ABSTRACT
The production of alkaloids from Cereus peruvianus callus cultured in medium supplemented with different tyrosine concentrations, different 2,4-D/kinetin levels, and with NaCl was investigated using long-term callus culture. - and -Esterase isozyme patterns were also analyzed to investigate the differential gene expression in callus subcultured with the different tyrosine concentrations. The greatest amounts of alkaloids were obtained from callus maintained in medium containing 200 mg/L of tyrosine. Tyrosine induced a differential gene expression for the synthesis of specific - and -esterase isozymes. Two -carboxylesterases (EC 3.1.1.1) and one /-arylesterase (EC 3.1.1.2) were induced in callus, one /-acetylesterase (EC 3.1.1.6) and two -carboxylesterase were detected as more intensely stained while two /-carboxylesterases were absent or detected as more weakly stained bands after the addition of tyrosine as precursor
Tecidos de calos em cultura prolongada de Cereus peruvianus foram utilizados para investigar a produção de alcalóides pelos calos quando mantidos em meio de cultura suplementados com diferentes concentrações de tirosina, com diferentes níveis de 2,4-D/cinetina, e contendo NaCl. Foi analisado também, o padrão de isozimas - e -esterases, para investigar a expressão diferencial de genes nos calos subcultivados com as diferentes concentrações de tirosina. A maior quantidade de alcalóides foi obtida a partir de calos mantidos em meio contendo 200 mg/L de tirosina. A adição de tirosina no meio induziu uma expressão gênica diferencial para a síntese de isozimas - e -esterases. Duas -carboxilesterases (EC 3.1.1.1) e uma /-arilesterase (EC 3.1.1.2) foram induzidas nos calos, uma /-acetilesterase (EC 3.1.1.6) e uma -carboxilesterase foram detectadas como bandas mais intensamente coradas, enquanto duas /-carboxilesterases não foram detectadas ou foram fracamente coradas após a adição de tirosina como precursor no meio de cultura