuesta disminuida. La producción de IL2 por células mononucleares estimuladas con PHA se encontró significativamente aumentada con deficiencia en la expresión del antígeno CD25. En los 2 pacientes restantes observamos una relación CD4/CD8 normal, no respuesta proliferativa a la PHA e hipoproducción de IL2. Estos datos sugieren la existencia de diferentes grupos de AMO que presentan grados de compromiso inmunológico vaiable y que podrían delinearse mediante perfiles de laboratorio. Por otra parte, la alteración en la distribución de poblaciones reguladoras, fundamentalmente a expensas de una disminución absoluta de la subpoblación CD4+ en la mayoría de nuestros pacientes, asociada a la hiperproducción de IL2 y alteración diferente de expresión del antígeno Tac sugiere la existencia de alteraciones funcionales de esta subpoblación en pacientes con AMO