Multidrug-resistant Salmonella spp. in fecal samples of pigs with suspected salmonellosis in Antioquia, Colombia, 2019-2021 / Salmonella spp. multirresistentes en muestras fecales de cerdos con presunta salmonelosis en Antioquia, Colombia, 2019-2021 / Salmonella spp. multirresistente em amostras fecais de suínos com suspeita de salmonelose em Antioquia, Colômbia, 2019-2021

ABSTRACT Objectives. To determine the proportion of Salmonella enterica in fecal samples of live pigs with suspected salmonellosis analyzed at the diagnostic unit of the University of Antioquia, Colombia between 2019 and 2021, and examine the serotypes and antimicrobial resistance patterns. Methods. This was a laboratory-based cross-sectional study of routine data on fecal samples received from pig farms in all nine subregions of Antioquia state, Colombia. Salmonella spp. detection at the university is done using enrichment, selective culture, and polymerase chain reaction. Serotypes were identified using the Kauffmann-White scheme and isolates were tested for antimicrobial susceptibility using broth microdilution. Results. Of 653 samples tested, 149 (23%) were positive for S. enterica. Nine serotypes were identified. The most common were Salmonella Typhimurium (56%) and its monophasic variant (35%). Resistance to ampicillin (70%) was most frequently observed, followed by ciprofloxacin (55%), and sulfamethoxazole-trimethoprim (52%). No isolates were resistant to amikacin and gentamicin. Multidrug resistance (resistance to ≥ 3 classes of antibiotics) was observed in 61 (44%) isolates. Multidrug resistance was highest in S. Typhimurium (57%) compared with the other serotypes. Serotype was associated with multidrug resistance (p = 0.01), but age of the pig and sub-region were not. Conclusions. The proportion of Salmonella spp. and the associated high levels of multidrug resistance are of concern and may indicate irrational use of antimicrobials and poor management practices in pig production systems in the region. Strengthened surveillance is needed to monitor and improve farm management practices and the use of antimicrobials in farms in Colombia.

RESUMEN Objetivos. Determinar la proporción de Salmonella enterica en muestras fecales de cerdos vivos con presunta salmonelosis analizadas en la unidad de diagnóstico de la Universidad de Antioquia (Colombia) entre el 2019 y el 2021, así como examinar los serotipos y los patrones de resistencia a los antimicrobianos. Métodos. Se trata de un estudio transversal de laboratorio sobre datos ordinarios de muestras fecales provenientes de granjas porcinas de las nueve subregiones del departamento de Antioquia (Colombia). La detección de Salmonella spp. en la universidad se realiza mediante el enriquecimiento, el cultivo selectivo y la reacción en cadena de la polimerasa. Se identificaron los serotipos con el esquema de Kauffmann-White y se examinaron las cepas aisladas para determinar la susceptibilidad antimicrobiana mediante microdilución en caldo. Resultados. De las 653 muestras analizadas, 149 (23%) dieron un resultado positivo para S. enterica. Se identificaron nueve serotipos. Los más comunes fueron Salmonella typhimurium (56%) y su variante monofásica (35%). La resistencia a la ampicilina fue la observada con mayor frecuencia (70%), seguida de la resistencia al ciprofloxacino (55%) y al sulfametoxazol-trimetoprima (52%). Ninguna cepa aislada fue resistente a la amikacina y la gentamicina. Se observó resistencia a múltiples fármacos (resistencia a tres o más clases de antibióticos) en 61 cepas (44%). La resistencia a múltiples fármacos fue más elevada en el caso de S. typhimurium (57%) en comparación con los otros serotipos. Se asoció el serotipo con la resistencia a múltiples fármacos (p = 0,01), a diferencia de la edad del cerdo y la subregión. Conclusiones. La proporción de Salmonella spp. y los elevados niveles asociados de resistencia a múltiples fármacos son preocupantes y pueden ser un indicativo de uso irracional de antimicrobianos y malas prácticas de gestión en los sistemas de producción porcina de la región. Es necesario reforzar la vigilancia para dar seguimiento y mejorar las prácticas de gestión agropecuaria y el uso de antimicrobianos en las granjas en Colombia.

RESUMO Objetivos. Determinar a proporção de Salmonella enterica em amostras de fezes de suínos vivos com suspeita de salmonelose analisadas na unidade de diagnóstico da Universidade de Antioquia, Colômbia, entre 2019 e 2021, e examinar seus sorotipos e padrões de resistência a antimicrobianos. Métodos. Estudo transversal, de base laboratorial, utilizando dados de rotina de amostras de fezes recebidas de suinocultores em todas as nove sub-regiões do estado de Antioquia, Colômbia. A detecção de Salmonella spp. na Universidade é feita por enriquecimento, cultura seletiva e reação em cadeia da polimerase. Os sorotipos foram identificados usando o esquema de Kauffmann-White, e os isolados foram testados quanto à suscetibilidade aos antimicrobianos pelo método de microdiluição em caldo. Resultados. Das 653 amostras testadas, 149 (23%) foram positivas para S. enterica. Foram identificados nove sorotipos. Os mais comuns foram Salmonella Typhimurium (56%) e sua variante monofásica (35%). A resistência à ampicilina (70%) foi observada com maior frequência, seguida pela resistência ao ciprofloxacino (55%) e ao sulfametoxazol/trimetoprima (52%). Nenhum isolado apresentou resistência à amicacina ou gentamicina. Multirresistência (resistência a ≥ 3 classes de antibióticos) foi observada em 61 isolados (44%). A multirresistência foi mais comum em S. Typhimurium (57%), em comparação aos outros sorotipos. Foi constatada associação da multirresistência com sorotipos (p = 0,01), mas não com idade do suíno ou sub-região. Conclusões. A proporção de Salmonella spp. e os níveis elevados associados de multirresistência a antimicrobianos aqui constatados são preocupantes, e podem indicar uso irracional de antimicrobianos e práticas inadequadas de manejo nos sistemas de suinocultura da região. É preciso fortalecer a vigilância para monitorar e melhorar as práticas de manejo agrícola e o uso de antimicrobianos em fazendas na Colômbia.

High antimicrobial resistance in Salmonella spp. and Escherichia coli isolates from swine fecal samples submitted to a veterinary diagnostic laboratory in Colombia

Background: Commensal microflora such as Escherichia coli and Enterococcus spp. are representative indicators of antimicrobial resistance (AMR) as they are part of the normal intestinal microflora and can acquire and disseminate AMR to pathogenic or zoonotic bacteria like Salmonella spp. Objective: To investigate the state of AMR among E. coli and Salmonella spp., potential pathogens in humans, isolated from cecal contents of pigs submitted to a veterinary diagnostic laboratory in Colombia from 2016 to 2019. Methods: Susceptibility testing was conducted using the Kirby-Bauer disk diffusion method according to the Clinical and Laboratory Standards Institute guidelines for antimicrobial zone diameter breakpoints. An E. coli strain (ATCC 25922) was used as the quality control organism. Isolates showing resistance to three or more antimicrobial classes were classified as multidrug-resistant (MDR) as defined by a joint group of the European Centre for Disease prevention and Control and the Center for Disease Control and Prevention of the USA. Results: A total of 112 E. coli and 192 Salmonella spp. colonies were isolated from 557 samples received between 2016 and 2019. In order of decreasing frequency, E. coli was resistant to tetracycline (100%), sulfamethoxazol-trimethoprim (97.5%), amoxicillin (86.4%), enrofloxacin (82.6%), tylosin (82.1%), doxycycline (59%), neomycin (50%), ciprofloxacin (45.5%), ceftiofur (35%), gentamicin (30%), tilmicosin (29%), and fosfomycin (12.5%). When compared with E. coli, Salmonella spp. was generally resistant to the same agents with slightly less resistance (between 10-30%) to eight of the antimicrobials tested. Salmonella spp. showed <20% resistance to three antimicrobials, as follows: neomycin (17%), gentamicin (16%), and fosfomycin (14%). Multi-resistance occurred in 68.7% (77/112) of E. coli and 70.3% (135/192) of Salmonella spp. isolates. Resistance of Salmonella spp. was alarming to all the critically important antimicrobials tested: fluoroquinolones (enrofloxacin, ciprofloxacin), ceftiofur (third- generation cephalosporin), and macrolides (tylosin). Conclusions: According to our results, there is a high level of multi- drug resistance (MDR) in E. coli and Salmonella spp. It is necessary to implement a nationwide antimicrobial resistance monitoring program in Colombia, together with proper antimicrobial prescribing guidelines for pigs. The indiscriminate use of antimicrobial growth promoters by the swine industry is generating widespread bacterial resistance and should be discontinued.

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Antecedentes: Flora comensal como espécies de Escherichia coli e Enterococcus são tipicamente escolhidas como indicadores representativos de la resistência antimicrobiana (AMR), pois fazem parte da flora intestinal normal e podem adquirir e disseminar AMR a bactérias patogênicas ou zoonóticas como Salmonella spp. Objetivo: Investigar o estado da AMR entre E. coli e Salmonella spp. isolados do conteúdo cecal de porcos colombianos submetidos ao Laboratório de Diagnóstico Veterinário de 2016 a 2019, ambos sendo patógenos potenciais em humanos. Métodos: O teste de suscetibilidade foi conduzido usando o método de difusão em disco Kirby-Bauer de acordo com as diretrizes do Instituto de Padrões Clínicos e Laboratoriais para pontos de quebra de diâmetro da zona antimicrobiana. A cepa de E. coli (ATCC 25922) foi usada como organismo de controle de qualidade. Os isolados que apresentam resistência a três ou mais classes de antimicrobianos foram classificados como multirresistentes (MDR), conforme definido por um grupo conjunto do Centro Europeu para Prevenção e Controle de Doenças e Centro para Controle e Prevenção de Doenças dos EUA. Resultados: Um total de 112 E. coli e 192 Salmonella spp. foram isolados de 557 amostras submetidas entre 2016 e 2019. Em ordem decrescente de frequência, a resistência a E. coli foi: tetraciclina (100%), sulfametoxazol-trimetoprim (97,5%), amoxicilina (86,4%), enrofloxacina (82,6%), tilosina (82,1%), doxiciclina (59%), neomicina (50%), ciprofloxacina (45,5%), ceftiofur (35%), gentamicina (30%), tilmicosina (29%) e fosfomicina (12,5%). Quando comparada com E. coli, Salmonella spp. foi geralmente resistente aos mesmos agentes com resistência ligeiramente menor (entre 10-30%) a oito dos antimicrobianos. Apenas três antimicrobianos apresentaram resistência a Salmonella spp. abaixo de 20% da seguinte forma: neomicina (17%), gentamicina (16%) e fosfomicina (14%). Multi-resistência ocorreu em 68,7% (77/112) de E. coli e 70,3% (135/192) de Salmonella spp. isolados. Resistência de Salmonella spp. foi alarmante para todos os antimicrobianos criticamente importantes testados: fluoroquinolonas (enrofloxacina, ciprofloxacina), ceftiofur (cefalosporina de terceira geração) e macrolídeos (tilosina). Conclusões: Esses resultados indicam um alto nível de resistência a múltiplos medicamentos (MDR) e que um Programa Nacional de Monitoramento da Resistência Antimicrobiana é necessário para a Colômbia, juntamente com a implementação de diretrizes de prescrição de antimicrobianos para suínos. O uso indiscriminado de antimicrobianos para promoção de crescimento na indústria suína está claramente promovendo resistência generalizada e deve ser interrompido.

Caracterización de la variabilidad genética de cepas de campo de Brucella canis aisladas en Antioquia / Characterization of the genetic variability of field strains of Brucella canis isolated in Antioquia

Brucella canis, un patógeno intracelular facultativo, es responsable de la brucelosis canina, una enfermedad zoonótica que afecta a los caninos y al hombre. En los primeros causa abortos y fallas reproductivas; en el ser humano genera síntomas inespecíficos. En el año 2005 se demostró la presencia de B. canis en Antioquia (Colombia). Las cepas halladas se identificaron como tipo 2. La secuenciación del genoma completo de una cepa de campo denominada Brucella canis str. Oliveri mostró indels específicos de especie; a partir de estos se buscó conocer características genómicas de las cepas de B. canis aisladas y establecer relaciones filogenéticas, así como el tiempo de divergencia de la cepa Oliveri. Se realizó PCR convencional y secuenciación de 30 cepas de campo, se identificaron 5 indels reconocidos en B. canis str. Oliveri, se empleó ADN de Brucella suis, Brucella melitensis y cepas vacunales de Brucella abortus como controles. Se determinó que las cepas de campo estudiadas comparten 4 de los 5 indels de la cepa Oliveri, lo que indica la presencia de más de una cepa de B. canis circulando en la región. El análisis filogenético se realizó con 24 cepas de Brucella mediante secuencias concatenadas de genes marcadores de especie. Se probó la hipótesis del reloj molecular y adicionalmente se realizó test de tasas relativas de Tajima. De esta manera se demostró que la cepa Oliveri, al igual que las otras cepas de B. canis analizadas, divergen de B. suis. Se rechazó la hipótesis del reloj molecular entre las especies de Brucella y se demostró una tasa de evolución y una distancia genética similar entre las cepas de B. canis.

Brucella canis is a facultative intracellular pathogen responsible for canine brucellosis, a zoonotic disease that affects canines, causing abortions and reproductive failure; and the production of non-specific symptoms in humans. In 2005 the presence of B. canis in Antioquia was demonstrated and the strains were identified as type 2. The sequencing of the genome of a field strain denoted Brucella canis str. Oliveri, showed species-specific indel events, which led us to investigate the genomic characteristics of the B. canis strain isolated and to establish the phylogenetic relationships and the divergence time of B. canis str. Oliveri. Conventional PCR sequencing was performed in 30 field strains identifying 5 indel events recognized in B. canis str. Oliveri. ADN from Brucella suis, Brucella melitensis and vaccine strains from Brucella abortus were used as control, and it was determined that all of the studied field strains shared 4 out of the 5 indels of the sequenced Oliveri strain, indicating the presence of more than one strain circulating in the region. Phylogenetic analysis was performed with 24 strains of Brucella using concatenated sequences of genetic markers for species differentiation. The molecular clock hypothesis and Tajima's relative rate test were tested, showing that the Oliveri strain, similarly to other canis species, diverged from B. suis. The molecular clock hypothesis between Brucella species was rejected and an evolution rate and a similar genetic distance between the B. canis were demonstrated.

AN OVERVIEW ON THE PHYLOGENETIC CLASSIFICATION OF Brucella / EVOLUCIÓN EN LA CLASIFICACIÓN FILOGENÉTICA DE Brucella

SUMMARY The genus Brucella is a globally distributed intracellular pathogen that affects animals and humans and presents low genetic variability, which is a challenge for its phylogenetic reconstruction. Genus differentiation originally occurred due to its preference for a certain host and analyses throughout the years to classify the genus Brucella and its strains, depended on the techniques used, the number of strains or the methods of phylogenetic reconstruction. Its history goes from recognizing the entire genus as unique B. mellitensis species with multiple varieties, to recognizing more than ten species. This review shows the journey through the techniques that have been used to differentiate the genus Brucella, which, although they have generated clarity in the grouping of some species, still leaves doubts in related to the oldest species, their divergence and the type of grouping of the new species discovered. The application of new technologies such as phylogenomics is contributing to solve these questions.

RESUMEN Las especies del género Brucella son patógenos de distribución mundial que afecta, tanto a los animales como al hombre, los cuales, presentan baja variabilidad genética, convirtiéndolo en un reto para su reconstrucción filogenética y diferenciación. La diferenciación originalmente se dio, debido a su preferencia por cierto hospedero. A través de los años, se han realizado diferentes análisis para clasificar el género Brucella y las variaciones que presenta, que dependen de las técnicas empleadas para su clasificación, las especies, el número de cepas o los métodos de reconstrucción filogenética. La historia pasa desde reconocer a todo el género como una única especie B. mellitensis con múltiples variedades, a reconocer más de diez especies. En esta revisión, se hace una travesía, a través de las diferentes técnicas que se han utilizado en el tiempo, para clasificar el género Brucella que, aunque han generado claridad en el agrupamiento de algunas especies, aun dejan dudas en relación a las especies más antiguas, su divergencia y el tipo de agrupación de las nuevas especies descubiertas. La aplicación de nuevas tecnologías, como la filogenómica, está contribuyendo a resolver estos interrogantes.

EFECTO DE LA COMBINACIÓN DE GLUCOSA OXIDASA/ GLUCOSA SOBRE EL CRECIMIENTO DE BACTERIAS DEL GÉNERO Salmonella AISLADAS DE AVES DE CORRAL / EFFECT OF THE GLUCOSE OXIDASE /GLUCOSE COMBINATION ON THE GROWTH OF THE GENUS Salmonella BACTERIA ISOLATED FROM POULTRY

RESUMEN En la industria avícola, las infecciones por Salmonella son un problema, debido a los efectos sobre la producción y los riesgos a la salud pública. En las aves infectadas puede ocurrir una diseminación sistémica de las bacterias, que afecta los órganos y favorece, tanto la transmisión entre las aves como la contaminación de los productos avícolas, tales como las carnes, durante el proceso de sacrificio de los animales. Se decidió evaluar el efecto que diferentes combinaciones de glucosa oxidasa (GOX) y glucosa tienen sobre el crecimiento de diversos serotipos de Salmonella aislados de aves en crecimiento y de engorde, y determinar su potencial como antibacteriano. Se tomaron muestras de corazón y de ciego de aves de 7 y 42 días de edad y se aislaron e identificaron S. typhimurium y S. enteritidis. Estas bacterias fueron cultivadas en medio Luria-Bertani (LB) en presencia de GOX (0,5; 1 y 2U/mL) y glucosa (0,5, 1 y 2%), en combinaciones bajo un diseño factorial 32. El crecimiento fue monitoreado por el cambio de absorbancia a 600 nm, durante 6 horas de incubación. Se observó una reducción significativa del crecimiento de ambos serotipos al utilizar 2U/mL de GOX y diferentes concentraciones de glucosa, lo cual, demostró la capacidad antibacteriana que posee el sistema GOX/glucosa sobre este género, por lo que se podría emplear como un aditivo para la conservación de carnes de aves y productos derivados, a fin de alargar su vida de anaquel y minimizar riesgos a la salud.

SUMMARY In the poultry industry, Salmonella infections are a problem due to the effects on production and risks to public health. In infected birds, a systemic spread of bacteria can occur, which affects the organs and favors both the transmission between birds and the contamination of poultry products, such as meat, during the animal´s slaughter process. It was evaluated the effect that different combinations of glucose oxidase (GOX) and glucose have on the growth of different Salmonella serotypes isolated from broilers, and thus determine their potential as antibacterial. Heart and caecal samples were taken from birds 7 and 42 days old. S. typhimurium and S. enteritidis were isolated and identified. These bacteria were cultured in Luria-Bertani medium (LB) in the presence of GOX (0.5, 1 and 2U/mL) and glucose (0.5, 1 and 2%) in combinations under a factorial design 32. Growth was monitored by absorbance change at 600nm for 6 hours of incubation. A significant reduction of the growth of both serotypes was observed when using 2 U/mL of GOX and different concentrations of glucose. This demonstrated the antibacterial capacity that the GOX/glucose system has on this genus, so it could be used as an additive for the preservation of poultry meats and derived products, in order to lengthen its storage time and minimize health risks.

Rol de la ecografía en la evaluación de la cortical ósea / Role of ultrasound in the evaluation of the bone cortex

La ecografía es el método de elección para la evaluación inicial de las partes blandas y el sistema muscular, siendo una técnica accesible, portátil y de bajo costo. Sin embargo, ha sido excluida de la exploración y evaluación de las patologías óseas debido a la idea de que es incapaz de penetrar la superficie del hueso. De hecho, muchos radiólogos admiten que esta es una de las pocas localizaciones donde la ecografía no resulta efectiva. Si bien algunos de estos conceptos son ciertos, este método puede aportar valiosa información diagnóstica sobre el estado del hueso, principalmente sobre la cortical ósea, en variadas circunstancias. La ecografía de la cortical ósea es posible por el artefacto de reflexión hiperecogénico lineal y regular que esta genera. En manos experimentadas, el reconocimiento y exploración de la superficie ósea permiten obtener datos muy útiles. Los tumores óseos generan reacciones periósticas fácilmente observables y caracterizables por ultrasonido, con la ventaja adicional de que el Doppler color identifica la vascularización del tumor. Las fracturas se observan como disrupciones de la cortical y la patología degenerativa se puede sospechar ante irregularidades corticales. Asimismo, es posible reconocer patologías como avulsiones, callos óseos de procesos previos e incluso fracturas por estrés. En este ensayo iconográfico mostramos diferentes casos de ecografías de partes blandas que evidenciaron hallazgos patológicos en la cortical ósea, permitiendo arribar a un diagnóstico o guiando en la elección de un estudio adicional.

Ultrasound is the best choice to evaluate soft tissues and the muscular system because of its accessibility, low cost and portability. Historically, the assumption has been that because ultrasound waves cannot penetrate bone, it is not useful in the evaluation of the skeletal system and its diseases. Radiologists admit that one of the very few tissue types which ultrasound cannot evaluate is bone. There is, of course, much truth in this, but recent studies suggest that ultrasound can provide valuable diagnostic information regarding the state of bone in some circumstances. The high reflectivity of sound at the bone-soft tissue interface is what allows the bone surface to be visualised. Valuable diagnostic information can be obtained by exploring bone surface in detail. The fact that bone tumours manifest themselves as periosteal reactions makes them easily recognisable by ultrasound, with the additional advantage if using Doppler colour. Bone fractures could be seen as interruptions of the bone continuity, and degenerative diseases should be suspected when an irregular surface is observed. Likewise, other pathologies such as avulsion fractures, bone callus stemming from previous processes, and even stress fractures can be identified. In this pictorial essay different cases are presented of musculoskeletal ultrasound in which bone surface was evaluated and abnormalities discovered, making a diagnosis or suggesting an additional test.

Traducción independiente de la estructura 5´cap del ARN genómico del virus dengue / 5´cap-independent translation of dengue virus genomic RNA

Objetivos. Analizar la participación de la caperuza metil-guanosín-trifosfato (5´cap) y de la región inicial del ARN genómico del virus dengue serotipo 2 (DENV-2) genotipo Americano en la traducción, utilizando un sistema libre de células obtenido de placenta humana. Materiales y métodos. Se preparó el plásmido recombinante pTZ18R-D2 conteniendo el ADN que codifica la 5´UTR y los primeros 201 nucleótidos de la cápside viral. Este plásmido se utilizó para transcribir el ARN correspondiente (ARN-D2), sin la 5´cap. El ARN-D2 fue traducido en un sistema constituido por la fracción posmitocondrial (S-30) de placenta humana y se evaluó la incorporación de [14C] aminoácidos en presencia del ARN-D2 y en su ausencia (control). Se diseñaron siete oligonucleótidos antisentido (OAs1-7) dirigidos contra secuencias de las estructuras SLA, SLB y cHP del ARN-D2 y se analizó el efecto de los mismos sobre la traducción ARN-D2. Resultados.El ARN-D2 produjo un incremento significativo (p<0,001) en la incorporación de [14C] aminoácidos, con estimulación del 75% de la actividad traduccional respecto al control. El análisis de los productos de traducción mostró un pico de incorporación correspondiente a péptidos con peso molecular aparente cercano al esperado (7,746 kDa). El OAs5, complementario a una secuencia de la estructura SLB del ARN-D2, inhibió completamente la traducción. Conclusiones. El ARN-D2 fue traducido de manera específica y eficiente, bajo condiciones semejantes a las intracelulares en humanos, por un mecanismo alternativo independiente de la 5´cap, que involucraría a la estructura SLB. Este mecanismo podría considerarse como blanco en el desarrollo de terapias antisentido para inhibir la reproducción del virus.

Objetives. To analyze the involvement of methyl guanosine triphosphate cap (5Æcap) and the start site of the genomic RNA of Dengue virus serotype 2 (DENV-2) American genotype in translation, using a cell-free system prepared from human placenta. Materials and methods. The recombinant plasmid pTZ18R-D2 was prepared containing DNA encoding the 5ÆUTR and the first 201 nucleotides of the viral capsid. This plasmid was used to transcribe the corresponding RNA (RNA-D2) without the 5Æ cap. The RNA-D2 was translated in a system consisting of the postmitochondrial fraction (S-30) from human placenta and the incorporation of [14C] aminoacids in the presence of RNA-D2 and in its absence (control) was evaluated. Seven antisenseoligonucleotides (OAs1-7) directed against sequences of the SLA, SLB and CHP structures of RNA-D2 were designed and the effect thereof on RNA-D2 translation was analyzed. Results.The RNA-D2 produced a significant increase (p<0.001) in the incorporation of [14C] amino acids, with 75% stimulation of translational activity compared to the control. Analysis of the translation products showed peak incorporation corresponding to peptides with apparent molecular weight close to the expected (7.746 kDa).The OAs5, complementary to a sequence of SLB structure of RNA-D2, completely inhibited translation. Conclusions. The RNA-D2 was translated specifically and efficiently under conditions similar to human intracellular conditions, by an alternative 5Æ cap-independent mechanism, which would involve the SLB structure. This mechanism might be seen as an aim in the development of antisense therapies to inhibit virus replication.

Actividad ATP hidrolasa asociada a ribosomas humanos como nuevo indicador para evaluar fármacos in vitro / Human ribosome-associated ATPase activiry as a new indicator for in vitro evaluation of drugs

En todos los ribosomas de mamíferos estudiados hasta el presente se ha identificado una actividad ATP hidrolasa (ATPasa) asociada. Su papel en el mecanismo de síntesis de proteínas está siendo estudiado actualmente y existen evidencias de homología funcional con el factor de elongación 3 (EF3) de hongos. Para caracterizar la actividad ATPasa ribosomal humana, se aislaron ribosomas 80S de placenta humana y se estudiaron los parámetros cinéticos de dicha actividad. La velocidad de hidrólisis (0,50 ± 0,05 nmol Pi/A260 80S/min) a concentración fisiológica de ATP (3 mmol/L) y la constante de catálisis aparente (0,5 ± 0,1 sˉ¹) están en el rango de Vmax (0,65 nmol Pi/A260 80S/min) y Km (58 µmol/L), determinados por análisis de Lineweaver-Burk, también son comparables a los reportados para ribosomas de otros mamíferos. El análisis de Eadie-Hofstee indicó la presencia de cooperativa positiva, con un Km aparente de 15 µmol/L para la forma más activa de la enzima. La ATPasa fue inhibida por metavanadato (inhibidor de EF3), y por los antibióticos emetina (inhibidor de la translocación) y anisomicina (actúa sobre los sitios ribosomales A y E). Además, la actividad no fue afectada por antibióticos específicos para otras funciones ribosomales en eucariotes ni tampoco por bloqueadores del ribosoma bacteriano. La sencillez y bajo costo del ensayo de actividad ATPasa ribosomal lo hacen ideal para el diseño de pruebas de alto rendimiento in vitro que harían posible tomar decisiones tempranas sobre el posible uso terapéutico en humanos de nuevos antibióticos o funguicidas

Uma viagem interdisciplinar na enigmática memória e o envelhecimento / In Inter-Disciplinary Journey into the Enigmatic and Aging

A despeito da celeridade com que avançam os achados da neurociência, a memória humana continua um enigma. Os cientistas já conhecem as áreas e os processos bioquímicos nelas envolvidas. Porém, ainda estão longe de desvendar totalmente seu funcionamento. O cérebro é um órgão extremamente complexo, justificando as dificuldades para se explicar os mecanismos nele envolvidos relacionados à aprendizagem, linguagem, memória ou afetividade ligada aos significados dos alimentos, especialmente quando articulados ao processo do envelhecimento. Assim, falar sobre memória e sobre envelhecimento torna-se um verdadeiro desafio. O objetivo deste estudo é um convite a uma reflexão sobre a relação destes temas, usando como articulação a interdisciplinaridade, envolvendo as ciências da Nutrição, da Fonoaudiologia e da Educação, sob a perspectiva da Gerontologia. Este artigo é do tipo revisão bibliográfica, com busca eletrônica e em bibliotecas públicas e privadas de artigos científicos nos diversos idiomas dos últimos cinco anos. Os estudos do envelhecimento e da memória, em seus vários significados, são complexos e, ao mesmo tempo, imprescindíveis para todos os profissionais que se propõe a atuar na área da saúde e da educação. Este trabalho sugere uma nova atitude diante do conhecimento destas questões, tendo a interdisciplinaridade como modo de olhar tais fenômenos sob múltiplos enfoques.

Incidencia, diagnóstico y tratamiento de enfermedades biliares extrahepáticas en el Hospital Billini, 1984-1987

Se realizó un estudio retrospectivo de los casos de colecistopatías extrahepáticas manejadas por el servicio de cirugía del Hospital Padre Billini desde enero de 1984 hasta diciembre de 1987 y se encontró una casuística de 63 casos, de ellos, 59 correspondían al sexo femenino y 4 al masculino para una población de casi 50 años. La edad más afectada en el hombre fue de 21-30 años y en la mujer por encima de 50 años