Recombinant expression and purification of the bovine acidic Seminal Fluid Protein

The acidic Seminal Fluid Protein (aSFP), a 12.9 kDa protein is a maker for bovine semen freezability possibly due to its antioxidant activity and effect on sperm mitochondrial function. However, its precise function on sperm preservation during freezing thaw is poorly understood. The use of recombinant DNA technology allows new approaches on the study of function and structure of proteins, and its production in procaryote systems offers several advantages. The present work describes the recombinant expression of the bovine aSFP and its binding properties. A cDNA library from the bovine seminal vesicle was used as template for amplification of the aSFP coding region. The amplicon was cloned into a pET23a (+) vector and transformed into E.coli BL21 pLysS strain. The recombinant expression was obtained in E coli. One step ion immobilized affinity chromatography was performed, resulting in high yield of purified protein. To determine the bioactivity of the r aSFP, the protein was incubated in different concentrations with 10 7 spermtozoa at 37°C for 5 h. Western blotting and fluorescence microscopy analyses showed the ability of the recombinant aSFP to attach to the spermatozoa. Based on our results, the described method can be used to obtain mg levels of recombinant aSFP.

Incidência de mortalidade embrionária em ovelhas submetidas à inseminaçäo artificial / Embryonic mortality in sheep inseminated artificially

A pesquisa incidiu sobre 170 ovelhas adultas da raça Corriedale, criadas em regime extensivo, sob moderadas condiçöes de nutriçäo, com peso médio de 35-40 kg, divididas em cinco grupos, sendo dois com estro induzido hormonalmente. O trabalho foi efetuado durante as estaçöes reprodutivas de 1986 e 1988, e os animais foram inseminados com sêmen fresco e congelado, pelas vias cervical e intra-uterina, esta mediante laparoscopia. A mortalidade embrionária foi medida indiretamente, pela relaçäo entre o número de fetos e o número de corpos lúteos encontrados nas ovelhas abatidas e que näo retornaram ao estro no prazo de 20 dias. A incidência da mortalidade embrionária mostrou-se equivalente quando se empregou o sêmen congelado pelas vias cervical e intra-uterina. O mesmo ocorreu com o uso do sêmen fresco e congelado pela via cervical, quando se utilizou o estro espontâneo. A mortalidade embrionária foi significativamente maior quando se aplicou sêmen congelado, tanto pela via cervical como intra-uterina, no estro induzido. O tratamento hormonal apesar de lograr aumento da taxa ovulatória näo influiu favoravelmente na prolificidade das ovelhas tratadas näo sendo por isso indicado para rebanhos que näo estejam em condiçöes nutritivas favoráveis

Biometria testicular em ovinos de raças de corte. I. Reprodutores racionados / Scrotal circumference in meat sheep. I. Concentrate suplemented rams

Foram obtidos dados de perímetro escrotal e peso corporal de 666 carneiros apresentados em exposiçöes feiras realizadas nos anos de 1985, 1986 e 1987, das raças Suffolk, Hampshire Down, Ile de France e Texel, com diferentes idades. Os resultados mostraram diferença no perímetro escrotal quanto à idade apenas na raça Hampshire Down. Para todas as raças observou-se correlaçäo significativa entre peso corporal e perímetro escrotal. Os baixos coeficientes de determinaçäo no entanto, näo recomendam o peso corporal como único estimador do perímetro escrotal