Detection of equine herpesvirus 1 and 4 and its association with latency-associated transcripts in naturally infected horses in Colombia / Detección de los herpesvirus equinos 1 y 4 y su relación con transcriptos asociados a la latencia en caballos infectados naturalmente en Colombia

ABSTRACT Objective. Determine the presence of antibodies and viral genomes of EHV-1 and EHV-4, as well as to detect the presence of latency associated transcripts (LATs) in a selected population of Colombian horses. Materials and methods. Serum samples, submandibular lymph nodes and trigeminal ganglion were obtained from 50 horses and analyzed. Sera were evaluated for the presence of antibodies against EHV-1 and EHV-4 while tissues were initially evaluated for the presence of viral genome by nPCR. Finally, samples were used for the detection of LATs through RT-PCR. Results. In general, 6/50 samples showed antibodies to EHV-1 and 44/50 were positive for EHV-4. As for viral genome detection, 10/50 samples were positive for EHV-1 and 30/50 were positive for EHV-4; in addition, 22/35 horses positive for EHV DNA were positive for LATs. The use of these tests led to eight possible combinations of results. Conclusions. The evidence used shows that horses can have simple viral infection, co-infections with both viruses, latency due to the presence of LATs and the simultaneous presence of LATs and viral genome replication at a given time. It contributes to the understanding of the behavior of the disease in Colombia and calls attention to the importance of implementing complementary diagnoses to the serology for the control of these viruses.

RESUMEN Objetivo. Determinar presencia de anticuerpos y genoma viral de EHV-1 y EHV-4, como también detectar la presencia de transcriptos asociados a latencia (LATs) en una población seleccionada de caballos colombianos. Materiales y métodos. Muestras de suero, nódulos linfáticos submandibulares y ganglio trigémino se obtuvieron de 50 caballos y fueron analizadas. Los sueros se evaluaron para la presencia de anticuerpos contra EHV-1 y EHV-4 mientras que los tejidos se evaluaron inicialmente para la presencia de genoma viral por nPCR. Finalmente, las muestras se emplearon para la detección de LATs a través de RT-PCR. Resultados. En general, 6/50 muestras mostraron anticuerpos para EHV-1 y 44/50 fueron positivos para EHV-4. En cuanto a la detección del genoma viral, 10/50 muestras fueron positivas para EHV-1 y 30/50 fueron positivas para EHV-4; además, 22/35 caballos positivos para DNA de EHV fueron positivos para LATs. El empleo de estas pruebas llevó a ocho posibles combinaciones de resultados. Conclusiones. Se confirma la presencia de estos virus en la población equina colombiana. Las pruebas empleadas demuestran que los caballos pueden tener infección viral simple, co-infecciones con ambos virus, estado de latencia debido a la presencia de los LATs y presencia simultánea de LATs y de replicación de genoma viral en un momento dado. Se aporta al entendimiento del comportamiento de la enfermedad en Colombia y se llama la atención sobre la importancia de implementar diagnósticos complementarios a la serología para el control de estos virus.

Serological evaluation of bovine herpesvirus 1 and 5 in cattle-breeding systems on Colombia's high plains / Evaluación serológica de Herpesvirus bovino 1 y 5 en Sistemas de cría en la Altillanura Colombiana

ABSTRACT Objective . The aim of this study was to determine the presence of Bovine herpesvirus - 1 (BoHV-1) and Bovine herpesvirus 5 (BoHV-5) neutralizing antibodies in herds on the Colombian high plains and their correlation with the level of cross-protection against both herpesviruses. Materials and methods . This study was carried out on cattle farms located around the towns of Puerto López and Puerto Gaitán in Colombia's Meta department. Sampling was made by convenience. Twenty-three farms were involved in the study; 488 sera samples were taken by random sampling. Virus neutralization test were performed according to the protocols of the OIE. Each serum was evaluated independently for each virus, BoHV-1 and BoHV-5. Results. The serological test confirmed the presence of BoHV-1 and BoHV-5 infections in the Colombian bovine population in 100% and 73.9% respectively. However, cross-reaction for both viruses was not evident in all farms evaluated. Conclusions . Alpha-herpesviruses are amongst the most significant infectious agents affecting cattle. Bovine herpesvirus 1 (BoHV-1) is found throughout the whole world and is endemic in Colombian bovine population, whereas bovine herpesvirus 5 (BoHV-5) has limited geographical distribution, mainly being reported in South-America (Brazil and Argentina), and we also confirmed the presence of BoHV-5 in Colombia.

RESUMEN Objetivo. El objetivo de este estudio fue determinar la presencia de anticuerpos para herpesvirus bovino 1 (BoHV-1) y herpesvirus bovino 5 (BoHV-5), así como también determinar el nivel de protección cruzada contra los dos herpesvirus en hatos de la altillanura colombiana. Materiales y métodos . Este estudio se realizó en fincas ubicadas en los municipios de Puerto López y Puerto Gaitán departamento del Meta. Se realizó un muestreo por conveniencia. Se emplearon 23 fincas, donde se realizó un muestreo al azar en cada una para un total de 488 muestras. Las muestras de suero fueron analizadas mediante sero-neutralización viral empleando los protocolos de la OIE. Cada uno de los sueros fue evaluado de manera independiente para cada uno de los virus BoHV-1 y BoHV-5. Resultados. Mediante la sero-neutralización viral se confirmó la presencia de BoHV-1 y BoHV-5 en la población bovina colombiana en 100% y 73.9%, respectivamente. Sin embargo, la reactividad cruzada no fue evidente en todas las fincas evaluadas. Conclusiones. Los alfa-herpesvirus bovinos se encuentran entre los agentes infecciosos más importantes del ganado bovino. Particularmente, el herpesvirus bovino 1 (BoHV-1) presenta una distribución mundial, siendo endémico en la población bovina colombiana, mientras que el herpesvirus bovino 5 (BoHV-5), presenta una distribución geográfica limitada; reportándose principalmente en Suramérica (Brasil y Argentina), comprobándose la presencia de este en los hatos colombianos.

Cultivos celulares como alternativa para el aislamiento y la producción de biológicos contra el Virus de Influenza / Cell culture as an alternative for isolation and production of biologics against influenza virus

El virus de influenza ha sido reconocido como un importante patógeno en poblaciones humanas y animales, ya que es el principal causante de enfermedades respiratorias. Muchas vacunas y aislamientos de virus de influenza humana y animal son realizadas actualmente en huevos embrionados, siendo este el método usado tradicionalmente por décadas. Sin embargo, se han encontrado inconvenientes en la elaboración de vacunas ya que el proceso de fabricación es de capacidad limitada (se requiere aproximadamente un huevo para generar una dosis vacunal) y alta demanda tiempo, disminuyendo su habilidad para generar biológicos rápidamente en el caso de una pandemia. El empleo de líneas celulares continuas para la producción de vacunas virales nace como alternativa que ofrece diversas ventajas: (i) oportunidad de emplear células completamente caracterizadas y estandarizadas, (ii) producción y planeación permanente de vacunas y (iii) los biológicos pueden ser producidos de forma más rápida. El objetivo de esta revisión es analizar las diferentes alternativas empleadas en el cultivo y/o aislamiento de virus de influenza, enfatizando en el uso de cultivos celulares como sustrato para el aislamiento y la producciónc de biológicos destinados a la salud humana y animal.