Functional and genomic characterization of three novel cell lines derived from a metastatic gallbladder cancer tumor

BACKGROUND: Gallbladder cancer (GBC) is the most common tumor of the biliary tract. The incidence of GBC shows a large geographic variability, being particularly frequent in Native American populations. In Chile, GBC represents the second cause of cancer-related death among women. We describe here the establishment of three novel cell lines derived from the ascitic fluid of a Chilean GBC patient, who presented 46% European, 36% Mapuche, 12% Aymara and 6% African ancestry. RESULTS: After immunocytochemical staining of the primary cell culture, we isolated and comprehensively characterized three independent clones (PUC-GBC1, PUC-GBC2 and PUC-GBC3) by short tandem repeat DNA profiling and RNA sequencing as well as karyotype, doubling time, chemosensitivity, in vitro migration capability and in vivo tumorigenicity assay. Primary culture cells showed high expression of CK7, CK19, CA 19-9, MUC1 and MUC16, and negative expression of mesothelial markers. The three isolated clones displayed an epithelial phenotype and an abnormal structure and number of chromosomes. RNA sequencing confirmed the increased expression of cytokeratin and mucin genes, and also of TP53 and ERBB2 with some differences among the three cells lines, and revealed a novel exonic mutation in NF1. The PUC-GBC3 clone was the most aggressive according to histopathological features and the tumorigenic capacity in NSG mice. CONCLUSIONS: The first cell lines established from a Chilean GBC patient represent a new model for studying GBC in patients of Native American descent.

Susceptibilidad de candida spp, aislados de sangre, a fluconazol, voriconazol, anfotericina B, y caspofungina, por los métodos de microdilución en caldo (EUCAST) y el método de difusión en agar (ETEST) / Susceptibility of candida spp; blood isolates to fluconazole, voriconazole, amphotericin B, and caspofungin by broth microdilution methods (EUCAST) and the agar diffusion method (ETEST)

La Candidiasis invasora es una de las principales infecciones Nosocomiales. El desarrollo de los triazoles, inició el uso masivo de la profilaxis antifúngica y de la terapia empírica. Estas prácticas terapéuticas han generado cambios epidemiológicos, entre los que destacan la aparición de cepas que han desarrollado resistencia secundaria a los antifúngicos y la sustitución de algunas especies sensibles por otras con resistencia intrínseca. En este estudio se evaluaron 189 aisladas de sangre de la Red de Candidemia del INHRR determinando la Concentración Mínima Inhibitoria (CMI) a fluconazol, voriconazol, caspofungina y anfotericina b por los métodos Microdilución en caldo EUCAST y Etest, de cada una de las levaduras, siguiendo los procedimientos del método documento E. Dis. 7.1 del EUCAST y del fabricante. Se utilizaron las cepas C. parapsilosis ATCC 22019 y C. krusei ATCC 6258 como control de calidad. Los aislados fueron 89% sensibles para fluconazol por EUCAST y 87% por Etest, para voriconazol por ambos métodos 97% sensibles y para caspofungina y anfotericina B tasas muy bajas de resistencia se obtuvier. Se obtuvo una Concordancia del 94,8% y una Especificidad de 82,4%. Voriconazol 88,4% de Concordancia con unos límites de confianza de 82,9 a 92,5% y una Especificidad del 100%. Caspofungina se obtuvo un Concordancia de 98,4%y Sensibilidad del 100%. Se obtuvo una excelente concordancia entre los métodos evaluados, de manera que pueden ser utilizados indistintamente en la detección de susceptibilidad y/o resistencia antifúngica. Se determinaron puntos de corte epidemiológicos locales para fluconazol, voriconazol, caspofungina y anfotericina B en las especies de Candida frecuentemente aisladas mucho más sensible para detectar la posible emergencia de cepas resistente en nuestro medio.

Invasive candidiasis is a major nosocomial infections. With the development of the triazoles, began the widespread use of antifungal prophylaxis and empiric therapy, which has generated epidemiological changes. In this study, we evaluated 189 blood isolates from Network Candidemia INHRR of determining the minimum inhibitory concentration (MIC) to fluconazole, voriconazole, amphotericin B and caspofungin by EUCAST broth microdilution methods and ETEST. Strains were used C. parapsilosis ATCC 22019 and C. krusei ATCC 6258 as quality control. The group was 16.4% C. albicans and 83.6% C no albicans. C. parapsilosis (48%) the most frequently isolated species. The susceptibility of the total was isolated by EUCAST and Etest of 89/87% 97/97%, m99.5/98% 98/99% to fluconazole, voriconazole, amphotericin B and caspofungin respectively. General resistance to fluconazole was 9% and 11% EUCAST Etest for voriconazole amphotericin B, and caspofungin resistance did not exceed 4% of the total. Were determined epidemiological cutoff value (ECV) local to fluconazole, voriconazole, caspofungin and amphotericin B for C. albicans, C. parapsilosis and C. tropicalis which accounted for 89% of the total. The ECV is more sensitive to detect the possible emergence of resistant strains in our setting. The agreement obtained for the 4 antifungal was between 97.4 and 100% with a sensitivity of 95.9 to 100%. The data obtained are recommended ETEST for their sensitivity and consistency with respect to the reference method proving to be even more effective in detecting resistance. With the support of our local data allow the clinician to establish early and adequate therapy to finally benefit the patient.

Patología tiroidea operada: 12 años de experiencia en el Hospital Cayetano Heredia / Thyroid pathology operated: 12 years of experience at the Hospital Cayetano Heredia

Se presenta las características clínicas, técnica operatoria, estudio histopatológico y evolución de 173 pacientes con patología tiroidea operada en el Hospital Nacional Cayetano Heredia entre 1976 y 1987. 52.6 por ciento presentaron bocio nodular, 63.5 por ciento presentaron nódulos fríos y 21.1 por ciento nódulos calientes. Las técnicas operatorias empleadas fueron: lobectomía total más istmectomía (65.8 por ciento), tiroidectomía subtotal bilateral (19 por ciento), lobectomía total más istmectomía más lobectomía parcial contralateral (8 por ciento) y tiroidectomía total (4 por ciento). La biopsia por congelación se realizó en 95 por ciento de los pacientes. Bocio coloide fue el resultaado histopatológico más frecuente (67.6 por ciento). La patología benigna se encontró en 84.6 por ciento y la maligna en 15.4 por ciento. Las complicaciones fueron: lesión unilateral del nervio recurrente (4 por ciento), hematomas sofocantes (2.3 por ciento) e hipoparatiroidismo transitorio (1.7 por ciento). La mortalidad fué de 0.5 por ciento

Lavado peritoneal: experiencia en traumatismos no penetrantes de abdomén, 1981-1987 / Peritoneal lavage: experience in nonpenetrating injuries of the abdomen, 1981-1987

Para determinar la efectividad del lavado peritoneal diagnóstico en pacientes con traumatismo no penetrante de abdomen, efectuamos un estudio prospectivo en 100 pacientes consecutivos con sospecha de lesión y sintomatología equivoca los primeros y los otros con alteración del estado de conciencia. Utilizamos la medida del hematocrito para interpretar el líquido del lavado. hematocrito de 2% o más es positivo y negativo hasta 1%. Usando este método todos los pacientes con lavado positivo fueron laparotomizados y con lavado negativo se observaran. La confiabilidad alcanzó el 96%. Consideramos que es la más importante medida de diagnóstico en uso. Falso positivo o negativo fue de 4%. No se ha observado ninguna complicación importante

Traumatismos diafragmáticos / Diaphragmatic traumatisms

Se presentan 30 casos de lesiones diafragmáticas en un total de 371 pacientes operados con traumatismo abdominales y/o torácicos en los últimos años. Se consideran las dificultades diagnósticas preperatorias y la táctica quirúrgica utilizada en los distitos casos. Las lesiones diafragmáticas fueron tratadas con suturas en un sólo plano, con material irreabsorbible, no siendo necesario el empleo de material protésico. La mortalidad fue de 1 caso (3%) y se relaciona con el elevado índice de lesiones asociadas torácicas y abdominales