Training tuberculosis laboratory workers in LED-fluorescence microscopy: experience learned in Argentina / Capacitación de trabajadores de laboratorios de tuberculosis en microscopia de fluorescencia LED: experiencia en Argentina

ABSTRACT Objective To assess a LED-fluorescence microscopy (LED-FM) capacitation program for the training of laboratory technicians without previous experience in FM. Methods We evaluated a teaching program that consists of a three-day course followed by an "in situ" two-month phase in which technicians acquired skills without the help of a FM expert; in order to gain confidence to recognize auramine-stained bacillus, during this phase, technicians examined duplicate slides stained by Ziehl Neelsen (ZN) and FM in a unblinded way. Technicians with acceptable performance, continued with a blinded-training period. Testing panels and rechecking process were used to evaluate proficiency after different length of experience. Results Post-course panel results showed that 70% of trainees made Low False Positive errors (LFPs). Analysis of two other panels showed that LFPs significantly decreased (Chi-squared test, p<0.05) as the "in situ" training phase progressed. Processing at least three slides/day was associated with acceptable performance. During the blinded-training period, results of the rechecking process showed that sensitivity (96.8%) and specificity (99.8%) levels were satisfactory. Conclusion Moderate training (a three-day course) is not enough to make technicians proficient in LED-FM; however, great ability can be reached after a short "in situ" training phase even without the presence of experienced staff available in field to review doubtful results. Training was more effective in services with a minimum workload of 750 slides/year.(AU)

RESUMEN Objetivo Evaluar un programa de capacitación en microscopía de fluorescencia LED (MF-LED) para el entrenamiento de técnicos de laboratorio sin experiencia en MF. Métodos Se evaluó un programa de capacitación que consiste en un curso de tres días seguido de dos meses de entrenamiento «in situ¼, en donde los técnicos adquirieron habilidades sin presencia de un experto en la práctica diaria; para alcanzar confianza en el reconocimiento del bacilo, los técnicos, durante estos meses, examinaron en forma «no cegada¼ extendidos duplicados teñidos por Ziehl Neelsen (ZN) y MF. Aquellos laboratoristas que lograron rendimiento aceptable continuaron su entrenamiento «a ciegas¼. Su desempeño fue evaluado en distintos períodos del entrenamiento mediante paneles de láminas y relectura de extendidos. Resultados Los resultados de un panel posterior al curso mostraron que 70% de los participantes cometieron errores falsos positivos bajos (FPB). Dos paneles posteriores evidenciaron que los FPB disminuían significativamente (prueba de Chi cuadrado, p<0.05) a medida que el entrenamiento avanzaba. El procesamiento de al menos tres extendidos/ día se asoció con desempeño aceptable. Durante el período a ciegas, la relectura de láminas evidenció que la sensibilidad (96,8%) y especificidad (99,8%) fueron satisfactorias. Conclusiones Una capacitación moderada (curso de tres días) no es suficiente para adquirir competencia en MF-LED; sin embargo, se puede alcanzar habilidad después de una corta capacitación «in situ¼, incluso si no hay personal con experiencia disponible en el servicio para revisar los resultados dudosos diariamente. El entrenamiento fue más efectivo en servicios con carga de trabajo mínima de 750 extendidos/año.(AU)

Performance of LED fluorescence microscopy for the detection of acid-fast bacilli from respiratory samples in peripheral laboratories in Argentina / Rendimiento de la microscopía de fluorescencia LED para la detección de bacilos ácido-alcohol resistentes en muestras respiratorias en laboratorios periféricos de Argentina

ABSTRACT Introduction: Light-emitting diode fluorescence microscopy (LED-FM) has been endorsed by the World Health Organization (WHO) for tuberculosis diagnosis, but its accuracy in HIV-infected patients remains controversial, and only some few studies have explored procedural factors that may affect its performance. Objective: To evaluate the performance of LED-FM for tuberculosis diagnosis in patients with and without HIV infection using a newer, less expensive LED lamp. Materials and methods: We compared the performance of LED-FM and Ziehl-Neelsen (ZN) microscopy on respiratory specimen smears from tuberculosis (TB) suspects and patients on treatment examined by different technicians blinded for HIV-status and for the result of the comparative test. We analyzed the effect of concentrating specimens prior to microscopy using different examination schemes and user-appraisal of the LED device. Results: Of the 6,968 diagnostic specimens collected, 869 (12.5%) had positive Mycobacterium tuberculosis cultures. LED-FM was 11.4% more sensitive than ZN (p<0.01). Among HIV-positive TB patients, sensitivity differences between LED-FM and ZN (20.6%) doubled the figure obtained in HIV-negative patients or in those with unknown HIV status (9.3%). After stratifying by direct and concentrated slides, the superiority of LED-FM remained. High specificity values were obtained both with LED-FM (99.9%) and ZN (99.9%).The second reading of a sample of slides showed a significantly higher positive detection yield using 200x magnification (49.4 %) than 400x magnification (33.8%) (p<0.05). The LED-device had a very good acceptance among the technicians. Conclusion: LED-FM better performance compared with ZN in HIV-infected patients and user-appraisal support the rapid roll-out of LED-FM. Screening at 200x magnification was essential to achieve LED-FM increased sensitivity.

RESUMEN Introducción. La microscopía de fluorescencia con lámpara LED (MF-LED) ha sido recomendada por la Organización Mundial de la Salud (OMS) para el diagnóstico de la tuberculosis, pero su precisión en pacientes con HIV continúa siendo controversial y en pocos estudios se han explorado los factores metodológicos que pueden afectar su utilidad. Objetivo. Evaluar el rendimiento de la MF-LED en el diagnóstico de la tuberculosis en pacientes con HIV y sin él mediante un novedoso dispositivo LED. Materiales y métodos. Se comparó el rendimiento de la MF-LED y la microscopía en frotis de muestras respiratorias con tinción de Ziehl-Neelsen (M-ZN) examinados por técnicos cegados en cuanto al estado de HIV y el resultado de la prueba comparativa. Se analizó el efecto de concentrar muestras antes de la microscopía, usar diferentes esquemas de observación y la valoración con el dispositivo LED. Resultados. De las 6.968 muestras recolectadas, 869 (12,5 %) resultaron con cultivo positivo para Mycobacterium tuberculosis. La MF-LED fue 11,4 % más sensible que la M-ZN (p<0,01). Entre los pacientes con tuberculosis positivos para HIV, la diferencia de sensibilidad entre la MF-LED y la M-ZN (20,6 %) duplicó la cifra obtenida en pacientes negativos para HIV o con estatus desconocido (9,3 %). Al estratificar los frotis en directos y concentrados, se mantuvo la superioridad de la MF-LED. Las especificidades de la MF-LED (99,9 %) y la M-ZN (99,9 %) resultaron elevadas. La lectura de una muestra de frotis mostró una positividad significativamente mayor con un aumento de 200X (49,4 %) que con uno de 400X (33,8 %) (p<0,05). El dispositivo LED tuvo una buena aceptación entre los técnicos. Conclusión. Debido al mejor desempeño de la MF-LED comparada con la M-ZN en pacientes con HIV y su fácil utilización, se recomienda su adopción. La utilización del aumento de 200X fue esencial para el incremento de la sensibilidad de la MF-LED.

Tratamiento de la tuberculosis pulmonar en un área urbana de baja prevalencia: Cumplimiento y negativización bacteriológica / Treatment of pulmonary tuberculosis in a low-prevalence urban area: Compliance and sputum conversion

Varios factores podrían relacionarse con la demora en la negativización bacteriológica de la tuberculosis pulmonar (TBp), aun con adecuado tratamiento. Para determinar su papel en la negativización bacteriológica al segundo mes de tratamiento, se analizaron retrospectivamente las características clínicas, demográficas, radiológicas, microbiológicas y terapéuticas de 196 casos nuevos de TBp con baciloscopia positiva bajo tratamiento directamente observado (TDO) en un área urbana de baja prevalencia de TB (tasa notificada: 14.9 casos/100 000 habitantes, 2010-2011). El porcentaje de pacientes con exámenes bacteriológicos fue 79.1% (155/196) al segundo mes y 74.7% (121/162) al final del tratamiento; aquellos con comorbilidades o que realizaban TDO en servicios con laboratorio tuvieron porcentajes significativamente mayores. La alta carga bacilar (OR 13.8, 95% IC 1.8-108.0) y la diabetes (OR 7.4, 95% IC 2.0-27.0) se asociaron a la persistencia de baciloscopia positiva; la presencia de cavernas (OR 4.6, 95% IC 1.1-20.5) y diabetes (OR 3.3, 95% IC 1.1-10.5) se relacionaron con la persistencia del cultivo positivo. La sensibilidad de la baciloscopia con respecto al cultivo positivo al segundo mes de tratamiento fue 63.9% (23/36) y su especificidad 82.4% (98/119); el limitado valor predictivo de la baciloscopia sobre los resultados del cultivo evidencia la necesidad de encontrar otros marcadores de esterilización del esputo. La identificación de los factores asociados a la persistencia de la infecciosidad contribuye al cuidado de pacientes y a la asignación de recursos. La prolongada infecciosidad de los pacientes diabéticos indicaría la necesidad de rever las estrategias de control de la TB.

Several factors could be responsible for a delay in bacteriological conversion of sputum in patients with pulmonary tuberculosis (pTB) even under proper treatment. We aimed to determine those factors associated with follow-up test compliance and bacteriologic conversion at month two of treatment in patients with pTB who were receiving directly controlled treatment (DOT) in an urban area with low TB burden (notification rate: 14.9 cases/100 000, 2010-2011). We retrospectively analyzed the clinical, demographic, radiological, microbiological and therapeutic characteristics of 196 new smear-positive pTB cases. The proportion of patients who underwent bacteriological examination was 79.1% (155/196) and 74.7% (121/162) at the second and last month of treatment. Smear examinations were significantly more frequent in patients with co-morbidities or receiving DOT in health facilities with laboratory access.. Diabetes (OR 17.4, 95% CI 2.0 - 27.0) and high smear grade (OR 13.8, 95% CI 1.8 - 108.0) were highly associated with persistent positive smears. Cavitation (OR 4.6, 95%, CI 1.1-20.5) and diabetes (OR 3.3, 95% CI 1.1-10.5) were associated with persistent positive cultures. Smear examination results at two months of treatment indicated a sensitivity of 63.9% (23/36) and a specificity of 82.4% (98/119) in relation to culture. The limited predictive value of smear examination relative to culture results indicated the need to find other markers for sputum conversion. Identification of risk factors associated with persistent sputum positivity could contribute to patient care and resource allocation. Prolonged infectiousness in patients with diabetes could indicate the need to review TB control strategies.

La tuberculosis zoonótica en la Argentina / Zoonotic tuberculosis in Argentina

Existen importantes logros en el control de la tuberculosis (TB) animal en la Argentina. Los porcentajes de bovinos con lesiones TB halladas en mataderos disminuyeron de 6.7% a 0.7% entre 1969 y 2011. En salud pública, el porcentaje promedio de TB por M. bovis sobre el total de los casos confirmados bacteriológicamente, fue en Santa Fe -provincia agro industrial- 2.3% en el período 1977-2001 y 1.6% entre 2002 y 2011. En Buenos Aires, en el Hospital Cetrángolo, ese porcentaje fue 0.34% (2001-2005) y 0.36% (2006-2011). En el Hospital Muñiz disminuyó de 1.75% en 1971 a 0.22% en 2006. La frecuencia de HIV entre los casos de M. bovis varió de 5.9% en Santa Fe a 11.1% y 20.5% respectivamente en los Hospitales Cetrángolo y Muñiz de Buenos Aires. En conjunto, la infección por M. bovis es más importante en las zonas rurales/ agro industriales, con un lento descenso, también observado en Buenos Aires. La coinfección por HIV es más frecuente en pacientes con M. bovis que en el conjunto de los casos de TB. Comparando la situación de la Argentina con la de EE.UU. y países de Europa y América Latina, se observa que las tendencias de la TB en el ganado, en humanos y la frecuencia relativa del M. bovis en salud pública, no siempre siguen una relación estrecha. Para avanzar hacia la meta común de erradicación de la TB, el empleo de estrategias adecuadas y el fortalecimiento de las medidas de control son fundamentales para ambos programas.

There are significant achievements in the control of animal tuberculosis (TB) in Argentina. The percentage of bovines with apparent TB lesions at the slaughterhouse inspection decreased from 6.7% to 0.6% between 1969 and 2011. On the other hand, the mean percentage of human TB cases due to M. bovis among all those bacteriologically confirmed, was in Santa Fe, an agro-industrial province, 2.3% in the period 1977-2001. It fell to 1.6% by 2011. In the Cetrángolo Hospital (Buenos Aires), it was 0.34% in the period 2001-2005, and 0.36% in 2006-2011. At the Muñiz Hospital, these percentages decreased from 1.75% in 1971 to 0.22% in 2006. Frequency of HIV infection among M. bovis cases varied from 5.9% in Santa Fe to 11.1% and 20.5% respectively, in Cetrángolo and Muñiz Hospitals (a reference institution for aids) in Buenos Aires. According to these data M. bovis infection predominates in agro- industrial/ rural areas, showing a slow decrease there as well as in Buenos Aires. Co-infection with HIV is more frequent among patients with M. bovis that in all cases of TB. The situation of M. bovis in Argentina is here compared with that in USA and in several European and Latin American countries. Trends followed by TB in cattle, in humans, and the percentages of M. bovis among them, are not always closely related. To move towards the common goal of eradicating TB, the employment of appropriate strategies and the strengthening of control measures are critical in both programs.

Utilidad del ensayo de nitrato reductasa en la detección de Mycobacterium tuberculosis multirresistente en caso de recursos limitados / Utility of nitrate reductase assay for detection of multidrug-resistant Mycobacterium tuberculosis in a low resource setting

Introducción. El rendimiento de cualquier prueba rápida de sensibilidad a medicamentos para Mycobacterium tuberculosis puede cambiar cuando se pasa de la etapa de investigación a su implementación en la práctica de salud pública. Objetivo. Describir el rendimiento del ensayo de nitrato reductasa para detectar tuberculosis multirresistente en la rutina de trabajo de un laboratorio de referencia con recursos limitados. Materiales y métodos. Se comparó prospectivamente la utilidad del ensayo de nitrato reductasa con el método de las proporciones para la detección de resistencia a isoniacida y rifampicina en aislamientos de pacientes con riesgo de multirresistencia. Resultados. Comparando con el método de las proporciones, la sensibilidad del ensayo de nitrato reductasa fue de 86,8 % y 84,9 % para rifampicina e isoniacida, respectivamente; la especificidad fue 100 % para rifampicina e isoniacida. La sensibilidad del ensayo de nitrato reductasa fue significativamente mayor cuando se emplearon aislamientos en los cuales el tiempo entre la realización del cultivo y la inoculación del ensayo de nitrato reductasa no superaba 70 días: 94,3 % Vs. 78,1 % para resistencia a rifampicina usando aislamientos frescos o envejecidos, respectivamente; prueba exacta de Fisher, p=0,05; 94,4 % Vs. 74,3 % para resistencia a isoniacida usando aislamientos frescos o envejecidos, respectivamente, y prueba de ji al cuadrado, p=0,03. La proporción de resultados no interpretables en el ensayo de nitrato reductasa fue mayor en los aislamientos multirresistentes que en los otros Conclusiones. La experiencia con el ensayo de nitrato reductasa demuestra que produce resultados resistentes confiables. El uso de cultivos envejecidos conduciría a una mayor proporción de resultados falsos sensibles, mientras que su capacidad para detectar multirresistencia disminuye a consecuencia de una mayor proporción de resultados no interpretables.

Introduction. The performance of a drug susceptibility test may change when moving from the research stage to implementation on a population level in actual public health practice. Objective. The performance of a rapid drug susceptibility test was described for detecting multidrugresistant Mycobacterium tuberculosis when implemented in the routine workflow of a low-resource reference laboratory. Materials and methods. A prospective study was done comparing the performance of the nitrate reductase assay with the conventional proportion method for rifampicin and isoniazid on 364 isolates were obtained from multidrug-resistant tuberculosis risk patients referred from diffrent Colombian laboratories. Results. When compared with the proportion method, the nitrate reductase assay sensitivity was 86.8% and 84.9% for rifampicin and isoniazid, respectively, whereas nitrate reductase assay specificity was 100% for isoniazid and rifampicin. Nitrate reductase assay sensitivity was significantly higher when the age of isolate was less than 70 days. A sensitivity of 94.4% dropped to 78.1% for rifampicin resistance for fresh and old isolates, respectively (Fisher exact test, p=0.05). For isoniazid resistance using fresh and old isolates, 94.7% vs.74.3% sensitivities, were achieved (chi square test, p=0.03). The proportion of nitrate reductase assay ambiguous results was significantly higher in multidrug-resistant than in nonmultidrug-resistant isolates (17.6% vs. 4.0%, chi square test, p<0.005). Conclusions. The nitrate reductase assay demonstrated provided reliable results for antibiotic resistance. However, using old cultures leds to a higher proportion of false sensitive results; furthermore, the nitrate reductase assay capability to detect multidrug-resistant tuberculosis decreased due to a higher proportion of non-interpretable results.

Tuberculosis control and the private sector in a low incidence setting in Argentina / Control de la tuberculosis y sector privado en un sitio de baja incidencia de Argentina

Objectives Determining private doctors' (PD) knowledge and practice regarding tuberculosis (TB) control issues and exploring the availability of TB drugs in private pharmacies (PP) in a low incidence setting in Argentina (Santa Fe). Methods A questionnaire was applied to random sample of 87 PPs and 61 PDs, proportionally assigned according to the local distribution of specialists and general practitioners. Their knowledge and practice were explored regarding the symptoms, diagnosis and case management of pulmonary TB, as defined and specified by Argentinean TB management guidelines. Results Although most PDs were aware of the main symptoms presented by TB, they were unlikely to ask for a microscope examination for a person suffering persistent cough. More than 30 percent of PDs considered X-ray before "microscope examination of stained sputa" for TB diagnosis. PDs had significantly lower levels of knowledge regarding the symptoms and diagnostic procedures for TB compared to those who combined public and private work. Most PDs (91,3 percent) referred their TB patients to a public facility for treatment. Accordingly, very few TB drug prescriptions were managed in PPs. Discussion Addressing mismanagement of TB patients in the private sector does not appear to be a problem in Santa Fe in terms of treatment (although being considered crucial for effective TB control) because most PDs are aware of the TB programme which appears to be comprehensive and accessible. The private sector's main aim should be to improve its skills regarding TB diagnosis.

Objetivos Determinar prácticas y conocimientos de los médicos privados (MP) acerca del control de la tuberculosis (TB) y explorar la disponibilidad de drogas anti-TB en farmacias privadas (FP) en un entorno de baja incidencia de TB de Argentina. Métodos Se realizó una encuesta por cuestionario sobre una muestra aleatoria de 87 FP y 61 MP, asignados proporcionalmente según la distribución local de médicos especialistas y generalistas. Se investigaron conocimientos y prácticas en relación a síntomas, diagnóstico y manejo de casos de TB, según lo especifican las normas. Resultados Aunque la mayoría de los médicos conocían los principales síntomas, era poco probable que solicitaran exámenes microscópicos de esputo (EME) en pacientes con tos persistente. Más del 30 por ciento de los MP priorizaron la radiografía de tórax por encima del EME para el diagnóstico de TB. Los médicos que sólo trabajaban en el sector privado tuvieron niveles significativamente más bajos de conocimientos que los que trabajaban tanto en el sector público como privado. La mayoría de los MP (91,3 por ciento) referían sus pacientes para tratamiento a un servicio público. Concordantemente, el número de recetas de medicamentos anti-TB manejados por las FP era muy pequeño. Discusión Si bien se considera que, la búsqueda de una solución para el manejo inadecuado de casos en el sector privado es crucial para un control efectivo de la TB, en Santa Fe, éste no parece ser un problema importante, ya que la mayoría de los MP conocen el Programa de Control, que aparece como accesible. El principal objetivo del sector privado debería ser mejorar sus habilidades para el diagnóstico.

Serodiagnosis of tuberculosis: specific detection of free and complex-dissociated antibodies anti-mycobacterium tuberculosis recombinant antigens

The diagnostic test characteristics of detecting free and complex-dissociated IgG to three recombinant antigens of Mycobacterium tuberculosis (38-kDa, Ag16 and Ag85B), singly and in combination, were evaluated in sera from 161 tuberculous patients [smear-positive pulmonary TB (50), smear-negative pulmonary TB (pTBsm-) (60) and extrapulmonary TB (51)) and 214 control patients (mycobacteriosis (14), mycoses(14), leprosy(4), other underlying diseases (82) and healthy people (100)]. The individual antigens ranged from 25 percent to 42 percent in sensitivity and from 93 percent to 96 percent in specificity, while considering free IgG response. Addition of complex-dissociated antibodies against each individual antigen improved the sensitivity up to 55 percent. The number and levels of specific antibodies varied greatly from individual to individual. Combination of individual results for free and complex-dissociated IgG to 38-kDa, Ag16 and Ag85B offered 76 percent sensitivity and 83 percent specificity. When the three antigens were placed in the same well, the sensitivity was lower than that expected on the basis of single antigen (63 percent) but with a good specificity (95 percent), even in the group of mycobacteriosis or mycoses. The highest contribution of complex-dissociated IgG results to free IgG results was seen for the diagnosis of pTBsm- patients. In conclusion, although neither single recombinant antigen was reactive with most sera from TB patients even after the measurement of both free and complex-dissociated antibodies, the use of multi-antigen cocktails improved the diagnostic utility of the ELISA assay, allowing the identification of almost 70 percent of pTBsm-, with a high level of specificity; the use of additional, well selected antigens should lead to the detection of almost all patients with TB.

Diagnóstico bacteriológico de la tuberculosis en Argentina: resultados de una encuesta nacional / Bacteriological diagnosis of tuberculosis in Argentina: results of a national survey

Con el objetivo de evaluar recursos, prácticas y medidas de bioseguridad utilizados en el diagnóstico bacteriológico de tuberculosis y determinar la utilidad y alcance de las técnicas empleadas, se llevó adelante una encuesta transversal a laboratorios del sector público de Argentina utilizando un cuestionario estructurado. El análisis de los resultados mostró que la densidad de centros de microscopía y cultivo se encuentra al nivel o encima de lo recomendado por Organización Mundial de la Salud. El programa de control de calidad de microscopía cubre mayoritariamente los laboratorios con alta carga de trabajo. El promedio de baciloscopías/paciente fue bajo (1,6). El 25 por ciento de los laboratorios de cultivo empleaban protección respiratoria inadecuada. El aporte del cultivo a la confirmación de casos pulmonares en las jurisdicciones estuvo asociado a la proporción de muestras cultivadas. Globalmente, el porcentaje de pacientes pulmonares baciloscopía-negativa que fue confirmado bacteriológicamente fue de 18.9 por ciento; mientras que la may-oría de los casos extrapulmonares se confirmó sólo por cultivo (71,3 por ciento). Es prioritario aún el incremento del número de esputos estudiados por baciloscopía y cultivo, así como aumentar la cobertura de programa de control de calidad de microscopía; es fundamental proveer al personal de laboratorio de adecuada protección respiratoria y evaluación médica regular.

In order to assess laboratory resources, practices, and biosafety measures during mycobacterial testing and determine the usefulness and scope of mycobacterial techniques, a cross-sectional survey of public laboratories was conducted in Argentina using a structured questionnaire. Sputum smear analysis showed that both smear and culture testing centers are being provided at or above the WHO recommended density for such facilities. The microscopy quality assessment program covered most high-demand laboratories. Mean number of sputum smears per patient was low (1.6). The use of inadequate personal respiratory protection was identified in 25 percent of culture laboratories. Jurisdictions that cultured a higher proportion of their smear-tested sputa identified a higher proportion of smear-negative cases. The percentage of smear negatives among all bacteriologically confirmed pulmonary cases was 18.9 percent, while most extrapulmonary cases were confirmed by culture (71.3 percent). In conclusion, increasing the number of sputa studied by microscopy and culture (while expanding the coverage of the quality assessment program) is a priority; adequate respiratory protection and regular medical evaluation of laboratory staff is still needed in some laboratories.

Evaluation of rapid alternative methods for drug susceptibility testing in clinical isolates of Mycobacterium tuberculosis

A study was carried out to compare the performance of a commercial method (MGIT) and four inexpensive drug susceptibility methods: nitrate reductase assay (NRA), microscopic observation drug susceptibility (MODS) assay, MTT test, and broth microdilution method (BMM). A total of 64 clinical isolates of Mycobacterium tuberculosis were studied. The Lowenstein-Jensen proportion method (PM) was used as gold standard. MGIT, NRA, MODS, and MTT results were available on an average of less than 10 days, whereas BMM results could be reported in about 20 days. Most of the evaluated tests showed excellent performance for isoniazid and rifampicin, with sensitivity and specificity values > 90 percent. With most of the assays, sensitivity for ethambutol was low (62-87 percent) whereas for streptomycin, sensitivity values ranged from 84 to 100 percent; NRA-discrepancies were associated with cultures with a low proportion of EMB-resistant organisms while most discrepancies with quantitative tests (MMT and BMM) were seen with isolates whose minimal inhibitory concentrations fell close the cutoff. MGIT is reliable but still expensive. NRA is the most inexpensive and easiest method to perform without changing the organization of the routine PM laboratory performance. While MODS, MTT, and BMM, have the disadvantage from the point of view of biosafety, they offer the possibility of detecting partial resistant strains. This study shows a very good level of agreement of the four low-cost methods compared to the PM for rapid detection of isoniazid, rifampicin and streptomycin resistance (Kappa values > 0.8); more standardization is needed for ethambutol.

Diagnostico de la tuberculosis infantil en Provincias de la Argentina / Diagnosis of tuberculosis in children in provinces of Argentina

El diagnóstico de certeza de tuberculosis infantil es complicado debido a las formas clínicas de presentación de la enfermedad, generalmente paucibacilares. Este estudio colaborativo nacional se realizó con el objetivo de conocer las características de la tuberculosis infantil en el momento del diagnóstico, las pautas diagnósticas en las que los pediatras se basan, el aporte de la bacteriología y la calidad de las notificaciones. Se revisaron las historias clínicas y los registros de laboratorios de pacientes menores de 15 años enfermos de tuberculosis o con primoinfecciones inaparentes diagnosticados durante 1995 en servicios de salud del interior del país en los que los pediatras aceptaron participar. Se estudiaron 400 casos (17 por ciento de las notificaciones al Programa Nacional en este grupo etáreo) y 81 primoinfecciones. Las proporciones de niños enfermos investigados mediante radiologia de tórax, sintomatología, prueba tuberculínica, estudio de contractos y bacteriología fueron del 95.3 por ciento, 79.6 por ciento, 90.1 por ciento, 92.7 por ciento y 35 por ciento respectivamente para los casos pulmonares y del 87.7 por ciento, 100 por ciento, 87.7 por ciento, 85.9 por ciento y 78.9 por ciento, respectivamente para los extrapulmonares. De los casos pulmonares investigados el 99.1 por ciento presentaban radiología anormal, 79.0 por ciento prueba tuberculínica ü 10 mm, 79.8 por ciento fueron sintomáticos y en 80.2 por ciento fue identificado un contacto. Todos los niños con lesiones extrapulmonares fueron sintomáticos; 63 por ciento presentaban concomitantemente anomalias pulmonares. Se confirmó bacteriológicamente el diagnóstico del 10.7 por ciento de los casos (20.8 por ciento de los pulmonares y 40.0 por ciento de los extrapulmonares investigados). El estudio indicaría que el diagnóstico se realiza en etapas relativamente tempranas de la enfermedad. En general se siguen las normas de la Sociedad Argentina de Pediatría. La confirmación bacteriológica resultó baja, lo que podría ser atribuido a la escasa investigación bacteriológica y al bajo rendimiento del cultivo de muestras pulmonares. El estudio evidenció subregistro de casos e imprecisión en la información al Programa Naiconal.

Etiologia de las infecciones agudas del tracto respiratorio inferior en niños menores de cinco años en Santa Fe / Etiology of acute lower respiratory tract infections among children less than 5 years old in Santa Fe

Para conocer los agentes etiológicos de las infecciones respiratorias agudas (IRA) del tracto inferior y la portación de bacterias en aspirados nasofaríngeos (ANF), en niños menores de 5 años, se realizó un estudio en la ciudad de Santa Fe durante 1993, 1994 y 1995. Se incluyeron 450 enfermos y 68 controles sin IRA y se tomaron muestras de sangre, líquido pleural y ANF para cultivo bacteriano. En los ANF se realizaron técnicas de inmunofluorescencia para virus, y se empleó suero para detección de IgM anti Chlamydia trachomatis. El 6,2 por ciento (14/224) de los hemocultivos resultaron positivos. Se aislaron 11 cepas de Streptococcus pneumoniae (cinco resistentes a oxacilina), dos de Haemophilus influenzae y una de Staphylococcus aureus. El virus sincicial respiratorio fue el agente etiológico del 23,3 por ciento (105/450) de las IRA. El 24 por ciento de los niños con factores de riesgo para Chlamydia trachomatis tuvieron altos títulos de IgM específica. Las dos bacterias más aisladas de ANF de niños con IRA fueron H. influenzae (31,6 por ciento) y S. pneumoniae (23,4 por ciento) y, de los controles, estreptococos grupo viridans (26,5 por ciento), H. influenzae (23,5 por ciento) y Moraxella catarrhalis (22,1 por ciento). Los tipos de S. pneumoniae que prevalecieron fueron 14 y 7. El tipo de H. influenzae predominante fue b biotipo I. Durante el período del estudio, la sensibilidad de los neumococos a oxacilina disminuyó desde 60 por ciento hasta 50,8 por ciento y la de H. influenzae a ampicilina bajó desde 92,3 por ciento hasta 79 por ciento. Todas las cepas de H. influenzae tipo b fueron sensibles a ampicilina.