Co-infection by Tritrichomonas foetus and Pentatrichomonas hominis in asymptomatic cats / Co-infecção por Tritrichomonas foetus e Pentatrichomonas hominis em gatos assintomáticos

Tritrichomonas foetus, a parasite well known for its significance as a venereally transmitted pathogen in cattle, has been identified as a cause of chronic large bowel diarrhea in domestic cats in many countries of the world. In Brazil, several studies on the diagnosis of bovine trichomoniasis have been performed, but until now, no study was made regarding feline trichomoniasis. Thus, this is the first study to report the occurrence of T. foetus and Pentatrichomonas hominis in cats using morphological and molecular analysis. Feces from 77 cats were examined, four of which (5.2%) were positive for the presence of parabasalids. Morphological analysis of stained smears revealed piriform trophozoites showing the three anterior flagella, elongated nucleus and axostyle ending abruptly in fillet, characteristic of T. foetus. In scanning and transmission electron microscopy, identification characters similar to those previously reported for T. foetus were observed. The cultures containing trophozoites were submitted for molecular analysis, which resulted positive for T. foetus DNA using specific primers (TFR3 and TFR4), and all samples were positive and subjected to sequencing in which they showed 99.7-100% similarity with another isolate sequencing of T. foetus (JX960422). Although no trophozoite with consistent morphology of P. hominis has been visualized in the samples, differential diagnosis was performed using specific primers for P. hominis (TH3 and TH5) amplicon. In three of the four samples (3.89%) sequencing revealed 100% similarity when compared with another sequence of P. hominis deposited in Genbank (KC623939). Therefore, the present study revealed through the diagnostic techniques employed the simultaneous infection by T. foetus and P. hominis in the feces of cats. However, it was necessary to use more than one technique for the diagnosis of the co-infection...

Tritrichomonas foetus, um parasito bem conhecido por seu significado como um agente patogênico transmitido venereamente em bovinos, também foi identificado como causa de diarreia crónica do intestino grosso em gatos domésticos em muitos países. No Brasil, vários estudos sobre o diagnóstico de tricomonose bovina foram realizados, mas até agora, não há informação disponível em relação à trichomonose felina. Assim, este é o primeiro estudo a relatar a ocorrência de T. foetus e Pentatrichomonas hominis em gatos por meio de análise morfológica e molecular. Fezes de 77 gatos foram examinadas, a partir da qual quatro (5,2%) foram positivas para a presença de parabasalídeos. A análise morfológica de esfregaços corados revelou trophozoitos piriformes com três flagelos anteriores, núcleo alongado e axóstilo cuja projeção termina abruptamente em formato de filete, características estas de identificação morfológica T. foetus. Além disso, microscopia eletrônica de varredura e transmissão, revelaram caracteres morfológicos semelhantes aos descritos na literatura para esta espécie. A análise molecular de culturas utilizando iniciadores específicos para trofozoítos de T. foetus (TFR3 e TFR4), mostrou que as quatro amostras foram positivas para este parasito e osequenciamento dos fragmentos amplificados demonstraram 99,7-100% de similaridade com seqüências depositadas no GeneBank de T. foetus. Nenhum trofozoíto com morfologia consistente com a descrição de P. hominis foi visualizado nas amostras. No entanto, a análise molecular, utilizando iniciadores específicos para esta espécie (TH3 e TH5) detectou que três das quatro amostras (75%) também foram positivas para P. hominis e o sequenciamento de nucleotideos revelou 100% de similaridade dos amplicons quando comparada com o mesmo fragmento de DNA de P. hominis depositado no GenBank. Como tal, o presente estudo relata a coinfecção de gatos com T. foetus e P. hominis e destacou a exigência de uma combinação de métodos...

Investigação de Campylobacter fetus e Tritrichomonas foetus na mucosa prepucial de touros da região do Médio Paraíba, RJ / Campylobacter fetus and Tritrichomonas foetus investigation in prepucial mucous of bulls from Médio Paraíba/RJ region, Brazil

Trinta e nove touros provenientes de propriedades de pecuária leiteira (n=9) e de pecuária de corte (n=30), situadas na região do Médio Paraíba, Rio de Janeiro (RJ), foram investigados para a presença de Campylobacter fetus e Tritrichomonas foetus. Para a pesquisa de Campylobacter, amostras de esmegma foram coletadas e submetidas à técnica de cultivo e isolamento e amostras de lavado prepucial ao teste de Imunofluorescência Direta (IFD). Para a pesquisa de Tritrichomonas, foi utilizada a técnica de exame direto a partir de lavado prepucial. Foi observada a presença de C. fetus em 14 amostras (35,9%), por meio da IFD, e o isolamento de C. fetus, subespécie venerealis, foi obtido a partir de quatro amostras (10,3%). T. foetus não foi identificado nas amostras investigadas. A alta freqüência de C. fetus observada nos animais investigados sugere a presença da campilobacteriose na região do Médio Paraíba, em rebanhos com problemas reprodutivos.

Thirty nine breeding bulls from dairy farms (n=9) and beef farms (n=30) located in Médio Paraíba region at Rio de Janeiro - Brazil state were investigated for the presence of Campylobacter fetus and Tritrichomonas foetus. For Campylobacter investigation, smegma samples were examined by culture and prepucial washings were examined by direct immunofluorescence technique (DIF). The prepucial washings were also examined for Tritrichomonas foetus presence by direct examination. C. fetus was identified in 14 samples (35.9%) by DIF technique and C. fetus subspecies venerealis was isolated from four samples (10.3%). T. foetus was not detected in bull samples. The high frequency of C. fetus observed in bull samples suggests the occurrence of Campylobacteriosis among herds which have reproductive problems at the Médio Paraíba region.

Levantamento de Brucella abortus em queijos Minas Frescal comercializados no Estado do Rio de Janeiro / Isolation of Brucella abortus in Minas Frescal commercialized in the Rio de Janeiro State

No período de abril/1998 a fevereiro/1999, foram submetidas ao exame bacteriológico, para isolamento de Brucella abortus, 46 amostras de queijo tipo Minas Frescal, de 23 marcas diferentes com e sem Serviço de Inspeção Federal (SIF), comercializadas no Estado do Rio de Janeiro. Após homogeneização de 25 g de cada amostra em liqüidificador, com 225 mL de água peptonada a 0,1 por cento, centrifugou-se cada homogeneizado a 2.500 rpm (15 G) por 10 minutos e descartou-se o sobrenadante. Adicionou-se 100 mL do mesmo diluente e centrifugou-se novamente a 1200 rpm (10 G) por 20 minutos. Após descartar o sobrenadante e ressuspender o sedimento em 8 mL de Salina Fosfatada Tamponada (PBS), repicaram-se alíquotas de 0,1 mL em três meios distintos para aumentar a chance de isolamento de Brucella: Ágar Brucella com adição de antibióticos, Ágar Nutriente e Ágar triptose (Método Castanheda). Incubaram-se os meios inoculados a 37ºC, em atmosfera com redução de oxigênio, por 72 a 96 horas. As bactérias suspeitas foram submetidas aos testes bioquímicos tradicionais. De acordo com os resultados não foi detectada Brucella nos queijos sob estudo.

Campilobacteriose genital bovina: ocorrência nos estados do Rio de Janeiro e Minas Gerais / Genital bovine campilobacteriosis: occurrence in Rio de Janeiro and Minas Gerais states

Para verificar a ocorrência de campilobacteriose genital bovina, em rebanhos de bovinos leiteiros do Rio de Janeiro e Minas Gerais, realizou-se a prova de muco-aglutinaçäo lenta para as fêmeas, e o isolamento bacteriológico para os machos. Dos 248 animais examinados durante o período de 1996 a dezembro de 1997, constataram-se 71 animais positivos (28,63 por cento), 33 suspeitos (13,31 por cento) e 144 negativos (58,06 por cento), provenientes de 21 propriedades visitadas nos estados do Rio de Janeiro e Minas Gerais, sendo diagnosticada a campilobacteriose em 20 propriedades (95,2 por cento). A campilobacteriose provavelmente contribuiu para a baixa eficiência reprodutiva verificada nos rebanhos examinados.

Um novo meio de transporte e cultivo para Tritrichomonas foetus (Riedmuller, 1928) V. Lactopep como meio de cultivo / A new transfer and culture medium of Tritrichomonas foetus (Riedmuller, 1928) V. Lactopep as a culture medium

Para o diagnóstico da tricomonose bovina, o meio Lactopep foi testado para o transporte de amostras de lavado prepucial e de muco vaginal de bovinos infectados com Tritrichomonas foetus. A metodologia de colheita do material foi descrita por Lopes et al. (1994), utilizando o meio Guida-Kupferberg como testemunho. Os meios foram mantidos em temperatura ambiente e analisados após 24 horas. Pela análise de variação com delineamento inteiramente casualizado, avaliou-se o dia de máxima eficiência. Com Lactopep obteve-se a média de 9,8 dias e com Guida-Kupferberg, 9,2 dias, com material proveniente de machos naturalmente infectados; as médias das culturas para material proveniente de fêmeas foi 7,1 dias para o Lactope, e de 7,5 para o Guida-Kupferberg. A estatística demonstrou que os meios são eficientes para o transporte e cultivo de T. foetus, mas o meio Lactopep é de mais fácil preparo e de baixo custo. Na segunda etapa do experimento, adicionou-se ao Lactopep a fração de 10% de soro fetal bovino para manutenção de T. foetus por repiques sucessivos em laboratório, comparando-se ao de Hanks. Os dois meios permitem curva de crescimento em torno de sete dias, quando a fase de esgotamento chega aos valores mais baixos mas ainda viáveis. O Lactopep modificado para laboratório também mantém acentuada correlação negativa com o tempo de cultivo e pode ser indicado para a manutenção de T. foetus.

Lactopep medium efficacy for transport of Tritrichomonas foetus was checked in sample obtained from preputials washing of bulls and vaginal mucus of cows knowghy T. foetus positive, and compared to Guida-Kupferberg medium. Samples were obtained from bulls or cows with 0,85% saline solution and, half part of sample received three grams Lactopep; to the other half part, three grams of Guida-Kupferberg medi um were added. Both groups were kept at environmental temperature and daily examined under microscopy. The results were statistically analised by a variance analisis for casualised entirely delineation surveying the efficient maximum day. The Lactopep medium and Guida-Kupferber medium mean proceeded 9.8 day and 9.2 day respectively, with material from bulls, and 7.1 day and 7.5 day, respectively, with material from cows, and the conclusion is that both media are efficient for T. foetus maintenance but Lactopep medium has the advantage of the easy preparation and is produced at lower cost. In second stage to experiment to added in Lactopep medi um the fraction of 10% bovine se rum for maintainance to T. foetus by sucessive tollings in laboratory; the medium was compared with the Hanks medium. The results showed the both media allowed a line arround the seven days at the declive but further practicable. The Lactopep medium modificated for laboratory also conserve accentuated invertion correlation with the time cultivation, but it is indicat for maintaince of T. foetus in laboratory.